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马铃薯晚疫病水平抗性与β-氨基丁酸诱导抗性防卫系统基因表达的差异

摘要第1-10页
Abstract第10-12页
缩略词表第12-13页
第一章 文献综述第13-42页
   ·马铃薯晚疫病概述第14-16页
     ·病原菌的特征第14页
     ·晚疫病的症状与流行第14-15页
     ·病原菌的生理小种第15页
     ·病原菌分子生物学第15页
     ·晚疫病防治的诸多困难第15-16页
   ·马铃薯晚疫病抗性分子遗传规律第16-19页
     ·垂直抗性第16-17页
     ·水平抗性第17-19页
   ·植物诱导抗病性第19-30页
     ·植物诱导抗病性的概念第19-20页
     ·诱导抗病性可能的信号途径第20-25页
     ·诱导抗性相关防卫反应及其基因表达第25-30页
   ·BABA诱导植物抗病性研究进展第30-36页
     ·BABA诱导的植物抗病性第31-32页
     ·BABA在植物体内的吸收运转第32-34页
     ·BABA诱导的抗病机理第34-36页
   ·基因差异表达的研究方法第36-40页
     ·mRNA差异显示第37页
     ·抑制差减杂交第37页
     ·基因芯片技术第37-38页
     ·基因表达系列分析第38页
     ·cDNA-AFLP技术第38-40页
   ·本研究的目的与内容第40-42页
第二章 材料与方法第42-49页
   ·植物材料第42页
   ·病原菌繁育第42页
     ·燕麦培养基繁育法第42页
     ·块茎薄片繁育法第42页
   ·总RNA抽提及mRNA分离第42-44页
     ·总RNA抽提第42-43页
     ·mRNA分离第43-44页
   ·cDNA-AFLP体系的优化第44-47页
     ·双链cDNA合成及限制性内切酶酶切第44-45页
     ·预扩增与选择性扩增第45-46页
     ·扩增产物的电泳检测第46-47页
   ·差异片段回收、克隆及测序第47-49页
     ·差异片段回收与扩增第47页
     ·连接反应第47页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化第47-48页
     ·阳性克隆筛选、鉴定与测序第48-49页
第三章 β-氨基丁酸对马铃薯晚疫病水平抗性品系的诱抗作用第49-55页
   ·前言第49页
   ·材料与方法第49-50页
     ·植物材料、β-氨基丁酸及晚疫病病原菌第49页
     ·β-氨基丁酸处理第49页
     ·病原菌接种第49-50页
     ·病情调查第50页
     ·统计分析第50页
   ·结果与分析第50-53页
     ·镜检晚疫病菌第50页
     ·马铃薯叶片抗性鉴定第50-53页
   ·讨论第53-55页
第四章 马铃薯晚疫病水平抗性与β-氨基丁酸诱导抗性防卫系统基因的差异显示第55-75页
   ·前言第55-56页
   ·材料与方法第56-57页
     ·植物材料第56页
     ·病原菌接种及β-氨基丁酸处理第56页
     ·差异片段的量化及筛选第56页
     ·EST测序、检索第56-57页
     ·半定量RT-PCR分析第57页
   ·结果第57-69页
     ·马铃薯叶片在病原菌接种和β-氨基丁酸处理后的表型变化第57页
     ·叶片总RNA,mRNA及cDNA的质量第57-59页
     ·cDNA-AFLP分析第59-63页
     ·半定量RT-PCR分析验证cDNA-AFLP结果可靠性第63-68页
     ·差异片段在BABA处理的马铃薯与病原菌互作中的表达第68-69页
   ·讨论第69-75页
     ·BABA在很大程度上诱导植物防卫基因的表达第69-74页
     ·BABA诱导抗性与病原诱导抗性存在差异第74-75页
第五章 利用病毒诱导的基因沉默体系初步验证基因功能第75-81页
   ·前言第75页
   ·材料与方法第75-76页
     ·材料种植及载体构建第75-76页
     ·病毒、病原菌接种第76页
     ·病情调查第76页
   ·结果与分析第76-79页
     ·VIGS载体构建结果第76-77页
     ·晚疫病菌P.infestans接种烟草结果第77-79页
   ·讨论第79-81页
第六章 StWRKY5基因克隆及表达谱分析第81-90页
   ·前言第81页
   ·材料与方法第81-82页
     ·植物材料与处理第81-82页
     ·RNA小样抽提、3'-RACE及RT-PCR第82页
     ·DNA大量抽提及Southern杂交第82页
   ·结果与分析第82-87页
     ·StWRKY5的cDNA-AFLP表达谱第82-83页
     ·StWRKY5的5'序列鉴定和3'全长扩增第83-84页
     ·StWRKY5基因的序列分析第84-87页
     ·StWRKY5基因Southern杂交第87页
     ·StWRKY5基因生物因子与非生物因子诱导表达谱初步分析第87页
   ·讨论第87-90页
第七章 总讨论第90-93页
   ·BABA诱导抗性产生的现象第90页
   ·BABA诱导抗性产生的机制第90-92页
   ·研究展望第92-93页
参考文献第93-111页
附录1 本实验所用的SAS软件所需的Anova程序和GLM程序第111-112页
附录2 差异片段与NCBI数据库和TIGR数据库中已知基因的同源性比较结果第112-119页
附录3 差异片段cDNA-AFLP的时间表达模式第119-123页
致谢第123页

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