| 摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第1章 绪论 | 第10-22页 |
| 1.1 阿魏酸酯酶 | 第10-11页 |
| 1.2 阿魏酸酯酶的分类和来源 | 第11-12页 |
| 1.3 阿魏酸酯酶的生产 | 第12-14页 |
| 1.3.1 固体发酵生产阿魏酸酯酶 | 第12-13页 |
| 1.3.2 阿魏酸酯酶的分子克隆 | 第13-14页 |
| 1.4 阿魏酸酯酶的应用 | 第14-20页 |
| 1.4.1 植物生物质的预处理 | 第14-17页 |
| 1.4.2 阿魏酸酯酶在羟基肉桂酸释放中的应用 | 第17-19页 |
| 1.4.3 阿魏酸酯酶在生物质加工中的应用 | 第19页 |
| 1.4.4 阿魏酸及其相关精细化学品的生产应用 | 第19-20页 |
| 1.4.5 阿魏酸酯酶制浆造纸工业的应用 | 第20页 |
| 1.4.6 阿魏酸酯酶在饲料工业中的应用 | 第20页 |
| 1.4.7 阿魏酸酯酶在调味料和酒精饮料工业的应用 | 第20页 |
| 1.5 本论文的研究目的及内容 | 第20-22页 |
| 第2章 产阿魏酸酯酶谷子弯孢菌的分离及鉴定 | 第22-30页 |
| 2.1 材料和方法 | 第22-25页 |
| 2.1.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.2 试验方法 | 第23-25页 |
| 2.2 实验结果与分析 | 第25-29页 |
| 2.2.1 分离产阿魏酸酯酶的丝状真菌 | 第25-26页 |
| 2.2.2 产阿魏酸酯酶菌株QU108的形态观察 | 第26-27页 |
| 2.2.3 产阿魏酸酯酶菌株QU108的分子鉴定 | 第27-29页 |
| 2.3 本章小结 | 第29-30页 |
| 第3章 谷子弯孢菌阿魏酸酯酶A基因的分离及生物信息学分析 | 第30-40页 |
| 3.1 试验材料 | 第30-31页 |
| 3.1.1 菌种与质粒 | 第30页 |
| 3.1.2 培养基及相关试剂 | 第30页 |
| 3.1.3 主要仪器 | 第30-31页 |
| 3.2 试验方法 | 第31-32页 |
| 3.2.1 谷子弯孢菌QU108染色体DNA的提取 | 第31页 |
| 3.2.2 谷子弯孢菌QU108阿魏酸酯酶A基因序列检索 | 第31页 |
| 3.2.3 谷子弯孢菌QU108阿魏酸酯酶A基因的PCR扩增 | 第31页 |
| 3.2.4 谷子弯孢菌faeA的PCR产物回收 | 第31-32页 |
| 3.2.5 谷子弯孢菌faeA的PCR产物和T载体重组连接 | 第32页 |
| 3.2.6 谷子弯孢菌faeA的DNA序列测定 | 第32页 |
| 3.2.7 谷子弯孢菌阿魏酸酯酶基因和蛋白质的生物信息学分析 | 第32页 |
| 3.3 试验结果与分析 | 第32-38页 |
| 3.3.1 谷子弯孢菌QU108菌株染色体DNA的提取 | 第32-33页 |
| 3.3.2 谷子弯孢菌QU108阿魏酸酯酶A基因的克隆 | 第33-35页 |
| 3.3.3 谷子弯孢菌QU108阿魏酸酯酶A生物信息学分析 | 第35-38页 |
| 3.4 本章小结 | 第38-40页 |
| 第4章 谷子弯孢菌QU108阿魏酸酯酶基因在毕赤酵母中的表达 | 第40-50页 |
| 4.1 试验材料 | 第40-41页 |
| 4.1.1 菌株 | 第40页 |
| 4.1.2 培养基及相关溶液 | 第40页 |
| 4.1.3 工具酶和试剂 | 第40页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第40-41页 |
| 4.2 试验方法 | 第41-44页 |
| 4.2.1 谷子弯孢菌QU108阿魏酸酯酶A cDNA基因的克隆 | 第41-42页 |
| 4.2.2 谷子弯孢菌QU108阿魏酸酯酶A表达载体pPIC9k-ClfaeA的构建 | 第42页 |
| 4.2.3重组质粒pPIC9k-ClfaeA转化毕赤酵母GS115 | 第42页 |
| 4.2.4 重组毕赤酵母转化子的筛选 | 第42-43页 |
| 4.2.5 阿魏酸酯酶活性测定方法 | 第43页 |
| 4.2.6 毕赤酵母转化子发酵液的SDS-PAGE分析 | 第43页 |
| 4.2.7 重组阿魏酸酯酶A酶学性质测定 | 第43-44页 |
| 4.3 试验结果与分析 | 第44-48页 |
| 4.3.1 表达载体pPIC9K-ClfaeA的构建及线性化 | 第44-45页 |
| 4.3.2 载体pPIC9K-ClfaeA电转化毕赤酵母 | 第45-46页 |
| 4.3.3 毕赤酵母faeA活性转化子的筛选 | 第46-47页 |
| 4.3.4 毕赤酵母转化子发酵液上清的SDS-PAGE分析 | 第47页 |
| 4.3.5 温度对重组阿魏酸酯酶A的影响 | 第47页 |
| 4.3.6 pH对重组阿魏酸酯酶A的影响 | 第47-48页 |
| 4.4 本章小结 | 第48-50页 |
| 全文总结及展望 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
