| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-12页 |
| 第1章 引言 | 第12-32页 |
| ·microRNA 简介 | 第12-14页 |
| ·miRNA 的命名规则 | 第12页 |
| ·miRNA 的表达过程 | 第12-13页 |
| ·miRNA 的作用机制 | 第13-14页 |
| ·miRNA 研究中的主要问题 | 第14页 |
| ·miRNA 与抗病毒固有免疫应答 | 第14-25页 |
| ·抗病毒固有免疫应答 | 第15-17页 |
| ·RIG-I 抗病毒信号途径 | 第17-19页 |
| ·RIG-I 信号传导途径的调控 | 第19-23页 |
| ·miRNA 调控固有免疫应答 | 第23-25页 |
| ·miRNA 与 RIG-I 抗病毒信号途径 | 第25页 |
| ·miRNA 与肝细胞癌 | 第25-30页 |
| ·HCC 发病的地域与性别特征 | 第25-26页 |
| ·HCC 的主要致病因素 | 第26-27页 |
| ·HCC 的分子机制 | 第27-28页 |
| ·miRNA 与 HCC | 第28-30页 |
| ·HCC 的 miRNA 组 | 第30页 |
| ·本研究工作的目的和内容 | 第30-32页 |
| ·miRNA 与 RIG-I 抗病毒固有免疫应答 | 第31页 |
| ·正常肝脏、肝炎肝脏、肝硬化肝脏与肝癌中的 miRNA 组 | 第31-32页 |
| 第2章 miRNA 调控 RIG-I 抗病毒信号途径的研究 | 第32-51页 |
| ·引言 | 第32-33页 |
| ·实验方法和材料 | 第33-36页 |
| ·动物与试剂 | 第33页 |
| ·细胞培养与转染 | 第33页 |
| ·Paraflo miRNA 高通量芯片 | 第33-34页 |
| ·miRNA 和 RNA 干扰 | 第34页 |
| ·3’UTR 报告基因分析 | 第34页 |
| ·实时定量 RT-PCR(quanlitative RT-PCR) | 第34-35页 |
| ·Enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) | 第35页 |
| ·Western blot 与免疫共沉淀 | 第35页 |
| ·流式细胞术 | 第35-36页 |
| ·VSV 病毒滴度的测定 | 第36页 |
| ·统计学分析 | 第36页 |
| ·结果 | 第36-49页 |
| ·VSV 感染活化 miR-146a 的表达 | 第36-38页 |
| ·VSV 感染诱导的 miR-146a 表达上调依赖于 RIG-I/NF-κB 通路 | 第38-39页 |
| ·miR-146a 负向调控巨噬细胞中 VSV 诱导的Ⅰ型 IFN 表达 | 第39-42页 |
| ·miR-146a 能够通过抑制Ⅰ型 IFN 的表达进而增强 VSV 复制 | 第42-44页 |
| ·miR-146a 靶向作用于 TRAF6、IRAK1 和 IRAK2 | 第44-46页 |
| ·miR-146a 的靶基因在 RIG-I 信号途径中的作用 | 第46-48页 |
| ·IRAK1 和 IRAK2 通过结合 FADD 参与 RIG-I 信号通路 | 第48-49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第3章 正常肝脏、肝炎肝脏、肝硬化肝脏与肝细胞癌中 miRNA 组的分析与研究 | 第51-96页 |
| ·引言 | 第51-52页 |
| ·实验材料与方法 | 第52-65页 |
| ·组织与细胞 | 第52页 |
| ·Illumina Solexa MPSS | 第52页 |
| ·新 miRNA 基因候选的生物信息学预测 | 第52-63页 |
| ·试剂 | 第63页 |
| ·实时定量 PCR | 第63页 |
| ·基因组 DNA 甲基化的检测 | 第63页 |
| ·染色质免疫共沉淀(chromatin immuno-precipitation,ChIP) | 第63页 |
| ·转染 | 第63页 |
| ·荷瘤裸鼠体内实验 | 第63-64页 |
| ·3’UTR 报告基因分析 | 第64页 |
| ·RNA 干扰 | 第64页 |
| ·细胞增殖检测 | 第64页 |
| ·细胞凋亡检测 | 第64页 |
| ·细胞周期检测 | 第64-65页 |
| ·Western blot | 第65页 |
| ·统计学分析 | 第65页 |
| ·结果 | 第65-94页 |
| ·正常肝脏、肝炎肝脏、肝硬化肝脏与 HCC 的 miRNA 组 | 第65-69页 |
| ·在 HCC 中表达失调的肝脏富集 miRNA | 第69-84页 |
| ·失调的组蛋白甲基化导致 miR-199a/b-3p 在 HCC 中表达降低 | 第84页 |
| ·miR-199a/b-3p 抑制 HCC 生长 | 第84-88页 |
| ·miR-199a/b-3p 靶向作用于 PAK4 | 第88-91页 |
| ·miR-199a/b-3p 通过靶向作用于 PAK4 发挥抗肿瘤作用 | 第91-93页 |
| ·miR-199a/b-3p 在 HCC 中抑制 PAK4/Raf/MEK/ERK 信号途径 | 第93-94页 |
| ·新 miRNA 基因候选 | 第94页 |
| ·讨论 | 第94-96页 |
| 结论 | 第96-98页 |
| 参考文献 | 第98-105页 |
| 致谢 | 第105-106页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第106页 |
