| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·二羟丙酮的性质及应用领域 | 第8-9页 |
| ·二羟丙酮的性质 | 第8页 |
| ·二羟丙酮的用途 | 第8-9页 |
| ·二羟丙酮的生产及市场概况 | 第9页 |
| ·二羟丙酮的生产方法 | 第9-10页 |
| ·二羟丙酮的化学合成法 | 第9页 |
| ·二羟丙酮的生物转化法 | 第9-10页 |
| ·甘油转化二羟丙酮的生产菌种及甘油的代谢途径 | 第10-13页 |
| ·自然生产菌种 | 第10-11页 |
| ·甘油的代谢途径 | 第11-12页 |
| ·二羟丙酮的代谢途径 | 第12-13页 |
| ·二羟丙酮的测定方法 | 第13页 |
| ·甘油转化二羟丙酮关键酶的研究 | 第13-15页 |
| ·脱氢酶 | 第13-14页 |
| ·甘油脱氢酶 | 第14-15页 |
| ·本研究的立题背景及内容 | 第15-16页 |
| 第二章 以甘油为底物产二羟丙酮菌种的筛选及初步鉴定 | 第16-28页 |
| ·引言 | 第16页 |
| ·材料与方法 | 第16-21页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·采样与初筛供试菌株 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16-17页 |
| ·试剂 | 第17-18页 |
| ·菌种筛选 | 第18页 |
| ·甘油测定方法 | 第18-19页 |
| ·二苯胺显色法检测DHA | 第19页 |
| ·高效液相色谱检测DHA 方法的建立 | 第19-20页 |
| ·生长曲线测定 | 第20页 |
| ·菌株鉴定 | 第20-21页 |
| ·结果与讨论 | 第21-27页 |
| ·DHA 显色测定法标准曲线 | 第21页 |
| ·菌种初筛结果 | 第21-22页 |
| ·发酵条件初探 | 第22-23页 |
| ·菌株鉴定 | 第23-24页 |
| ·高效液相色谱测定DHA 方法的建立 | 第24-27页 |
| ·本章小结 | 第27-28页 |
| 第三章 ACINETOBACTER SP.6－8 产二羟丙酮发酵条件的初步研究 | 第28-36页 |
| ·引言 | 第28页 |
| ·材料与方法 | 第28-29页 |
| ·主要仪器 | 第28页 |
| ·菌株 | 第28页 |
| ·培养基 | 第28页 |
| ·培养方法 | 第28-29页 |
| ·甘油测定方法 | 第29页 |
| ·二羟丙酮测定方法 | 第29页 |
| ·生长曲线测定 | 第29页 |
| ·结果与讨论 | 第29-34页 |
| ·Acinetobacter sp.6－8 在LB 培养基中的生长曲线 | 第29页 |
| ·发酵时间的确定 | 第29-30页 |
| ·初始甘油浓度的确定 | 第30-31页 |
| ·酵母膏对Acinetobacter sp. 6－8 发酵产DHA 的影响 | 第31页 |
| ·玉米浆对Acinetobacter sp. 6－8 发酵产DHA 的影响 | 第31-32页 |
| ·山梨醇的添加对Acinetobacter sp. 6－8 发酵产DHA 的影响 | 第32页 |
| ·产物DHA 添加对Acinetobacter sp. 6－8 发酵产DHA 的影响 | 第32-33页 |
| ·正交实验优化培养基碳氮源组成 | 第33-34页 |
| ·温度对Acinetobacter sp. 6－8 发酵产DHA 的影响 | 第34页 |
| ·本章小结 | 第34-36页 |
| 第四章 克雷伯氏菌甘油脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中表达 | 第36-46页 |
| ·引言 | 第36页 |
| ·材料与方法 | 第36-39页 |
| ·菌株和载体 | 第36-37页 |
| ·主要仪器 | 第37页 |
| ·培养基及培养条件 | 第37页 |
| ·工具酶及其它试剂 | 第37-38页 |
| ·基因组DNA 的提取 | 第38页 |
| ·甘油脱氢酶基因的克隆 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第38页 |
| ·大肠杆菌表达载体的构建及甘油脱氢酶基因的诱导表达 | 第38-39页 |
| ·重组菌全细胞蛋白SDS-PAGE 分析 | 第39页 |
| ·甘油脱氢酶酶活力测定方法 | 第39页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第39页 |
| ·结果与讨论 | 第39-45页 |
| ·甘油脱氢酶基因dhaD 的扩增及核苷酸序列分析 | 第39-41页 |
| ·含甘油脱氢酶基因dhaD 的重组载体pET-28a(+)-dhaD 的构建 | 第41-42页 |
| ·dhaD 基因在大肠杆菌中表达 | 第42页 |
| ·重组大肠杆菌生长曲线的测定 | 第42-43页 |
| ·重组大肠杆菌全细胞蛋白SDS-PAGE 电泳分析 | 第43-44页 |
| ·IPTG 诱导时间对重组菌中甘油脱氢酶表达的影响 | 第44页 |
| ·甘油脱氢酶酶活力测定 | 第44-45页 |
| ·重组大肠杆菌质粒稳定性分析 | 第45页 |
| ·本章小结 | 第45-46页 |
| 第五章 甘油脱氢酶的纯化及其酶学性质研究 | 第46-53页 |
| ·引言 | 第46页 |
| ·材料与方法 | 第46-48页 |
| ·菌株和质粒 | 第46页 |
| ·主要仪器 | 第46页 |
| ·培养基及培养条件 | 第46页 |
| ·甘油脱氢酶的纯化 | 第46-47页 |
| ·甘油脱氢酶酶活力测定 | 第47页 |
| ·蛋白质含量测定 | 第47页 |
| ·甘油脱氢酶酶学性质研究 | 第47页 |
| ·含甘油脱氢酶的全细胞转化 | 第47页 |
| ·二羟丙酮的含量测定 | 第47-48页 |
| ·结果与讨论 | 第48-51页 |
| ·dhaD 基因在E.coli BL21（DE3）中表达与重组蛋白的纯化 | 第48页 |
| ·甘油脱氢酶最适反应pH 及pH 稳定性 | 第48-49页 |
| ·甘油脱氢酶最适反应温度及温度稳定性 | 第49-50页 |
| ·不同金属离子及EDTA 对酶活性的影响 | 第50-51页 |
| ·甘油脱氢酶Km 值和Vmax 的测定 | 第51页 |
| ·重组大肠杆菌转化甘油生产二羟丙酮（DHA） | 第51页 |
| ·本章小结 | 第51-53页 |
| 主要结论及展望 | 第53-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第59页 |
