| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词表 | 第10-14页 |
| 引言 | 第14-18页 |
| 第一节RON胞外段目的蛋白的表达纯化 | 第18-39页 |
| 1.1 主要试剂，缓冲液与培养基及仪器 | 第19-25页 |
| 1.1.1 主要试剂 | 第19页 |
| 1.1.2 缓冲液与培养基的配制 | 第19-25页 |
| 1.1.3 主要设备 | 第25页 |
| 1.2 试验方法 | 第25-34页 |
| 1.2.1 引物设计 | 第25-26页 |
| 1.2.2 细胞培养 | 第26页 |
| 1.2.3 总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 1.2.4 目的基因的克隆 | 第27-32页 |
| 1.2.5 目的蛋白的获得 | 第32-34页 |
| 1.3 实验结果 | 第34-39页 |
| 1.3.1 目的基因的获得 | 第34-35页 |
| 1.3.2 克隆载体的构建及鉴定 | 第35-36页 |
| 1.3.3 真核表达载体的构建及鉴定 | 第36-37页 |
| 1.3.4 目的蛋白的获得 | 第37-39页 |
| 第二节 10Fn3噬菌体库的构建及RON胞外段结合蛋白阳性克隆的筛选 | 第39-55页 |
| 2.1 材料与设备 | 第40-41页 |
| 2.1.1 材料 | 第40-41页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第41页 |
| 2.2 实验方法 | 第41-49页 |
| 2.2.1 噬菌体随机肽库基因的设计 | 第41-42页 |
| 2.2.2 重叠延伸PCR重组随机肽库基因片段 | 第42-43页 |
| 2.2.3 目的基因片段与载体p Cantab5E的连接 | 第43页 |
| 2.2.4 电转感受态的制备 | 第43-44页 |
| 2.2.5 原始辅助性噬菌体VCSM13的滴定及增值 | 第44-45页 |
| 2.2.6 电转化建立初级噬菌体随机肽库 | 第45-46页 |
| 2.2.7 初级噬菌体肽库的插入率及多样性分析 | 第46页 |
| 2.2.8 抗RON细胞外段小分子抗体的富集筛选 | 第46-48页 |
| 2.2.9 检测每轮的滴度 | 第48页 |
| 2.2.10 制备待筛选克隆 | 第48-49页 |
| 2.3 实验结果 | 第49-55页 |
| 2.3.1 重叠延伸PCR获得随机多肽库基因片段 | 第49页 |
| 2.3.2 肽库基因PCR产物与载体连接 | 第49页 |
| 2.3.3 噬菌体随机多肽库库容量的测定 | 第49-50页 |
| 2.3.4 噬菌体随机噬菌体多肽库目的基因片段插入率的检测 | 第50页 |
| 2.3.5 噬菌体随机多肽库多样性鉴定 | 第50-51页 |
| 2.3.6 噬菌体多肽库筛选RON结合多肽富集结果 | 第51-55页 |
| 讨论 | 第55-57页 |
| 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-60页 |
| 综述 | 第60-74页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
