中文摘要 | 第1-9页 |
英文摘要 | 第9-13页 |
1 猪传染性胸膜肺炎病原综述 | 第13-37页 |
·病原形态学及生化特性 | 第13-14页 |
·病原细菌APP分类 | 第14-17页 |
·生物型 | 第14页 |
·血清型 | 第14-15页 |
·APP基因型 | 第15-17页 |
·血清型分布 | 第17-18页 |
·病原主要毒力因子及其在致病机理中的作用 | 第18-24页 |
·定殖因子 | 第19-20页 |
·细菌防御进攻因子 | 第20-24页 |
·病原重要毒力因子分子生物学特性 | 第24-28页 |
·毒素分子生物学 | 第24-26页 |
·APP转铁结合蛋白分子生物学 | 第26-28页 |
·诊断方法 | 第28-32页 |
·血清学诊断方法 | 第28-32页 |
·分子生物学诊断 | 第32页 |
·猪传染性胸膜肺炎的免疫预防 | 第32-37页 |
·灭活疫苗 | 第32-33页 |
·亚单位疫苗 | 第33-34页 |
·弱毒疫苗 | 第34-35页 |
·ghosts疫苗 | 第35-36页 |
·疫苗免疫途径的研究 | 第36-37页 |
2 APP apxIVA基因序列特性分析 | 第37-73页 |
·研究目的和意义 | 第37页 |
·研究内容 | 第37-38页 |
·材料 | 第38-40页 |
·菌株和载体 | 第38页 |
·序列及分析软件 | 第38页 |
·引物设计 | 第38-39页 |
·主要试剂 | 第39页 |
·主要仪器 | 第39-40页 |
·方法 | 第40-46页 |
·apxIVA基因序列结构特性分析 | 第40页 |
·apxIVA基因序列在基因组外复制特性分析 | 第40-46页 |
·结果 | 第46-65页 |
·apxIVA基因结构特性 | 第46-54页 |
·apxIVA基因片段在基因组外复制的特性 | 第54-61页 |
·apxIVA基因重复序列在基因组外复制中的变异模式 | 第61-65页 |
·讨论 | 第65-72页 |
·关于研究中使用的载体和宿主菌 | 第65-66页 |
·apxIVA基因中重复序列类型 | 第66-67页 |
·apxIVA基因中的重复序列对分子生物学操作的影响 | 第67-68页 |
·重复序列稳定性的研究方法 | 第68页 |
·重复序列在基因组外复制过程中不稳定性的机制 | 第68-70页 |
·apxIVA基因中重复序列的生物学意义 | 第70-72页 |
·小结 | 第72-73页 |
3 rApxIVA/rTbpB亚单位复合菌苗对小鼠的免疫研究 | 第73-123页 |
·研究目的和意义 | 第73页 |
·研究内容 | 第73-74页 |
·材料 | 第74-76页 |
·质粒与菌株 | 第74页 |
·引物 | 第74页 |
·抗体 | 第74-75页 |
·试验动物 | 第75页 |
·主要试剂 | 第75页 |
·主要仪器 | 第75-76页 |
·方法 | 第76-87页 |
·鼠抗APP感染血清的制备 | 第76页 |
·细菌培养 | 第76-77页 |
·重组蛋白制备 | 第77-78页 |
·检测抗原的制备 | 第78-79页 |
·SDS-PAGE电泳和Western blot分析 | 第79-81页 |
·APP荧光定量PCR检测方法的建立 | 第81-82页 |
·疫苗制备及动物免疫 | 第82-84页 |
·动物免疫 | 第84页 |
·半数致死量(LD50)的测定 | 第84页 |
·攻毒 | 第84页 |
·血清特异性抗体监测 | 第84-85页 |
·脾淋巴细胞转化试验 | 第85-86页 |
·小鼠肺脏组织APP带菌量检测 | 第86-87页 |
·小鼠肺脏病理变化 | 第87页 |
·试验数据分析 | 第87页 |
·结果 | 第87-110页 |
·菌种鉴定结果 | 第87-88页 |
·细菌浊度与活菌数的关系 | 第88页 |
·LD50测定结果 | 第88页 |
·重组蛋白表达结果 | 第88-92页 |
·ELISA包被抗原纯化结果 | 第92-93页 |
·APP实时荧光定量PCR检测方法建立结果 | 第93-98页 |
·血清抗体监测结果 | 第98-105页 |
·脾淋巴细胞增殖结果 | 第105-106页 |
·攻毒后疫苗免疫保护力 | 第106-107页 |
·攻毒小鼠病理变化 | 第107-109页 |
·疫苗对肺脏APP的清除效果 | 第109-110页 |
·讨论 | 第110-122页 |
·试验所用菌种 | 第110-111页 |
·试验设计思路 | 第111-112页 |
·抗体监测指标的选择 | 第112-113页 |
·重组蛋白的表达与分析 | 第113-114页 |
·重组蛋白免疫前处理 | 第114-115页 |
·检测抗原的纯化 | 第115-116页 |
·关于抗体监测结果 | 第116-118页 |
·关于脾细胞增殖试验 | 第118页 |
·疫苗免疫对小鼠的保护作用 | 第118-119页 |
·关于荧光定量PCR方法及检测结果 | 第119-122页 |
·小结 | 第122-123页 |
参考文献 | 第123-135页 |
致谢 | 第135-136页 |
附录 | 第136-167页 |
pET-32A-C(+)VECTORS载体示意图 | 第136-138页 |
研究中所用试剂及培养基 | 第138-143页 |
序列分析结果 | 第143-151页 |
测序报告 | 第151-167页 |
论文发表 | 第167页 |