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酪氨酸磷酸化蛋白和胞质动力蛋白在对虾白斑症病毒(WSSV)感染过程中的作用研究

摘要第5-7页
Abstract第7-9页
第一章 文献综述第13-29页
    1.1 前言第13-15页
    1.2 细胞的信号转导和信号传递系统第15-18页
        1.2.1 胞外刺激信号第15-16页
        1.2.2 跨膜信号转导第16-18页
        1.2.3 蛋白可逆性磷酸化在胞内信号转导中的作用第18页
    1.3 WSSV 感染触发的细胞内信号通路第18-19页
        1.3.1 Janus kinase (JAK)-(signal transducer and activator of transcription)STAT 信号通路第18-19页
        1.3.2 整合素信号通路第19页
    1.4 真核细胞质基质及细胞骨架第19-21页
        1.4.1 细胞质基质第19-20页
        1.4.2 细胞骨架第20-21页
        1.4.3 大分子物质在细胞内的转运第21页
    1.5 动力蛋白第21-23页
        1.5.1 轴丝动力蛋白第21-22页
        1.5.2 胞质动力蛋白第22-23页
    1.6 分子生物学技术在本论文中的应用第23-28页
        1.6.1 磷酸化特异性流式细胞术第23-25页
        1.6.2 实时荧光定量 PCR第25页
        1.6.3 快速 cDNA 末端扩增技术(RACE)第25-27页
        1.6.4 RNA 干扰第27-28页
    1.7 本论文研究的目的和意义第28-29页
第二章 WSSV 感染后中国对虾血细胞内蛋白酪氨酸磷酸化水平的变化第29-36页
    2.1 对虾血细胞固定剂和通透剂的选择第29-31页
        2.1.1 实验材料与仪器第29页
        2.1.2 实验方法第29-30页
        2.1.3 实验结果第30页
        2.1.4 讨论第30-31页
    2.2 WSSV 感染后不同时间段中国对虾血细胞内酪氨酸磷酸化水平的流式检测第31-35页
        2.2.1 实验材料与仪器第32页
        2.2.2 实验方法第32页
        2.2.3 实验结果第32-33页
        2.2.4 讨论第33-35页
    小结第35-36页
第三章 中国对虾血细胞内酪氨酸磷酸化蛋白的定位、鉴定及其在 WSSV 感染后的基因表达量变化第36-51页
    3.1 中国对虾血细胞内酪氨酸磷酸化蛋白的定位及其鉴定第36-43页
        3.1.1 实验材料与仪器第36-38页
        3.1.2 实验方法第38-39页
        3.1.3 实验结果第39-42页
        3.1.4 讨论第42-43页
    3.2 中国对虾组蛋白基因的克隆及其在 WSSV 感染后表达量的变化第43-50页
        3.2.1 实验材料与仪器第43-44页
        3.2.2 实验方法第44-46页
        3.2.3 实验结果第46-49页
        3.2.4 讨论第49-50页
    小结第50-51页
第四章 中国对虾血细胞胞质动力蛋白中间链(FcDYNCI)基因的克隆及其序列分析第51-64页
    4.1 中国对虾血细胞胞质动力蛋白中间链(FcDYNCI)基因的克隆第51-56页
        4.1.1 实验材料与仪器第51页
        4.1.2 实验方法第51-54页
        4.1.3 实验结果第54-55页
        4.1.4 讨论第55-56页
    4.2 FcDYNCI 基因序列分析第56-63页
        4.2.1 实验方法第56-57页
        4.2.2 分析结果第57-58页
        4.2.3 讨论第58-63页
    小结第63-64页
第五章 中国对虾 FcDYNCI 基因的表达差异研究第64-70页
    5.1 实验材料与仪器第64页
    5.2 实验方法第64-67页
        5.2.1 WSSV 的精提取第64-65页
        5.2.2 健康中国对虾组织取样及 WSSV 感染后中国对虾血细胞采集第65-66页
        5.2.3 实时荧光定量 PCR 检测第66-67页
    5.3 实验结果第67-69页
        5.3.1 FcDYNCI 基因的组织分布第67-68页
        5.3.2 WSSV 感染后中国对虾血细胞 FcDYNCI 基因表达量的变化第68-69页
    5.4 讨论第69页
    小结第69-70页
第六章 兔抗 FcDYNCI 多克隆抗体的制备及 FcDYNCI 与 WSSV 在血细胞内的定位第70-78页
    6.1 实验材料与仪器第70页
    6.2 实验方法第70-74页
        6.2.1 FcDYNCI 重组蛋白的表达第70-71页
        6.2.2 FcDYNCI 重组蛋白的纯化第71-72页
        6.2.3 兔抗 FcDYNCI 多抗及鼠抗 VP28 单抗的制备第72-73页
        6.2.4 FcDYNCI 与 WSSV 在中国对虾血细胞内的定位第73-74页
    6.3 实验结果第74-77页
        6.3.1 FcDYNCI 重组质粒转化 BL21 后的菌落 PCR 检测第74页
        6.3.2 FcDYNCI 重组蛋白的表达、纯化及兔抗 FcDYNCI 多抗的活性验证第74-76页
        6.3.3 FcDYNCI 与 WSSV 在中国对虾血细胞内的共定位第76-77页
    6.4 讨论第77页
    小结第77-78页
第七章 中国对虾 FcDYNCI 基因的 RNA 干扰及其对 WSSV 复制的影响第78-85页
    7.1 实验材料与仪器第78页
    7.2 实验方法第78-81页
        7.2.1 双链 RNA(dsRNA)的合成第78-80页
        7.2.2 中国对虾体内 FcDYNCI 基因沉默(RNAi)及其效果检测第80页
        7.2.3 FcDYNCI 基因沉默后对对虾血细胞内 WSSV 复制的影响第80-81页
    7.3 实验结果第81-83页
        7.3.1 FcDYNCI dsRNA 的合成第81页
        7.3.2 RNAi 后对虾血细胞内 FcDYNCI 基因表达量和 FcDYNCI 蛋白量的变化第81-83页
        7.3.3 RNAi 后对虾血细胞内 WSSV 基因表达量的变化第83页
    7.4 讨论第83-84页
    小结第84-85页
第八章 中国对虾 FcDYNCI 与 Rab 7 的相互作用研究第85-91页
    8.1 实验材料与仪器第85-86页
    8.2 实验方法第86-87页
        8.2.1 FcDYNCI 相互作用蛋白的预测第86页
        8.2.2 中国对虾血细胞总蛋白的提取第86页
        8.2.3 免疫共沉淀实验验证 Rab 7 与 FcDYNCI 的相互作用第86页
        8.2.4 Rab 7 相互作用蛋白的质谱鉴定第86-87页
    8.3 实验结果第87-89页
        8.3.1 FcDYNCI 相互作用蛋白第87-88页
        8.3.2 FcDYNCI 与 Rab 7 相互作用关系的验证第88-89页
        8.3.3 中国对虾血细胞内 Rab 7 相互作用蛋白的质谱鉴定第89页
    8.4 讨论第89-90页
    小结第90-91页
总结第91-93页
参考文献第93-102页
致谢第102-103页
个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果第103-104页

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