致谢 | 第5-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
文献综述 | 第10-20页 |
1 干扰素的研究进展 | 第10-15页 |
2 猪α干扰素的研究进展 | 第15-20页 |
引言 | 第20-21页 |
试验一 猪α干扰素突变体的构建、表达、纯化及结构测定 | 第21-31页 |
1 材料和方法 | 第21-23页 |
1.1 材料 | 第21页 |
1.2 方法 | 第21-23页 |
2 结果 | 第23-29页 |
2.1 猪α干扰素的序列比对 | 第24页 |
2.2 猪α干扰素三级预测及分析 | 第24-25页 |
2.3 猪α干扰素突变体基因的克隆与鉴定 | 第25-26页 |
2.4 重组质粒的表达及鉴定 | 第26-27页 |
2.5 重组质粒诱导条件的优化 | 第27-28页 |
2.6 重组蛋白的纯化 | 第28页 |
2.7 PoIFN-α-156s和PoIFN-α的二级结构测定 | 第28-29页 |
3 讨论 | 第29-31页 |
试验二 猪α干扰素及突变体体外生物活性测定 | 第31-38页 |
1 材料 | 第31页 |
2 方法 | 第31-34页 |
3 结果 | 第34-36页 |
3.1 PoIFN-α-156s和PoIFN-α在不同细胞系上安全浓度的测定 | 第34页 |
3.2 PoIFN-α-156s和PoIFN-α在不同细胞系上抑制VSV和PRV活性的测定 | 第34-35页 |
3.3 荧光PCR和TCID_(50)测定PoIFN-α-156s和PoIFN-α对VSV和PRV的抑制作用 | 第35-36页 |
3.4 PoIFN-α-156s能显著上调干扰素通路相关基因的表达 | 第36页 |
4 讨论 | 第36-38页 |
试验三 PoIFN-α-156s抑制小鼠体内VSV复制作用研究 | 第38-44页 |
1 材料 | 第38页 |
2 方法 | 第38-39页 |
3 结果 | 第39-42页 |
3.1 猪α干扰素在小鼠体内代谢的研究 | 第39页 |
3.2 试验处理组小鼠体重的变化 | 第39-40页 |
3.3 荧光PCR检测小鼠脏器的VSV病毒含量 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
试验四 猪α干扰素与IgG-Fc融合蛋白的构建、表达、纯化及抗病毒活性的测定 | 第44-54页 |
1. 材料 | 第44页 |
2 方法 | 第44-47页 |
3 结果 | 第47-51页 |
3.1 猪源IgG-Fc基因的克隆 | 第47页 |
3.2 猪α干扰素与IgG-Fc融合蛋白基因的克隆与鉴定 | 第47-48页 |
3.3 融合蛋白重组质粒的表达及可溶性分析 | 第48-49页 |
3.4 融合蛋白的二级结构的测定 | 第49页 |
3.5 PoIFN-α-2GS-Fc和PoIFN-α在不同细胞系上安全浓度的测定 | 第49-50页 |
3.6 PoIFN-α-2GS-Fc和PoIFN-α在不同细胞系上抑制VSV活性的测定 | 第50页 |
3.7 荧光PCR和TCID50测定PoIFN-α-2GS-Fc和PoIFN-α对VSV和PRV的抑制作用 | 第50-51页 |
3.8 PoIFN-α-2GS-Fc和PoIFN-α在小鼠体内代谢的研究 | 第51页 |
4 讨论 | 第51-54页 |
全文总结 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-62页 |
Abstract | 第62-64页 |