| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-25页 |
| 1 紫茎泽兰生态学研究现状 | 第13-15页 |
| ·紫茎泽兰的生长特性 | 第13-14页 |
| ·紫茎泽兰的遗传多样性 | 第14-15页 |
| ·紫茎泽兰的危害,防除及利用 | 第15页 |
| 2 植物冷胁迫的生理生化变化 | 第15-16页 |
| ·冷胁迫引起细胞生理生化及结构的改变 | 第15-16页 |
| ·活性氧和自由基的破坏作用 | 第16页 |
| 3 植物冷驯化过程中相关基因的调节 | 第16-25页 |
| ·植物冷驯化相关基因的发现及克隆 | 第17-19页 |
| ·植物冷驯化相关基因的转录调控途径 | 第19-25页 |
| 第二章 SSH筛选不同抗寒种群差异表达基因 | 第25-37页 |
| 1 试验材料 | 第26-27页 |
| ·植物材料与处理 | 第26页 |
| ·细菌菌株和质粒 | 第26-27页 |
| ·化学试剂和酶 | 第27页 |
| 2 实验方法 | 第27-32页 |
| ·利用TIANGEN公司的TRNzol总RNA提取试剂提取总RNA | 第27页 |
| ·mRNA的分离 | 第27-28页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第28页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第28-29页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切双链cDNA | 第29页 |
| ·接头连接 | 第29-30页 |
| ·第一次杂交 | 第30页 |
| ·第二次杂交 | 第30页 |
| ·二次PCR扩增 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-34页 |
| ·RNA和mRNA的质量 | 第32页 |
| ·第一轮及第二轮PCR结果 | 第32-33页 |
| ·重组子的测序结果 | 第33-34页 |
| 4 讨论 | 第34-37页 |
| 第三章 紫茎泽兰EaICE1基因的克隆和序列分析 | 第37-51页 |
| 1 试验材料 | 第38-39页 |
| ·植物材料 | 第38-39页 |
| ·菌株与质粒 | 第39页 |
| ·酶及生化试剂 | 第39页 |
| 2 实验方法 | 第39-46页 |
| ·利用TIANGEN公司的TRNzol总RNA提取试剂提取RNA | 第39页 |
| ·反转录cDNA第一链的合成 | 第39-40页 |
| ·设计简并引物得到基因的中间片段 | 第40页 |
| ·切胶回收 | 第40-41页 |
| ·连接反应 | 第41页 |
| ·重组载体转化大肠杆菌 | 第41-42页 |
| ·转化子的检测鉴定 | 第42页 |
| ·用RACE方法得到基因的3’端 | 第42-44页 |
| ·用RACE方法得到基因的5’端 | 第44-45页 |
| ·扩增cDNA全长序列 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-49页 |
| ·紫茎泽兰EaICE1基因的克隆 | 第46-47页 |
| ·紫茎泽兰EaICE1基因的序列分析 | 第47-49页 |
| ·四种群紫茎泽兰EaICE1推导氨基酸序列比较 | 第49页 |
| 4 讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 低温处理下不同种群紫茎泽兰EaICE1基因的表达量分析 | 第51-63页 |
| 1 试验材料 | 第52页 |
| ·植物材料和处理 | 第52页 |
| ·试剂和仪器 | 第52页 |
| 2 实验方法 | 第52-57页 |
| ·半定量体系的建立 | 第52-53页 |
| ·Northern杂交 | 第53-55页 |
| ·荧光定量PCR实验(SYBR Green嵌合荧光法) | 第55-57页 |
| 3 结果与分析 | 第57-61页 |
| ·半定量 | 第57-58页 |
| ·Northern杂交 | 第58-59页 |
| ·荧光定量 | 第59-61页 |
| 4 讨论 | 第61-63页 |
| 参考文献 | 第63-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
