| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-12页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-33页 |
| ·马铃薯晚疫病的危害 | 第13-18页 |
| ·晚疫病病原 | 第14-16页 |
| ·晚疫病为害症状 | 第16页 |
| ·晚疫病的流行病学 | 第16-17页 |
| ·晚疫病的危害与防治 | 第17-18页 |
| ·马铃薯晚疫病抗性的分子遗传机制 | 第18-22页 |
| ·垂直抗性 | 第18-20页 |
| ·水平抗性 | 第20-22页 |
| ·植物蛋白激酶研究 | 第22-31页 |
| ·蛋白激酶的结构 | 第23-24页 |
| ·蛋白激酶的分类和功能 | 第24-31页 |
| ·本研究的目的、意义和主要内容 | 第31-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-47页 |
| ·实验材料 | 第33-34页 |
| ·植物材料 | 第33页 |
| ·晚疫病原菌 | 第33-34页 |
| ·菌种、质粒及分子生物学相关试剂 | 第34页 |
| ·实验方法 | 第34-47页 |
| ·离体叶片处理 | 第34页 |
| ·活体叶片接种 | 第34-35页 |
| ·质粒的小量提取 | 第35页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第35-36页 |
| ·农杆菌感受态的制备及转化 | 第36页 |
| ·农杆菌介导的植物遗传转化 | 第36-37页 |
| ·植物基因组DNA的提取 | 第37-39页 |
| ·转基因植株的Southern杂交 | 第39-41页 |
| ·马铃薯叶片RNA的提取 | 第41页 |
| ·RACE(Rapid Amplification of cDNA Ends,cDNA末端快速扩增) | 第41-43页 |
| ·半定量RT-PCR | 第43-44页 |
| ·蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第44-47页 |
| 第三章 马铃薯StPK1基因cDNA、gDNA、启动子的克隆、定位及原核表达 | 第47-70页 |
| ·前言 | 第47页 |
| ·材料和方法 | 第47-53页 |
| ·植物材料 | 第47页 |
| ·RACE | 第47-48页 |
| ·分别在3个抗性基因型的gDNA中扩增StPK1全长cDNA和gDNA | 第48页 |
| ·马铃薯StPK1基因的定位 | 第48页 |
| ·马铃薯StPK1基因启动子的克隆 | 第48-51页 |
| ·烟草的遗传转化及GUS染色 | 第51页 |
| ·马铃薯StPK1基因的原核表达 | 第51-53页 |
| ·结果与分析 | 第53-68页 |
| ·马铃薯StPK1基因cDNA的克隆 | 第53-57页 |
| ·StPK1生物信息学分析 | 第57-58页 |
| ·马铃薯StPK1全长gDNA的克隆 | 第58-60页 |
| ·马铃薯StPK1基因的定位 | 第60-61页 |
| ·马铃薯StPK1基因启动子的克隆 | 第61-64页 |
| ·马铃薯StPK1基因启动子的活性分析 | 第64-66页 |
| ·马铃薯StPK1基因的原核表达 | 第66-68页 |
| ·讨论 | 第68-70页 |
| 第四章 马铃薯StPK1基因的表达研究 | 第70-79页 |
| ·前言 | 第70页 |
| ·材料与方法 | 第70-71页 |
| ·生物及非生物胁迫处理 | 第70页 |
| ·StPK1在不同器官中的表达 | 第70-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-76页 |
| ·接种晚疫病后StPK1基因的表达分析 | 第71-74页 |
| ·4个信号分子对StPK1表达的影响 | 第74页 |
| ·StPK1被SA诱导的深入研究 | 第74-76页 |
| ·StPK1在不同器官中的表达 | 第76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| 第五章 StPK1基因的功能研究 | 第79-97页 |
| ·前言 | 第79页 |
| ·材料与方法 | 第79-85页 |
| ·植物材料与菌株 | 第79页 |
| ·StPK1基因超量表达载体的构建 | 第79-81页 |
| ·StPK1基因干涉表达载体的构建 | 第81-82页 |
| ·马铃薯遗传转化 | 第82页 |
| ·再生植株的鉴定 | 第82-83页 |
| ·晚疫病接种鉴定 | 第83页 |
| ·马铃薯相关抗性基因在晚疫病原菌接种的转基因株系中的表达 | 第83-84页 |
| ·马铃薯相关抗性基因在SA诱导后的表达 | 第84-85页 |
| ·结果与分析 | 第85-95页 |
| ·StPK1基因超量表达载体的构建 | 第85-87页 |
| ·StPK1基因干涉表达载体的构建 | 第87-88页 |
| ·马铃薯遗传转化 | 第88页 |
| ·再生植株的鉴定 | 第88-90页 |
| ·StPK1基因在马铃薯转基因株系中的表达研究 | 第90-92页 |
| ·StPK1基因与马铃薯的抗病反应呈负相关 | 第92页 |
| ·StPK1基因负调控下游抗性相关基因的表达 | 第92-95页 |
| ·被StPK1基因负调控的5个基因受SA诱导表达 | 第95页 |
| ·讨论 | 第95-97页 |
| 第六章 马铃薯StLRPK1基因的克隆、表达和功能初探 | 第97-115页 |
| ·前言 | 第97-98页 |
| ·材料和方法 | 第98-101页 |
| ·植物材料、菌株和试剂 | 第98页 |
| ·RT-PCR、RACEs与全长StLRPK1 cDNA的克隆 | 第98-99页 |
| ·StLRPK1基因超量表达载体的构建 | 第99-100页 |
| ·StLRPK1基因转化烟草 | 第100页 |
| ·再生植株的鉴定 | 第100页 |
| ·StLRPK1转基因烟草的晚疫病接种分析 | 第100-101页 |
| ·结果与分析 | 第101-114页 |
| ·RT-PCR和StLRPK1全长cDNA的克隆 | 第101-103页 |
| ·StLRPK1生物信息学分析 | 第103-105页 |
| ·StLRPK1基因转录水平表达分析 | 第105-110页 |
| ·StLRPK1基因超量表达载体的构建 | 第110-111页 |
| ·StLRPK1基因转化烟草和再生植株的鉴定 | 第111-113页 |
| ·StLRPK1转基因烟草的晚疫病接种分析 | 第113-114页 |
| ·讨论 | 第114-115页 |
| 第七章 马铃薯Star基因的克隆、表达和转化烟草研究 | 第115-132页 |
| ·前言 | 第115页 |
| ·材料和方法 | 第115-117页 |
| ·Star全长cDNA的克隆及表达分析 | 第115-116页 |
| ·Star基因超量表达载体的构建及转化烟草 | 第116-117页 |
| ·结果与分析 | 第117-130页 |
| ·RT-PCR,3'-RACE和5'-RACE | 第117-118页 |
| ·Star生物信息学分析 | 第118-122页 |
| ·Star基因转录水平表达分析 | 第122-124页 |
| ·Star基因超量表达载体的构建 | 第124-126页 |
| ·Star基因转化烟草 | 第126-127页 |
| ·Star转基因烟草的晚疫病接种分析 | 第127-128页 |
| ·烟草中克隆Star的同源基因 | 第128-130页 |
| ·讨论 | 第130-132页 |
| 第8章 总讨论 | 第132-137页 |
| ·StPK1在马铃薯晚疫病抗病反应过程中的可能机制 | 第132-135页 |
| ·StLRPK1和Star在马铃薯晚疫病抗病反应过程中的作用 | 第135页 |
| ·研究展望 | 第135-137页 |
| 参考文献 | 第137-153页 |
| 附录 | 第153-161页 |
| 附录1 ESTs原始序列 | 第153-154页 |
| 附录2 StPK1基因GenBank登记信息 | 第154-155页 |
| 附录3 StLRPK1基因GenBank登记信息 | 第155-158页 |
| 附录4 Star基因GenBank登记信息 | 第158-160页 |
| 附录5 博士在读期间已发表或接收的文章 | 第160-161页 |
| 致谢 | 第161页 |
