| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 文献综述 | 第9-14页 |
| 1.1 基因在DNA上的相对位置及排列方式 | 第9-10页 |
| 1.2 天然反义转录物及其重叠方式 | 第10-11页 |
| 1.3 基因转录方向 | 第11-12页 |
| 1.4 基因转录方向的研究方法 | 第12-13页 |
| 1.4.1 高通量测序技术 | 第12页 |
| 1.4.2 Northernblot印迹法 | 第12页 |
| 1.4.3 链特异性RT-PCR | 第12-13页 |
| 1.5 S1核酸酶的特性及其应用 | 第13页 |
| 1.6 研究意义及创新之处 | 第13-14页 |
| 2 材料与方法 | 第14-21页 |
| 2.1 试验材料 | 第14-15页 |
| 2.1.1 试验动物及样本的采集 | 第14页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第14页 |
| 2.1.3 溶液配置 | 第14页 |
| 2.1.4 主要仪器和设备 | 第14-15页 |
| 2.2 试验方法 | 第15-21页 |
| 2.2.1 提取动物组织总RNA | 第15-16页 |
| 2.2.2 提取动物组织基因组DNA | 第16页 |
| 2.2.3 引物的设计与合成 | 第16-18页 |
| 2.2.4 反转录 | 第18-19页 |
| 2.2.5 基因组DNA污染检测 | 第19页 |
| 2.2.6 链特异性反转录 | 第19-20页 |
| 2.2.7 S1核酸酶酶切实验 | 第20-21页 |
| 3 结果与分析 | 第21-35页 |
| 3.1 组织总RNA提取结果 | 第21页 |
| 3.2 基因组DNA污染检测结果 | 第21-22页 |
| 3.3 利用已知基因β-actin和Tsix建立转录方向检测方法 | 第22-25页 |
| 3.3.1 小鼠β-actin和Tsix基因链特异RT-PCR结果 | 第22-23页 |
| 3.3.2 小鼠β-actin和Tsix基因的S1核酸酶酶切结果 | 第23-25页 |
| 3.3.3 转录方向检测结果与Genbank基因转录注释对比 | 第25页 |
| 3.4 用建立的方法检测鸡THRA、LXN、LCT和BRCA2基因的转录方向 | 第25-31页 |
| 3.4.1 THRA基因转录方向检测结果 | 第26-27页 |
| 3.4.2 LXN基因转录方向检测结果 | 第27-28页 |
| 3.4.3 LCT基因转录方向检测结果 | 第28-29页 |
| 3.4.4 BRCA2基因转录方向检测结果 | 第29页 |
| 3.4.5 转录方向检测结果与Genbank基因转录注释对比 | 第29-31页 |
| 3.5 基因转录方向检测试剂盒配置及使用说明 | 第31-35页 |
| 3.5.1 介绍 | 第31页 |
| 3.5.2 产品 | 第31-32页 |
| 3.5.3 操作方法 | 第32-34页 |
| 3.5.4 缓冲液及溶液的组成 | 第34页 |
| 3.5.5 注意事项 | 第34-35页 |
| 4 讨论 | 第35-42页 |
| 4.1 链特异反转录引物与转录方向关系的探讨 | 第35-36页 |
| 4.2 反转录酶对试验结果的影响 | 第36-37页 |
| 4.2.1 反转录酶的种类及特点 | 第36页 |
| 4.2.2 反转录酶对S1核酸酶酶切结果的影响 | 第36-37页 |
| 4.3 基因组DNA对检测结果的影响 | 第37页 |
| 4.3.1 gDNA对链特异RT-PCR结果的影响 | 第37页 |
| 4.3.2 gDNA对S1核酸内切酶酶切结果的影响 | 第37页 |
| 4.4 碱基突变对检测结果的影响 | 第37页 |
| 4.5 检测基因转录方向的方法对重叠基因的检测 | 第37-39页 |
| 4.5.1 反向排列的重叠基因转录方向检测结果的探讨 | 第37-39页 |
| 4.5.2 同向排列和嵌套排列基因的重叠基因转录方向检测结果的探讨 | 第39页 |
| 4.6 转录方向检测结果的探讨 | 第39-40页 |
| 4.7 检测基因转录方向的几种方法的比较 | 第40-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50-51页 |
| 导师简介 | 第51页 |
