| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第17-22页 |
| 1.1 结核病 | 第17页 |
| 1.2 结核分枝杆菌的免疫 | 第17-19页 |
| 1.2.1 人体免疫系统 | 第17页 |
| 1.2.2 机体对结核分枝杆菌的免疫反应 | 第17-18页 |
| 1.2.3 结核性肉芽肿 | 第18页 |
| 1.2.4 巨噬细胞 | 第18-19页 |
| 1.2.5 细胞的吞噬作用 | 第19页 |
| 1.3 结核病的易感性 | 第19页 |
| 1.4 ASAP1蛋白的研究 | 第19-20页 |
| 1.5 细胞的自噬 | 第20-21页 |
| 1.6 研究目的及意义 | 第21-22页 |
| 第二章 ASAP1参与巨噬细胞对Mtb的免疫反应 | 第22-30页 |
| 2.1 实验材料与仪器 | 第22-24页 |
| 2.1.1 细胞系及菌株 | 第22页 |
| 2.1.2 试剂及药物 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验设备与仪器 | 第23页 |
| 2.1.4 实验试剂的配制 | 第23-24页 |
| 2.2 实验方法 | 第24-27页 |
| 2.2.1 细胞培养与分化 | 第24页 |
| 2.2.2 细胞冻存与复苏 | 第24-25页 |
| 2.2.3 BCG菌株及MtbH37Ra菌株的培养与计数 | 第25页 |
| 2.2.4 BCG菌株及MtbH37Ra菌株的保藏 | 第25页 |
| 2.2.5 细菌的灭活 | 第25页 |
| 2.2.6 细胞的感染 | 第25页 |
| 2.2.7 RNA提取、反转录及荧光定量PCR分析 | 第25-26页 |
| 2.2.8 细胞全蛋白提取及蛋白免疫印迹 | 第26-27页 |
| 2.2.9 统计学分析 | 第27页 |
| 2.3 实验结果 | 第27-29页 |
| 2.3.1 THP-1细胞经诱导分化后ASAP1表达的分析 | 第27-28页 |
| 2.3.2 巨噬细胞经BCG及MtbH37Ra感染后,ASAP1表达的分析 | 第28-29页 |
| 2.4 小结 | 第29-30页 |
| 第三章 ASAP1沉默及过表达巨噬细胞的建立 | 第30-39页 |
| 3.1 实验材料与仪器 | 第30-32页 |
| 3.1.1 细胞系 | 第30页 |
| 3.1.2 试剂及药物 | 第30-31页 |
| 3.1.3 实验设备与仪器 | 第31页 |
| 3.1.4 实验主要溶液配制方法 | 第31-32页 |
| 3.2 实验方法 | 第32-36页 |
| 3.2.1 细胞培养与传代 | 第32页 |
| 3.2.2 细胞转染 | 第32页 |
| 3.2.3 ASAP1慢病毒表达系统的构建 | 第32-35页 |
| 3.2.4 RNA提取、逆转录及荧光定量PCR | 第35页 |
| 3.2.5 细胞全蛋白提取及蛋白免疫印迹 | 第35页 |
| 3.2.6 细胞免疫荧光染色 | 第35-36页 |
| 3.3 实验结果 | 第36-38页 |
| 3.4 小结 | 第38-39页 |
| 第四章 ASAP1影响巨噬细胞对Mtb吞噬及杀伤的研究 | 第39-45页 |
| 4.1 实验材料及仪器 | 第39页 |
| 4.1.1 细胞系及菌株 | 第39页 |
| 4.1.2 质粒 | 第39页 |
| 4.1.3 试剂及药物 | 第39页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第39页 |
| 4.2 实验方法 | 第39-40页 |
| 4.2.1 td-Tomato-MtbH37Ra菌株的制备 | 第39页 |
| 4.2.2 细胞吞噬能力的检测 | 第39-40页 |
| 4.2.3 细胞总RNA提取及反转录 | 第40页 |
| 4.2.4 荧光定量PCR | 第40页 |
| 4.2.5 细菌杀伤能力的检测 | 第40页 |
| 4.3 实验结果 | 第40-43页 |
| 4.3.1 ASAP1影响巨噬细胞对Mtb吞噬的研究 | 第40-42页 |
| 4.3.2 ASAP1影响巨噬细胞吞噬Mtb后细胞因子表达的研究 | 第42-43页 |
| 4.3.3 ASAP1影响巨噬细胞对Mtb杀伤能力的分析 | 第43页 |
| 4.4 小结 | 第43-45页 |
| 第五章 ASAP1对Mtb感染巨噬细胞自噬水平影响的研究 | 第45-49页 |
| 5.1 实验材料 | 第45页 |
| 5.1.1 细胞系及菌株 | 第45页 |
| 5.1.2 试剂及药物 | 第45页 |
| 5.1.3 实验仪器 | 第45页 |
| 5.2 实验方法 | 第45页 |
| 5.3 实验结果 | 第45-48页 |
| 5.3.1 ASAP1表达对Mtb感染的巨噬细胞自噬水平影响的研究 | 第45-47页 |
| 5.3.2 不同ASAP1表达巨噬细胞吞噬Mtb后对AKT-mTOR自噬通路影响的研究 | 第47-48页 |
| 5.4 小结 | 第48-49页 |
| 总结与展望 | 第49-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 攻读学位期间取得的研究成果 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 个人简况及联系方式 | 第59-60页 |
