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蛋氨酸对猪血管内皮细胞血管生成及其关键基因表达的调控

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
缩略语表第12-13页
第一部分 文献综述第13-28页
    1 前言第13页
    2 猪胎盘结构和发育规律第13-16页
        2.1 猪胎盘结构第13-15页
        2.2 猪胎盘发育规律第15-16页
    3 胎盘的血管发育第16-20页
        3.1 胎盘血管发育过程第16-18页
            3.1.1 血管发生第16-17页
            3.1.2 血管生成第17-18页
        3.2 血管生成的研究方法第18-19页
        3.3 血管发育过程中滋养层细胞与内皮细胞之间的相互作用第19页
        3.4 研究胎盘血管发育的细胞共培养模型第19-20页
    4 影响胎盘血管发育的因素第20-24页
        4.1 活性氧对胎盘血管发育的影响第20-21页
        4.2 生长因子对胎盘血管发育的影响第21-23页
        4.3 甲基供体与胎盘发育之间的关系第23-24页
    5 蛋氨酸对血管发育的影响第24-27页
        5.1 蛋氨酸代谢及其生物学功能第24页
        5.2 蛋氨酸对胎儿生长的影响第24-25页
        5.3 蛋氨酸及其代谢产物对血管内皮可能作用方式第25-27页
            5.3.1 高水平同型半胱氨酸对血管生成的影响第25-26页
            5.3.2 蛋氨酸作为甲基供体调控基因的甲基化水平第26-27页
    6 研究假设及目的意义第27-28页
第二部分 材料与方法第28-35页
    1 试验材料第28页
    2 主要仪器第28页
    3 主要试剂第28-29页
    4 主要溶液的配置第29页
    5 猪血管内皮细胞培养及处理第29页
    6 测定项目与方法第29-34页
        6.1 MTT法检测细胞活性第29-30页
        6.2 流式细胞术检测细胞周期第30页
        6.3 细胞划痕检测细胞迁移能力第30页
        6.4 Transwell小室检测细胞迁移能力第30-31页
        6.5 Matrigel基质胶细胞成管实验第31页
        6.6 细胞总RNA抽提、纯化及反转录第31-32页
        6.7 定量RealtimePCR(Q-PCR)第32-33页
        6.8 染色质免疫共沉淀技(Chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)第33页
        6.9 mRNA稳定性的检测第33页
        6.10 猪血管内皮细胞与猪滋养层细胞共培养第33-34页
    7 数据处理和统计第34-35页
第三部分 结果与分析第35-52页
    1 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成的影响第35-37页
    2 提高蛋氨酸水平影响猪血管内皮细胞血管生成的主要事件第37-41页
        2.1 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成的影响第37-38页
        2.2 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞活力的影响第38页
        2.3 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞细胞周期的影响第38-39页
        2.4 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞迁移能力的影响第39-41页
    3 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成关键基因的调控第41-46页
        3.1 不同处理时间和不同浓度蛋氨酸处理对滋养层细胞VEGF-A mRNA表达的影响第41-42页
        3.2 蛋氨酸不同处理时间对猪血管内皮细胞VEGF-A mRNA表达的影响第42-43页
        3.3 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞迁移基因MMP2和MMP9 mRNA的影响第43-44页
        3.4 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成相关基因mRNA水平的影响第44-46页
    4 VEGF-A在介导提高蛋氨酸水平促进猪血管内皮细胞血管生成中的作用第46-50页
        4.1 VEGF-A抑制剂Bevacizumab对猪血管内皮细胞迁移能力的影响..第46-48页
        4.2 VEGFA抑制剂Bevacizumab对猪血管内皮细胞血管生成能力的影响第48-50页
    5 蛋氨酸调控VEGF-A表达机制的研究第50-52页
        5.1 蛋氨酸对VEGF-A转录水平的影响第50页
        5.2 蛋氨酸对VEGF-AmRNA稳定性的影响第50-52页
第四部分 讨论第52-56页
    1 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成的影响第52-53页
    2 蛋氨酸对内皮细胞血管生成关键基因的调控第53-54页
    3 VEGF-A在介导提高蛋氨酸水平促进猪血管内皮细胞血管生成中的作用第54页
    4 蛋氨酸调控VEGF-A表达机制的研究第54-56页
第五部分 结语第56-57页
    1 研究结论第56页
    2 创新点第56页
    3 本研究的不足之处第56-57页
参考文献第57-70页
硕士期间发表论文第70-71页
致谢第71页

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