| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 缩略语表 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-20页 |
| ·伪狂犬病病毒分子生物学研究进展 | 第9-13页 |
| ·伪狂犬病病毒的基因组 | 第9-10页 |
| ·伪狂犬病病毒基因的转录顺序 | 第10页 |
| ·伪狂犬病病毒的结构蛋白 | 第10-13页 |
| ·衣壳和间质蛋白 | 第10-12页 |
| ·囊膜和糖蛋白 | 第12-13页 |
| ·伪狂犬病病毒的毒力基因 | 第13页 |
| ·VHS基因研究进展 | 第13-20页 |
| ·VHS及其同源基因 | 第14-16页 |
| ·VHS蛋白是一个核酸内切酶 | 第16页 |
| ·VHS蛋白的mRNA降解活性 | 第16-17页 |
| ·VHS蛋白与病毒结构蛋白VP16的相互作用 | 第17-18页 |
| ·VHS蛋白与宿主免疫反应 | 第18页 |
| ·VHS缺失病毒 | 第18-19页 |
| ·VHS基因的研究意义 | 第19-20页 |
| 2 研究目的和意义 | 第20-21页 |
| 3 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·材料 | 第21-27页 |
| ·病毒及细胞 | 第21页 |
| ·菌株及质粒 | 第21-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·酶及主要试剂 | 第23-24页 |
| ·试剂配方 | 第24-26页 |
| ·抗生素 | 第24页 |
| ·培养基 | 第24页 |
| ·质粒提取用缓冲液 | 第24-25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳相关溶液 | 第25页 |
| ·SDS-PAGE相关溶液 | 第25页 |
| ·Western-blot相关溶液 | 第25页 |
| ·ELISA相关溶液 | 第25-26页 |
| ·其它溶液 | 第26页 |
| ·PCR扩增引物 | 第26页 |
| ·实验动物 | 第26-27页 |
| ·方法 | 第27-32页 |
| ·PRV病毒的增殖 | 第27页 |
| ·PRV病毒基因组DNA的提取 | 第27页 |
| ·PCR模板的制备 | 第27页 |
| ·UL41基因的PCR扩增 | 第27页 |
| ·DNA回收 | 第27-28页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第28页 |
| ·连接产物的转化 | 第28页 |
| ·小量制备质粒DNA | 第28页 |
| ·质粒的大量制备及PEG纯化 | 第28-29页 |
| ·DNA重组技术 | 第29页 |
| ·序列分析及结构预测 | 第29-30页 |
| ·诱导表达 | 第30页 |
| ·包涵体提取与纯化 | 第30页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第30页 |
| ·免疫抗原的制各 | 第30页 |
| ·免疫程序 | 第30-31页 |
| ·ELISA检测 | 第31-32页 |
| 4 结果与分析 | 第32-41页 |
| ·UL41基因的PCR扩增与克隆 | 第32-33页 |
| ·UL41基因的序列测定 | 第33页 |
| ·UL41基因的氨基酸序列分析 | 第33-35页 |
| ·VHS蛋白系统进化分析 | 第35-36页 |
| ·VHS蛋白的结构预测 | 第36-37页 |
| ·UL41基因原核表达质粒pGEX-UL41的构建 | 第37页 |
| ·UL41基因在大肠杆菌中的表达与包涵体的提取 | 第37-38页 |
| ·融合蛋白的大量表达与抗血清的制备 | 第38页 |
| ·VHS和VP16抗血清的ELISA检测 | 第38页 |
| ·UL41基因真核表达质粒的构建 | 第38-39页 |
| ·UL48基因真核表达质粒的构建 | 第39页 |
| ·VHS和VP16蛋白共表达质粒的构建 | 第39-41页 |
| 5 讨论 | 第41-46页 |
| ·UL41基因的克隆与测序 | 第41页 |
| ·蛋白质的三维结构预测 | 第41页 |
| ·VHS蛋白的结构与功能分析 | 第41-42页 |
| ·系统进化树分析 | 第42-44页 |
| ·VHS蛋白的系统进化分析 | 第44页 |
| ·VHS和VP16蛋白的表达纯化与抗血清制备 | 第44-45页 |
| ·VHS与VP16蛋白的相互作用研究 | 第45页 |
| ·UL41与UL48基因真核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| 6 小结 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附录 | 第58页 |