摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
缩略语表 | 第12-13页 |
第一部分 文献综述 | 第13-28页 |
1 前言 | 第13页 |
2 猪胎盘结构和发育规律 | 第13-16页 |
2.1 猪胎盘结构 | 第13-15页 |
2.2 猪胎盘发育规律 | 第15-16页 |
3 胎盘的血管发育 | 第16-20页 |
3.1 胎盘血管发育过程 | 第16-18页 |
3.1.1 血管发生 | 第16-17页 |
3.1.2 血管生成 | 第17-18页 |
3.2 血管生成的研究方法 | 第18-19页 |
3.3 血管发育过程中滋养层细胞与内皮细胞之间的相互作用 | 第19页 |
3.4 研究胎盘血管发育的细胞共培养模型 | 第19-20页 |
4 影响胎盘血管发育的因素 | 第20-24页 |
4.1 活性氧对胎盘血管发育的影响 | 第20-21页 |
4.2 生长因子对胎盘血管发育的影响 | 第21-23页 |
4.3 甲基供体与胎盘发育之间的关系 | 第23-24页 |
5 蛋氨酸对血管发育的影响 | 第24-27页 |
5.1 蛋氨酸代谢及其生物学功能 | 第24页 |
5.2 蛋氨酸对胎儿生长的影响 | 第24-25页 |
5.3 蛋氨酸及其代谢产物对血管内皮可能作用方式 | 第25-27页 |
5.3.1 高水平同型半胱氨酸对血管生成的影响 | 第25-26页 |
5.3.2 蛋氨酸作为甲基供体调控基因的甲基化水平 | 第26-27页 |
6 研究假设及目的意义 | 第27-28页 |
第二部分 材料与方法 | 第28-35页 |
1 试验材料 | 第28页 |
2 主要仪器 | 第28页 |
3 主要试剂 | 第28-29页 |
4 主要溶液的配置 | 第29页 |
5 猪血管内皮细胞培养及处理 | 第29页 |
6 测定项目与方法 | 第29-34页 |
6.1 MTT法检测细胞活性 | 第29-30页 |
6.2 流式细胞术检测细胞周期 | 第30页 |
6.3 细胞划痕检测细胞迁移能力 | 第30页 |
6.4 Transwell小室检测细胞迁移能力 | 第30-31页 |
6.5 Matrigel基质胶细胞成管实验 | 第31页 |
6.6 细胞总RNA抽提、纯化及反转录 | 第31-32页 |
6.7 定量RealtimePCR(Q-PCR) | 第32-33页 |
6.8 染色质免疫共沉淀技(Chromatin immunoprecipitation assay,CHIP) | 第33页 |
6.9 mRNA稳定性的检测 | 第33页 |
6.10 猪血管内皮细胞与猪滋养层细胞共培养 | 第33-34页 |
7 数据处理和统计 | 第34-35页 |
第三部分 结果与分析 | 第35-52页 |
1 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成的影响 | 第35-37页 |
2 提高蛋氨酸水平影响猪血管内皮细胞血管生成的主要事件 | 第37-41页 |
2.1 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成的影响 | 第37-38页 |
2.2 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞活力的影响 | 第38页 |
2.3 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞细胞周期的影响 | 第38-39页 |
2.4 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞迁移能力的影响 | 第39-41页 |
3 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成关键基因的调控 | 第41-46页 |
3.1 不同处理时间和不同浓度蛋氨酸处理对滋养层细胞VEGF-A mRNA表达的影响 | 第41-42页 |
3.2 蛋氨酸不同处理时间对猪血管内皮细胞VEGF-A mRNA表达的影响 | 第42-43页 |
3.3 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞迁移基因MMP2和MMP9 mRNA的影响 | 第43-44页 |
3.4 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成相关基因mRNA水平的影响 | 第44-46页 |
4 VEGF-A在介导提高蛋氨酸水平促进猪血管内皮细胞血管生成中的作用 | 第46-50页 |
4.1 VEGF-A抑制剂Bevacizumab对猪血管内皮细胞迁移能力的影响.. | 第46-48页 |
4.2 VEGFA抑制剂Bevacizumab对猪血管内皮细胞血管生成能力的影响 | 第48-50页 |
5 蛋氨酸调控VEGF-A表达机制的研究 | 第50-52页 |
5.1 蛋氨酸对VEGF-A转录水平的影响 | 第50页 |
5.2 蛋氨酸对VEGF-AmRNA稳定性的影响 | 第50-52页 |
第四部分 讨论 | 第52-56页 |
1 提高蛋氨酸水平对猪血管内皮细胞血管生成的影响 | 第52-53页 |
2 蛋氨酸对内皮细胞血管生成关键基因的调控 | 第53-54页 |
3 VEGF-A在介导提高蛋氨酸水平促进猪血管内皮细胞血管生成中的作用 | 第54页 |
4 蛋氨酸调控VEGF-A表达机制的研究 | 第54-56页 |
第五部分 结语 | 第56-57页 |
1 研究结论 | 第56页 |
2 创新点 | 第56页 |
3 本研究的不足之处 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-70页 |
硕士期间发表论文 | 第70-71页 |
致谢 | 第71页 |