| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 符号、缩略语对照表 | 第10-12页 |
| 前言 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 RNA干扰及其应用研究 | 第13-20页 |
| 1 RNA干扰现象 | 第13页 |
| 2 RNAi的机制 | 第13-14页 |
| 3 RNAi的特点 | 第14-15页 |
| 4 RNAi的功能 | 第15-16页 |
| ·抗病毒功能 | 第15页 |
| ·功能基因组学研究 | 第15-16页 |
| ·基因调控 | 第16页 |
| 5 RNAi的应用与前景 | 第16-18页 |
| ·高通量的研究基因功能 | 第16-17页 |
| ·基因敲除 | 第17页 |
| ·基因治疗 | 第17页 |
| ·基因表达调控 | 第17-18页 |
| 参考文献 | 第18-20页 |
| 第二章 试验部分 | 第20-61页 |
| 实验一 小鼠巨噬细胞GSL基因shRNA表达载体的构建 | 第20-32页 |
| 1 材料和方法 | 第20-24页 |
| ·材料 | 第20-21页 |
| ·方法 | 第21-24页 |
| 2 结果 | 第24-28页 |
| ·靶序列的siRNA的合成 | 第24-25页 |
| ·重组质粒的克隆与酶切 | 第25-26页 |
| ·序列的测定 | 第26-28页 |
| 3 讨论 | 第28-31页 |
| ·siRNA制备与筛选 | 第28-29页 |
| ·重组质粒的鉴定方法 | 第29页 |
| ·RNAi技术的展望与存在的问题 | 第29-31页 |
| 参考文献 | 第31-32页 |
| 实验二 载体表达的siRNA分子对小鼠巨噬细胞galactose-specific lectin基因表达的抑制作用 | 第32-47页 |
| 1 材料与方法 | 第32-38页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·方法 | 第33-38页 |
| 2 结果 | 第38-45页 |
| ·小鼠巨噬细胞总RNA的提取 | 第38-39页 |
| ·GSL基因和GAPDH基因的克隆结果 | 第39-40页 |
| ·GSL基因和GAPDH基因的测序结果 | 第40-41页 |
| ·GSL基因和GAPDH基因的标准曲线 | 第41-42页 |
| ·细胞转染结果观察 | 第42页 |
| ·shRNA重组质粒干扰效果的检测结果 | 第42-44页 |
| ·免疫组织化学检测靶蛋白的表达 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-46页 |
| ·小结 | 第45页 |
| ·免疫组化化学注意事项 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-47页 |
| 实验三 GSL基因在绵羊种布鲁氏菌019株侵染RAW264.7细胞过程中的功能分析 | 第47-61页 |
| 1 材料与方法 | 第48-51页 |
| ·材料 | 第48页 |
| ·方法 | 第48-51页 |
| 2 结果 | 第51-58页 |
| ·16SrRNA PCR扩增结果 | 第51-52页 |
| ·16SrRNA质粒PCR鉴定结果 | 第52页 |
| ·16SrRNA实时定量的标准曲线 | 第52-53页 |
| ·绵羊种布鲁氏菌019株侵染RAW264.7细胞cDNA的检测结果 | 第53页 |
| ·绵羊种布鲁氏菌019株侵染RAW264.7细胞荧光定量的检测结果 | 第53-54页 |
| ·细胞因子IL-2、IL-4、IL-6、IL-10、TNF-α的检测结果 | 第54-57页 |
| ·绵羊种布鲁氏菌019株侵染RAW264.7细胞电镜结果 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| ·布鲁氏菌与宿主细胞的关系 | 第58页 |
| ·沉默GSL基因在布鲁氏菌感染巨噬细胞时细胞因子表达的变化 | 第58-59页 |
| ·布鲁氏菌侵染RAW264.7细胞过程中GSL基因功能的初步分析 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-61页 |
| 结论 | 第61页 |
| 创新点 | 第61-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 作者简介 | 第64-65页 |
| 导师评阅表 | 第65页 |
