| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第9-21页 |
| 1.1 禽腺病毒 | 第9-11页 |
| 1.1.1 流行病学 | 第9页 |
| 1.1.2 病原学 | 第9-10页 |
| 1.1.3 致病机制 | 第10-11页 |
| 1.2 禽腺病毒疫苗 | 第11-14页 |
| 1.2.1 灭活疫苗 | 第11-12页 |
| 1.2.2 减毒活疫苗 | 第12页 |
| 1.2.3 核酸疫苗 | 第12-13页 |
| 1.2.4 亚单位疫苗 | 第13-14页 |
| 1.3 动物疫苗佐剂 | 第14-17页 |
| 1.3.1 抗原传递佐剂 | 第15页 |
| 1.3.2 抗原共刺激佐剂 | 第15-17页 |
| 1.4 杆状病毒表达系统 | 第17-19页 |
| 1.4.1 昆虫细胞-杆状病毒表达系统 | 第17-18页 |
| 1.4.2 杆状病毒表达系统 | 第18-19页 |
| 1.4.3 杆状病毒表达系统的应用 | 第19页 |
| 1.5 本研究目的及意义 | 第19-21页 |
| 第2章 禽腺病毒纤丝蛋白表达系统的构建 | 第21-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 菌株、质粒及基因引物 | 第21页 |
| 2.1.2 实验药品与试剂 | 第21页 |
| 2.1.4 实验试剂的配制 | 第21-23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-31页 |
| 2.2.1 菌种保藏及细胞的培养与冻存 | 第23-24页 |
| 2.2.2 pFastBac1-Fiber-2质粒的构建 | 第24-26页 |
| 2.2.3 重组杆状病毒Bacmid的构建 | 第26-27页 |
| 2.2.4 Bacmid-Fiber-2质粒转染Sf9细胞及病毒的获得 | 第27-29页 |
| 2.2.5 重组蛋白在sf9细胞中表达的MOI及收获时间 | 第29-30页 |
| 2.2.6 重组蛋白的制备 | 第30-31页 |
| 2.3 实验结果 | 第31-35页 |
| 2.3.1 基因获取与pFastBac1-Fiber-2的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.2 重组杆状病毒Bacmid-Fiber-2表达质粒构建 | 第32-33页 |
| 2.3.3 杆状病毒的收获 | 第33-34页 |
| 2.3.4 Fiber-2的表达 | 第34页 |
| 2.3.5 重组蛋白Fiber-2的效价 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-36页 |
| 2.5 小结 | 第36-37页 |
| 第3章 细胞因子类分子佐剂的构建与表达 | 第37-45页 |
| 3.1 实验材料 | 第37-38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-40页 |
| 3.2.1 pET28a-chIL-2和pET28a-chIFN-γ表达系统的构建 | 第38-39页 |
| 3.2.2 重组细胞因子在大肠杆菌中的表达 | 第39页 |
| 3.2.3 重组细胞因子的复性 | 第39-40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-43页 |
| 3.3.1 重组大肠杆菌的构建 | 第40-41页 |
| 3.3.2 重组细胞因子的表达 | 第41-43页 |
| 3.4 讨论 | 第43-44页 |
| 3.5 小结 | 第44-45页 |
| 第4章 腺病毒亚单位疫苗制备及效果评价 | 第45-51页 |
| 4.1 实验材料 | 第45页 |
| 4.2 亚单位疫苗的制备及接种方案 | 第45-47页 |
| 4.2.1 亚单位疫苗的制备 | 第45页 |
| 4.2.2 Fiber-2单独接种 | 第45页 |
| 4.2.3 Fiber-2与分子佐剂联合接种 | 第45-47页 |
| 4.3 动物免疫实验结果 | 第47-49页 |
| 4.3.1 Fiber-2单独接种 | 第47页 |
| 4.3.2 Fiber-2与分子佐剂联合接种 | 第47-48页 |
| 4.3.3 抗体水平 | 第48-49页 |
| 4.4 讨论 | 第49页 |
| 4.5 小结 | 第49-51页 |
| 第5章 结论与展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
