| 致谢 | 第4-9页 |
| 摘要 | 第9-10页 |
| 文献综述 | 第10-14页 |
| 1.1 猪胸膜肺炎放线杆菌形态特征及病原学 | 第10页 |
| 1.2 APP耐药现状 | 第10-12页 |
| 1.2.1 β-内酰胺类 | 第10-11页 |
| 1.2.2 四环素类 | 第11页 |
| 1.2.3 氟喹诺酮类 | 第11页 |
| 1.2.4 磺胺类 | 第11-12页 |
| 1.2.5 其它 | 第12页 |
| 1.3 猪胸膜肺炎放线杆菌分子流行病学研究 | 第12-13页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第13-14页 |
| 第一章 猪胸膜肺炎放线杆菌的分离鉴定及药敏试验 | 第14-24页 |
| 1 引言 | 第14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-17页 |
| 2.1 材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 菌株来源 | 第14页 |
| 2.1.2 试验药品 | 第14页 |
| 2.1.3 培养基及试剂 | 第14-15页 |
| 2.1.4 试验仪器 | 第15页 |
| 2.2 方法 | 第15-17页 |
| 2.2.1 培养基制备 | 第15页 |
| 2.2.2 菌株的初步分离 | 第15页 |
| 2.2.3 革兰氏染色、镜检 | 第15-16页 |
| 2.2.4 PCR鉴定 | 第16页 |
| 2.2.5 菌株保存 | 第16页 |
| 2.2.6 药物储备液配制 | 第16页 |
| 2.2.7 药物敏感性试验 | 第16-17页 |
| 3 结果与分析 | 第17-21页 |
| 3.1 APP分离鉴定结果 | 第17-19页 |
| 3.1.1 菌落形态及菌体形态 | 第18页 |
| 3.1.2 PCR鉴定结果 | 第18-19页 |
| 3.2 药敏试验结果 | 第19-20页 |
| 3.3 耐药谱分析 | 第20-21页 |
| 4 讨论 | 第21-22页 |
| 5 小结 | 第22-24页 |
| 第二章 猪胸膜肺炎放线杆菌β-内酰胺酶基因分析 | 第24-30页 |
| 1 引言 | 第24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-27页 |
| 2.1 材料 | 第24页 |
| 2.1.1 试剂 | 第24页 |
| 2.1.2 试验菌株 | 第24页 |
| 2.1.3 仪器 | 第24页 |
| 2.2 方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 基因组DNA制备 | 第24页 |
| 2.2.2 β-内酞胺酶基因检测 | 第24-25页 |
| 2.2.3 电感受态细胞制备及受体菌 | 第25-26页 |
| 2.2.4 质粒提取 | 第26页 |
| 2.2.5 电转化试验及转化子验证 | 第26页 |
| 2.2.6 接合试验及接合子验证 | 第26页 |
| 2.2.7 携带bla_(ROB-1)质粒序列分析 | 第26-27页 |
| 3 结果与分析 | 第27-28页 |
| 3.1 β-内酰胺酶基因检测结果 | 第27页 |
| 3.2 质粒转化接合试验结果 | 第27页 |
| 3.3 质粒序列分析 | 第27-28页 |
| 4 讨论 | 第28-29页 |
| 5 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 猪胸膜肺炎放线杆菌四环素类耐药基因分析 | 第30-38页 |
| 1 引言 | 第30页 |
| 2 材料与方法 | 第30-33页 |
| 2.1 材料 | 第30-31页 |
| 2.1.1 试剂 | 第30页 |
| 2.1.2 试验菌株 | 第30页 |
| 2.1.3 仪器 | 第30-31页 |
| 2.2 方法 | 第31-33页 |
| 2.2.1 基因组DNA制备 | 第31页 |
| 2.2.2 四环素类耐药基因检测 | 第31页 |
| 2.2.3 I-CeuI-PFGE和Southern blot工作液制备 | 第31-32页 |
| 2.2.4 I-CeuI-PFGE | 第32-33页 |
| 2.2.5 Southern blot杂交 | 第33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-35页 |
| 3.1 tet基因检测结果 | 第33-34页 |
| 3.2 基因探针效率检测 | 第34页 |
| 3.3 tet(M)基因杂交定位 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-36页 |
| 5 小结 | 第36-38页 |
| 第四章 猪胸膜肺炎放线杆菌其它类药物耐药基因分析 | 第38-42页 |
| 1 引言 | 第38页 |
| 2 材料与方法 | 第38-39页 |
| 2.1 材料 | 第38页 |
| 2.1.1 试剂 | 第38页 |
| 2.1.2 菌株 | 第38页 |
| 2.1.3 仪器 | 第38页 |
| 2.2 方法 | 第38-39页 |
| 2.2.1 基因组DNA的制备 | 第38页 |
| 2.2.2 喹诺酮类耐药基因检测 | 第38页 |
| 2.2.3 大环内酯类耐药基因检测 | 第38页 |
| 2.2.4 高水平耐氨基糖苷类的16S rRNA甲基化酶基因检测 | 第38页 |
| 2.2.5 林可胺类耐药基因检测 | 第38-39页 |
| 2.2.6 氟苯尼考、黏菌素、庆大霉素、链霉素、喹乙醇及磺胺类耐药基因检测 | 第39页 |
| 2.2.7 质粒接合转化试验 | 第39页 |
| 2.2.8 质粒序列分析 | 第39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-41页 |
| 3.1 耐药基因检测结果 | 第39-40页 |
| 3.2 携带floR质粒的序列分析 | 第40-41页 |
| 4 讨论 | 第41页 |
| 5 小结 | 第41-42页 |
| 第五章 猪胸膜肺炎放线杆菌PFGE分型 | 第42-48页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-44页 |
| 2.1 材料 | 第42页 |
| 2.1.1 试验菌株 | 第42页 |
| 2.1.2 培养基 | 第42页 |
| 2.1.3 试验试剂 | 第42页 |
| 2.1.4 试验仪器 | 第42页 |
| 2.2 方法 | 第42-44页 |
| 2.2.1 PFGE工作液制备 | 第42页 |
| 2.2.2 小胶块的制备 | 第42-43页 |
| 2.2.3 小胶块酶切 | 第43页 |
| 2.2.4 大胶块制备及电泳 | 第43-44页 |
| 2.2.5 聚类分析 | 第44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-45页 |
| 4 讨论 | 第45-46页 |
| 5 小结 | 第46-48页 |
| 全文结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-58页 |
| 英文摘要 | 第58-59页 |
