摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-42页 |
·马铃薯晚疫病概述 | 第14-16页 |
·病原菌的特征 | 第14页 |
·晚疫病的症状与流行 | 第14-15页 |
·病原菌的生理小种 | 第15页 |
·病原菌分子生物学 | 第15页 |
·晚疫病防治的诸多困难 | 第15-16页 |
·马铃薯晚疫病抗性分子遗传规律 | 第16-19页 |
·垂直抗性 | 第16-17页 |
·水平抗性 | 第17-19页 |
·植物诱导抗病性 | 第19-30页 |
·植物诱导抗病性的概念 | 第19-20页 |
·诱导抗病性可能的信号途径 | 第20-25页 |
·诱导抗性相关防卫反应及其基因表达 | 第25-30页 |
·BABA诱导植物抗病性研究进展 | 第30-36页 |
·BABA诱导的植物抗病性 | 第31-32页 |
·BABA在植物体内的吸收运转 | 第32-34页 |
·BABA诱导的抗病机理 | 第34-36页 |
·基因差异表达的研究方法 | 第36-40页 |
·mRNA差异显示 | 第37页 |
·抑制差减杂交 | 第37页 |
·基因芯片技术 | 第37-38页 |
·基因表达系列分析 | 第38页 |
·cDNA-AFLP技术 | 第38-40页 |
·本研究的目的与内容 | 第40-42页 |
第二章 材料与方法 | 第42-49页 |
·植物材料 | 第42页 |
·病原菌繁育 | 第42页 |
·燕麦培养基繁育法 | 第42页 |
·块茎薄片繁育法 | 第42页 |
·总RNA抽提及mRNA分离 | 第42-44页 |
·总RNA抽提 | 第42-43页 |
·mRNA分离 | 第43-44页 |
·cDNA-AFLP体系的优化 | 第44-47页 |
·双链cDNA合成及限制性内切酶酶切 | 第44-45页 |
·预扩增与选择性扩增 | 第45-46页 |
·扩增产物的电泳检测 | 第46-47页 |
·差异片段回收、克隆及测序 | 第47-49页 |
·差异片段回收与扩增 | 第47页 |
·连接反应 | 第47页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第47-48页 |
·阳性克隆筛选、鉴定与测序 | 第48-49页 |
第三章 β-氨基丁酸对马铃薯晚疫病水平抗性品系的诱抗作用 | 第49-55页 |
·前言 | 第49页 |
·材料与方法 | 第49-50页 |
·植物材料、β-氨基丁酸及晚疫病病原菌 | 第49页 |
·β-氨基丁酸处理 | 第49页 |
·病原菌接种 | 第49-50页 |
·病情调查 | 第50页 |
·统计分析 | 第50页 |
·结果与分析 | 第50-53页 |
·镜检晚疫病菌 | 第50页 |
·马铃薯叶片抗性鉴定 | 第50-53页 |
·讨论 | 第53-55页 |
第四章 马铃薯晚疫病水平抗性与β-氨基丁酸诱导抗性防卫系统基因的差异显示 | 第55-75页 |
·前言 | 第55-56页 |
·材料与方法 | 第56-57页 |
·植物材料 | 第56页 |
·病原菌接种及β-氨基丁酸处理 | 第56页 |
·差异片段的量化及筛选 | 第56页 |
·EST测序、检索 | 第56-57页 |
·半定量RT-PCR分析 | 第57页 |
·结果 | 第57-69页 |
·马铃薯叶片在病原菌接种和β-氨基丁酸处理后的表型变化 | 第57页 |
·叶片总RNA,mRNA及cDNA的质量 | 第57-59页 |
·cDNA-AFLP分析 | 第59-63页 |
·半定量RT-PCR分析验证cDNA-AFLP结果可靠性 | 第63-68页 |
·差异片段在BABA处理的马铃薯与病原菌互作中的表达 | 第68-69页 |
·讨论 | 第69-75页 |
·BABA在很大程度上诱导植物防卫基因的表达 | 第69-74页 |
·BABA诱导抗性与病原诱导抗性存在差异 | 第74-75页 |
第五章 利用病毒诱导的基因沉默体系初步验证基因功能 | 第75-81页 |
·前言 | 第75页 |
·材料与方法 | 第75-76页 |
·材料种植及载体构建 | 第75-76页 |
·病毒、病原菌接种 | 第76页 |
·病情调查 | 第76页 |
·结果与分析 | 第76-79页 |
·VIGS载体构建结果 | 第76-77页 |
·晚疫病菌P.infestans接种烟草结果 | 第77-79页 |
·讨论 | 第79-81页 |
第六章 StWRKY5基因克隆及表达谱分析 | 第81-90页 |
·前言 | 第81页 |
·材料与方法 | 第81-82页 |
·植物材料与处理 | 第81-82页 |
·RNA小样抽提、3'-RACE及RT-PCR | 第82页 |
·DNA大量抽提及Southern杂交 | 第82页 |
·结果与分析 | 第82-87页 |
·StWRKY5的cDNA-AFLP表达谱 | 第82-83页 |
·StWRKY5的5'序列鉴定和3'全长扩增 | 第83-84页 |
·StWRKY5基因的序列分析 | 第84-87页 |
·StWRKY5基因Southern杂交 | 第87页 |
·StWRKY5基因生物因子与非生物因子诱导表达谱初步分析 | 第87页 |
·讨论 | 第87-90页 |
第七章 总讨论 | 第90-93页 |
·BABA诱导抗性产生的现象 | 第90页 |
·BABA诱导抗性产生的机制 | 第90-92页 |
·研究展望 | 第92-93页 |
参考文献 | 第93-111页 |
附录1 本实验所用的SAS软件所需的Anova程序和GLM程序 | 第111-112页 |
附录2 差异片段与NCBI数据库和TIGR数据库中已知基因的同源性比较结果 | 第112-119页 |
附录3 差异片段cDNA-AFLP的时间表达模式 | 第119-123页 |
致谢 | 第123页 |