| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 1 前言 | 第12-18页 |
| ·微囊藻毒素概述 | 第12页 |
| ·微囊藻毒素的生物毒性研究进展 | 第12-13页 |
| ·微囊藻毒素的生殖毒性研究进展 | 第13-16页 |
| ·CYP450SCC 侧链裂解酶基因研究进展 | 第16页 |
| ·Occludin 蛋白相关的研究进展 | 第16页 |
| ·Claudin 蛋白相关的研究进展 | 第16-17页 |
| ·实验目的和意义 | 第17-18页 |
| 2 材料与方法 | 第18-32页 |
| ·实验材料 | 第18-20页 |
| ·微囊藻 | 第18页 |
| ·含 MC 的微囊藻细胞抽提液、微囊藻粗毒素 | 第18页 |
| ·不含 MC 的微囊藻细胞抽提物 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要试剂 | 第18-19页 |
| ·主要仪器设备 | 第19-20页 |
| ·微囊藻的分离培养和微囊藻细胞抽提物的提取和制备及小鼠对微囊藻细胞抽提液和微囊藻毒素 LD_(50)的测定 | 第20-23页 |
| ·微囊藻的分离 | 第20页 |
| ·微囊藻的培养 | 第20-22页 |
| ·含 MC 微囊藻细胞抽提液的制备 | 第22页 |
| ·微囊藻毒素的制备 | 第22页 |
| ·不含 MC 微囊藻细胞抽提液的制备 | 第22页 |
| ·微囊藻毒素对小鼠 LD_(50)的测定 | 第22-23页 |
| ·小鼠的饲养和管理 | 第23页 |
| ·不同处理组小鼠睾丸结构及睾丸标志酶的测量 | 第23-25页 |
| ·实验动物急性染毒模型的建立 | 第23页 |
| ·睾丸组织学切片的制备 | 第23-25页 |
| ·MC 对小鼠精子畸形率的影响 | 第25页 |
| ·MC 对小鼠睾丸标志性酶的影响 | 第25页 |
| ·总 mRNA 提取 | 第25-28页 |
| ·实验用品的 RNase-free 处理 | 第25-26页 |
| ·RNA 提取操作步骤 | 第26-27页 |
| ·RNA 完整性检测 | 第27页 |
| ·RNA 的浓度和纯度检测 | 第27-28页 |
| ·RNA 的保存 | 第28页 |
| ·逆转录反应 | 第28-29页 |
| ·试剂制品内容 | 第28页 |
| ·操作步骤 | 第28-29页 |
| ·实时荧光定量 PCR | 第29-32页 |
| ·试剂的分装 | 第29页 |
| ·实验所用引物 | 第29-30页 |
| ·PCR 操作步骤 | 第30-32页 |
| 3 结果与分析 | 第32-46页 |
| ·MC 毒素浓度的检测 | 第32页 |
| ·LD_(50) | 第32-34页 |
| ·含 MC 的微囊藻细胞抽提液对小鼠的 LD_(50) | 第32-33页 |
| ·MC 粗毒素对小鼠的 LD_(50) | 第33-34页 |
| ·小鼠精子畸形率试验 | 第34页 |
| ·MC 对小鼠睾丸标志性酶的影响 | 第34-36页 |
| ·酸性磷酸酶(ACP) | 第34-35页 |
| ·乳酸脱氢酶(LDH) | 第35-36页 |
| ·睾丸组织学切片 | 第36-37页 |
| ·睾丸组织总 RNA 质量检测结果 | 第37页 |
| ·RT-PCR 可用性鉴定 | 第37-39页 |
| ·MC 对小鼠睾丸 CYP450SCC 基因表达的影响 | 第39-41页 |
| ·含 MC 的细胞抽提液对小鼠睾丸 CYP450SCC 基因表达的影响 | 第39-40页 |
| ·MC 粗毒素对小鼠睾丸 CYP450SCC 基因表达的影响 | 第40页 |
| ·不含 MC 的细胞抽提液对小鼠睾丸 CYP450SCC 基因表达的影响 | 第40-41页 |
| ·MC 对小鼠睾丸 Claudin1 基因表达的影响 | 第41-43页 |
| ·含 MC 的细胞抽提液对小鼠睾丸 Claudin1 基因表达的影响 | 第41-42页 |
| ·MC 粗毒素对小鼠睾丸 Claudin1 基因表达的影响 | 第42-43页 |
| ·不含 MC 的细胞抽提液对小鼠睾丸 Claudin1 基因表达的影响 | 第43页 |
| ·MC 对小鼠睾丸 Occludin 基因表达的影响 | 第43-46页 |
| ·含 MC 的细胞抽提液对小鼠睾丸 Occludin 基因表达的影响 | 第43-44页 |
| ·MC 粗毒素对小鼠睾丸 Occludin 基因表达的影响 | 第44-45页 |
| ·不含 MC 的细胞抽提液对小鼠睾丸 Occludin 基因表达的影响 | 第45-46页 |
| 4 讨论 | 第46-52页 |
| ·微囊藻毒素对小鼠精子畸形率的影响 | 第46页 |
| ·微囊藻细胞抽提液和粗毒素对小鼠睾丸组织结构的损伤 | 第46-47页 |
| ·微囊藻毒素对小鼠睾丸标志酶的影响 | 第47-48页 |
| ·对小鼠睾丸组织酸性磷酸酶(ACP)的影响 | 第47-48页 |
| ·对小鼠睾丸组织乳酸脱氢酶(LDH)的影响 | 第48页 |
| ·MC 对小鼠急性毒理暴露模型中 SCC，Claudin1，Occludin 基因的表达分析 | 第48-52页 |
| ·SCC 基因表达分析 | 第48-49页 |
| ·Claudin1、Occludin 基因表达分析 | 第49-52页 |
| 5 结论 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-60页 |
| 附图 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第63-64页 |
