摘要 | 第5-7页 |
abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
1.1 胃癌 | 第14-16页 |
1.1.1 胃癌的流行病学 | 第14-15页 |
1.1.2 胃癌的分子诊断研究进展 | 第15页 |
1.1.3 非编码RNA在胃癌诊断中的作用 | 第15-16页 |
1.2 Linc-UFC | 第16-18页 |
1.2.1 LncRNA的基本生物学性质 | 第16-17页 |
1.2.2 LncRNA与肿瘤 | 第17-18页 |
1.2.3 Linc-UFC1的研究现状 | 第18页 |
1.3 外泌体 | 第18-20页 |
1.4 MiR-498 | 第20-21页 |
1.5 Lin28b | 第21-22页 |
1.6 CeRNA | 第22-23页 |
1.7 小结 | 第23-24页 |
第二章 研究目的、方法、实验设计方案和意义 | 第24-28页 |
2.1 研究目的 | 第24页 |
2.2 研究方法 | 第24-25页 |
2.3 实验设计方案 | 第25-27页 |
2.4 研究意义 | 第27-28页 |
第三章 Linc-UFC1在胃癌诊断与预后判断中的作用 | 第28-44页 |
3.1 材料 | 第28-30页 |
3.1.1 临床标本 | 第28-29页 |
3.1.2 细胞株 | 第29页 |
3.1.3 主要试剂 | 第29-30页 |
3.1.4 主要仪器和耗材 | 第30页 |
3.2 方法 | 第30-34页 |
3.2.1 细胞培养 | 第30-31页 |
3.2.2 细胞总RNA提取及逆转录 | 第31页 |
3.2.3 组织总RNA提取及逆转录 | 第31-32页 |
3.2.4 血清总RNA提取及逆转录 | 第32-33页 |
3.2.5 血清外泌体RNA的提取及逆转录 | 第33页 |
3.2.6 实时荧光定量PCR检测 | 第33-34页 |
3.3 结果 | 第34-43页 |
3.3.1 建立linc-UFC1的定量PCR检测方法 | 第34-36页 |
3.3.2 Linc-UFC1在胃癌诊断及预后判断中的作用 | 第36-43页 |
3.4 讨论 | 第43-44页 |
第四章 Linc-UFC1在胃癌中的生物学作用 | 第44-64页 |
4.1 材料 | 第44-46页 |
4.1.1 实验细胞株 | 第44页 |
4.1.2 主要试剂 | 第44-46页 |
4.1.3 主要仪器和耗材 | 第46页 |
4.2 方法 | 第46-51页 |
4.2.1 细胞培养 | 第46页 |
4.2.2 质粒转染 | 第46-47页 |
4.2.3 总蛋白提取 | 第47页 |
4.2.4 Westernblot | 第47-48页 |
4.2.5 细胞生长曲线 | 第48页 |
4.2.6 平板克隆实验 | 第48页 |
4.2.7 Transwell细胞迁移实验 | 第48-49页 |
4.2.8 Matrigel细胞侵袭实验 | 第49页 |
4.2.9 细胞周期检测 | 第49页 |
4.2.10 细胞凋亡实验 | 第49-50页 |
4.2.11 裸鼠皮下荷瘤模型 | 第50页 |
4.2.12 组织病理分析 | 第50页 |
4.2.13 免疫组织化学染色 | 第50-51页 |
4.2.14 数据统计 | 第51页 |
4.3 结果 | 第51-62页 |
4.3.1 ShRNA干扰linc-UFC1效率鉴定 | 第51-52页 |
4.3.2 ShRNA干扰linc-UFC1对胃癌细胞体外生物学功能的影响 | 第52-56页 |
4.3.3 ShRNA干扰linc-UFC1对胃癌细胞体内致瘤能力的影响 | 第56-58页 |
4.3.4 过表达linc-UFC1对胃癌细胞生物学功能的影响 | 第58-62页 |
4.4 讨论 | 第62-64页 |
第五章 Linc-UFC1作为ceRNA通过miR-498/Lin28b信号轴促进胃癌进展.. | 第64-88页 |
5.1 材料 | 第64-65页 |
5.1.1 细胞株 | 第64页 |
5.1.2 主要试剂 | 第64-65页 |
5.1.3 主要仪器及相关耗材 | 第65页 |
5.2 方法 | 第65-67页 |
5.2.1 细胞培养 | 第65页 |
5.2.2 质粒转染 | 第65页 |
5.2.3 总RNA提取及逆转录PCR | 第65页 |
5.2.4 实时荧光定量PCR | 第65-66页 |
5.2.5 生物学功能实验 | 第66页 |
5.2.6 荧光素酶报告基因分析 | 第66页 |
5.2.7 放线菌素D半衰期实验 | 第66页 |
5.2.8 RIP | 第66-67页 |
5.2.9 统计分析 | 第67页 |
5.3 结果 | 第67-86页 |
5.3.1 Linc-UFC1结合miR- | 第67-69页 |
5.3.2 MiR-498在胃癌中的表达和作用 | 第69-74页 |
5.3.3 MiR-498抑制Lin28b表达 | 第74-77页 |
5.3.4 Lin28b在胃癌中的表达 | 第77-80页 |
5.3.5 Lin28b在胃癌细胞中的生物学功能 | 第80-82页 |
5.3.6 Linc-UFC1通过上调Lin28b发挥作用 | 第82-86页 |
5.4 讨论 | 第86-88页 |
第六章 结论与展望 | 第88-90页 |
6.1 结论 | 第88页 |
6.2 展望 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-98页 |
致谢 | 第98-99页 |
攻读硕士学位期间发表的科研成果及参加会议 | 第99-100页 |
一、科研成果 | 第99页 |
二、参加会议 | 第99-100页 |
三、获奖情况 | 第100页 |