致谢 | 第1-11页 |
摘要 | 第11-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
1 文献综述 | 第16-42页 |
·桑树细菌性病害概况 | 第16-20页 |
·桑细菌性疫病(Mulberry Bacterial Blight) | 第16-17页 |
·桑青枯病(Mulberry Bacterial Wilt) | 第17-18页 |
·桑枝软腐病(Mulberry Shoot Soft Rot) | 第18-19页 |
·桑叶日灼病(Mulberry Leaf Scorch) | 第19页 |
·桑细菌性叶斑病(Mulberry Bacterial Leaf Spot) | 第19页 |
·桑树植原体病害(Mulberry Mycoplasmas Disease) | 第19-20页 |
·肠杆菌与植物病害 | 第20-33页 |
·肠杆菌科(Enterobacteriaceae)概况 | 第20-22页 |
·肠杆菌属中的植物病原菌 | 第22-24页 |
·生癌肠杆菌(E.cancerogenus) | 第22-23页 |
·阴沟肠杆菌(E.cloacae) | 第23-24页 |
·阴沟肠杆菌溶解肠杆菌亚种(E.cloacaesubsp.dissolvens) | 第24页 |
·超压肠杆菌(E.nimipressuralis) | 第24页 |
·梨形肠杆菌(E.pyrinus) | 第24页 |
·肠杆菌的分离鉴定 | 第24-31页 |
·基本分离及鉴定方法 | 第25-26页 |
·致病性测定 | 第26-27页 |
·生理生化鉴定方法 | 第27页 |
·分子生物学鉴定 | 第27-31页 |
·肠杆菌的其他研究 | 第31-33页 |
·植物生防菌 | 第31页 |
·植物促生菌 | 第31-32页 |
·生物降解菌 | 第32页 |
·生物产氢菌 | 第32-33页 |
·在食品生产中的潜在危害 | 第33页 |
·植物来源肠杆菌的研究热点 | 第33-36页 |
·肠杆菌作为生防菌和植物促生菌在作物中的定殖机制研究 | 第33-34页 |
·生物标记在肠杆菌与植物互作研究中的作用 | 第34-35页 |
·生物多样性和基因多态性的研究 | 第35-36页 |
·肠杆菌新植物细菌病害的研究报道 | 第36页 |
·新病害报道的程序与引起植物细菌病害的病原种类 | 第36-40页 |
·本研究的背景及研究内容与目的 | 第40-42页 |
·研究的背景 | 第40-41页 |
·研究的内容与目的 | 第41-42页 |
2 桑树细菌性枯萎病的病原学研究 | 第42-72页 |
·材料和方法 | 第43-51页 |
·病害调查、病原分离及致病性测定 | 第43-45页 |
·田间症状与描述 | 第43页 |
·病害样品的采集及其病原菌的分离纯化和保存 | 第43页 |
·病原菌的致病性鉴定 | 第43-45页 |
·病原菌的形态及基本生理生化特性 | 第45-46页 |
·菌落及菌体形态观察 | 第45页 |
·生理生化特性 | 第45页 |
·碳源利用(Biolog法) | 第45-46页 |
·病原菌抗生素抗性鉴定 | 第46页 |
·抗生素 | 第46页 |
·不同浓度抗生素溶液制备 | 第46页 |
·测试菌/培养基混液准备 | 第46页 |
·纸片法对测试菌的抗生素敏感性测定 | 第46页 |
·病原全细胞脂肪酸鉴定 | 第46-48页 |
·试剂、仪器及分析软件 | 第46-47页 |
·脂肪酸的提取过程: | 第47页 |
·脂肪酸的检测 | 第47-48页 |
·病原菌16S rDNA及RNA聚合酶基因(rpoB)的序列测定 | 第48-51页 |
·试剂和仪器 | 第48页 |
·细菌DNA抽提 | 第48-49页 |
·PCR扩增 | 第49-51页 |
·结果与分析 | 第51-65页 |
·桑树细菌性枯萎病病害症状描述 | 第51-53页 |
·田间症状描述 | 第51页 |
·接种症状描述 | 第51-53页 |
·番茄组培苗致病性测定 | 第53页 |
·桑树细菌枯萎病病原菌的特征 | 第53-59页 |
·形态观察 | 第53-54页 |
·生理生化和碳源(Biolog)利用特征 | 第54-59页 |
·病原菌全细胞脂肪酸鉴定结果 | 第59-61页 |
·病原菌两个基因序列的鉴定 | 第61-65页 |
·16S rDNA序列分析 | 第61-62页 |
·RNA聚合酶基因(rpoB)的序列鉴定 | 第62-65页 |
·病原菌抗生素抗性鉴定 | 第65页 |
·讨论 | 第65-71页 |
·肠杆菌引起的桑树细菌性枯萎病的特点 | 第66页 |
·引起桑"枯萎"病的病原菌—肠杆菌的特征 | 第66-67页 |
·桑树"枯萎"病和桑树"青枯"病症状与病原的区别 | 第67-69页 |
·肠杆菌引起植物细菌性病害的特征 | 第69-70页 |
·植物致病肠杆菌的序列分析 | 第70-71页 |
·本章小结 | 第71-72页 |
3 利用gfp/lux双标记研究桑细菌性枯萎菌致病机理 | 第72-91页 |
·材料与方法 | 第72-78页 |
·强致病菌株的gfp/luxAB双基因标记 | 第72-74页 |
·菌株、质粒及培养基 | 第72-73页 |
·试剂及仪器 | 第73页 |
·Enterobacter sp.R18-2感受态细胞的制备 | 第73-74页 |
·质粒提取 | 第74页 |
·Enterobacter sp.R18-2的电击转化 | 第74页 |
·阳性转化子的荧光检测 | 第74页 |
·GFP标记菌的PCR检测及序列测定 | 第74-75页 |
·菌落PCR法对标记菌的GFP基因进行检测 | 第74-75页 |
·标记菌的验证 | 第75页 |
·标记菌的特性研究 | 第75-76页 |
·菌落形态和菌体形态观察 | 第75页 |
·流式细胞仪检测 | 第75页 |
·GFP标记对菌株生长的影响 | 第75-76页 |
·标记菌株R18-gfp-1中GFP表达稳定性 | 第76页 |
·标记菌株R18-gfp-1的致病性 | 第76页 |
·GFP标记菌在感病植株体内的定殖研究 | 第76-78页 |
·原始菌和GFP标记菌在桑树体内的增殖 | 第76-77页 |
·原始菌和GFP标记菌在番茄组培苗体内的增殖 | 第77-78页 |
·GFP标记菌在番茄组培苗组织细胞寄生能力的观察 | 第78页 |
·结果分析 | 第78-88页 |
·桑树细菌性枯萎病病原菌的gfp/luxAB基因双标记 | 第78-81页 |
·阳性转化子的荧光检测 | 第79-80页 |
·阳性转化子的gfp-PCR鉴定 | 第80页 |
·标记菌的16S rDNA基因部分序列分析 | 第80-81页 |
·GFP标记菌的特性研究 | 第81-83页 |
·菌落形态和菌体形态观察 | 第81-82页 |
·GFP标记对菌株生长的影响 | 第82-83页 |
·标记菌株R18-gfp-1中GFP表达稳定性 | 第83页 |
·标记菌株R18-gfp-1的致病性鉴定 | 第83页 |
·GFP标记菌在感病植株体内的定殖研究 | 第83-88页 |
·病原菌在桑树体内的增殖 | 第84-85页 |
·病原菌在番茄组培苗体内的增殖 | 第85-86页 |
·GFP标记菌在桑树和番茄组培苗组织细胞寄生能力的观察 | 第86-88页 |
·讨论 | 第88-90页 |
·Enterobacter sp.R18-2 gfp/lux标记菌株的构建 | 第89页 |
·Enterobacter sp.R18-2 gfp/lux标记菌株的致病力 | 第89-90页 |
·本章小结 | 第90-91页 |
4 桑树枯萎病病原菌的多态性研究 | 第91-108页 |
·材料与方法 | 第91-95页 |
·菌株的收集及保存 | 第91-92页 |
·致病能力多态性分析 | 第92-94页 |
·普通烟草过敏性反应鉴定 | 第92-93页 |
·桑树致病能力测定 | 第93页 |
·其它作物的致病性测定 | 第93页 |
·生姜块茎和洋葱球茎致病性测定 | 第93-94页 |
·脂肪酸多态性分析 | 第94页 |
·PCR扩增和序列分析 | 第94-95页 |
·基因组DNA的制备 | 第94页 |
·PCR扩增体系 | 第94-95页 |
·数据分析 | 第95页 |
·结果分析 | 第95-105页 |
·桑树枯萎病病原菌的过敏性反应测定 | 第95-96页 |
·桑树枯萎病病原菌在桑树离体培养枝条上致病力的测定 | 第96-98页 |
·桑树枯萎病病原菌脂肪酸多态性分析 | 第98页 |
·桑枯萎病病原菌基因多态性分析 | 第98-103页 |
·桑树枯萎病病原菌对其它作物致病力测定 | 第103-105页 |
·讨论 | 第105-106页 |
·本章小结 | 第106-108页 |
5 结论与展望 | 第108-110页 |
·结论 | 第108页 |
·展望 | 第108-110页 |
参考文献 | 第110-121页 |
附录-1 作者简介及其博士期间论文发表情况 | 第121-122页 |
1 作者简介 | 第121页 |
2 博士期间论文发表情况 | 第121-122页 |
附录-2 培养基和试剂配方 | 第122-123页 |
附录-3 图片与表格 | 第123-128页 |