第一部分: 文献综述 | 第1-21页 |
一、 植物耐盐研究 | 第8-12页 |
二、 谷胱甘肽转移酶和盐胁迫 | 第12-18页 |
三、 研究植物基因功能的策略 | 第18-21页 |
四、 存在问题 | 第21页 |
第二部分: 实验论文 | 第21-40页 |
一、 实验材料 | 第21-24页 |
二、 实验方法 | 第24-30页 |
1. 碱蓬cDNA文库的构建 | 第24页 |
2. GSTcDNA克隆的分离及BLAST分析 | 第24页 |
3. GST cDNA全序列的测定及引物设计 | 第24页 |
4. 大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第24-25页 |
5. 质粒的提取 | 第25页 |
6. 植物表达载体的构建及农杆菌的转化 | 第25-26页 |
7. PCR及酶切验证PGST | 第26页 |
8. 花序浸泡法转化拟南芥 | 第26-27页 |
9. 转基因植株的PCR检测 | 第27-28页 |
10. 拟南芥DNA的提取 | 第28-29页 |
11. 异硫氰酸胍法提取拟南芥总RNA | 第29页 |
12. Trizol试剂盒提取拟南芥总RNA及RT-PCR | 第29页 |
13. Northern检测转基因植株的表达情况 | 第29-30页 |
14. 在含盐培养基和土壤中研究转基因拟南芥和野生型拟南芥的生长情况 | 第30页 |
三、 结果与分析 | 第30-34页 |
1. 从碱蓬EST库中得到了GST的EST片断 | 第30页 |
2. 得到了GST cDNA得全长序列 | 第30-31页 |
3. 植物表达载体的构建及农杆菌转化结果 | 第31页 |
4. 转基因拟南芥的筛选结果 | 第31-32页 |
5. 转基因拟南芥的遗传分析结果 | 第32-33页 |
6. 转基因拟南芥的PCR鉴定结果 | 第33页 |
7. 转基因拟南芥的PCR-southern鉴定结果 | 第33-34页 |
8. RT-PCR和Northern鉴定结果 | 第34页 |
9. 在含盐培养基上和土壤中的生长情况 | 第34页 |
四、 讨论 | 第34-35页 |
五、 图版 | 第35-40页 |
参考文献 | 第40-45页 |
致谢 | 第45页 |