| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-7页 |
| 缩略词 | 第12-13页 |
| 1 绪论 | 第13-23页 |
| 1.1 引言 | 第13-14页 |
| 1.2 莱氏野村菌的液体诱导培养微菌核 | 第14-16页 |
| 1.3 菌核（微菌核）发育相关蛋白酶和基因的研究 | 第16-18页 |
| 1.3.1 菌核（微菌核）发育过程中物质变化和关键蛋白酶的研究 | 第16-17页 |
| 1.3.2 菌核（微菌核）发育过程相关基因的研究 | 第17-18页 |
| 1.3.3 菌核（微菌核）发育形成机理的研究 | 第18页 |
| 1.4 转录水平研究丝状真菌的差异表达基因 | 第18-23页 |
| 2 莱氏野村菌微菌核生存能力及其培养基成分优化的研究 | 第23-35页 |
| 2.1 研究背景 | 第23-24页 |
| 2.2 研究内容和技术路线 | 第24-25页 |
| 2.2.1 研究内容 | 第24页 |
| 2.2.2 研究技术路线 | 第24-25页 |
| 2.3 试验材料 | 第25-26页 |
| 2.3.1 主要仪器设备 | 第25页 |
| 2.3.2 主要试剂、培养基 | 第25-26页 |
| 2.4 试验方法 | 第26-28页 |
| 2.4.1 菌株和培养环境 | 第26页 |
| 2.4.2 优化最佳培养基 | 第26-27页 |
| 2.4.3 MS 的耐热性、贮存能力和侵染能力测定 | 第27-28页 |
| 2.4.4 数据分析 | 第28页 |
| 2.5 结果 | 第28-33页 |
| 2.5.1 优化促进微菌核产生的碳源、氮源 | 第28-29页 |
| 2.5.2 优化促进微菌核产生的主要盐离子 | 第29-30页 |
| 2.5.3 正交优化试验 | 第30-31页 |
| 2.5.4 耐热性、耐贮存能力和侵染能力的测定 | 第31-33页 |
| 2.6 讨论 | 第33-35页 |
| 3 比较转录组研究莱氏野村微菌核的分子发育机理 | 第35-57页 |
| 3.1 研究背景 | 第35-36页 |
| 3.2 研究内容和技术路线 | 第36-37页 |
| 3.2.1 研究内容 | 第36页 |
| 3.2.2 研究技术路线 | 第36-37页 |
| 3.3 试验材料 | 第37-38页 |
| 3.3.1 主要仪器设备 | 第37页 |
| 3.3.2 主要试剂 | 第37-38页 |
| 3.4 试验方法 | 第38-42页 |
| 3.4.1 收集试验样品 | 第38页 |
| 3.4.2 试验样品的总 RNA 的提取和 cDNA 第一链的合成 | 第38-39页 |
| 3.4.3 Illumina 测序结果的生物信息学分析 | 第39页 |
| 3.4.4 基因验证和分析 | 第39-42页 |
| 3.5 结果 | 第42-50页 |
| 3.5.1 Illumina 测序及其数据分析 | 第42-47页 |
| 3.5.2 Illumina 测序数据的注释 | 第47-50页 |
| 3.5.3 确认与 MS 发育相关的上调基因 | 第50页 |
| 3.5.4 RT-qPCR 验证 | 第50页 |
| 3.6 讨论 | 第50-57页 |
| 4 莱氏野村菌两个跨膜蛋白感受体基因(shol 和 sln1)在微菌核发育过程中的胁迫应答研究 | 第57-83页 |
| 4.1 研究背景 | 第57-59页 |
| 4.2 研究内容和技术路线 | 第59-60页 |
| 4.2.1 研究内容 | 第59-60页 |
| 4.2.2 研究技术路线 | 第60页 |
| 4.3 试验材料 | 第60-61页 |
| 4.3.1 主要仪器设备 | 第60页 |
| 4.3.2 主要试剂 | 第60-61页 |
| 4.4 试验方法 | 第61-70页 |
| 4.4.1 检测培养环境及其对微菌核产量的影响 | 第61-62页 |
| 4.4.2 基因克隆、生物信息学分析 | 第62-65页 |
| 4.4.3 RNA 干扰 (RNAi) | 第65-68页 |
| 4.4.4 RT–qPCR 定量分析 | 第68页 |
| 4.4.5 干扰株的表型分析 | 第68-70页 |
| 4.4.6 干扰株的毒力分析 | 第70页 |
| 4.4.7 数据分析 | 第70页 |
| 4.5 结果 | 第70-79页 |
| 4.5.1 培养微环境的变化及对生物量和微菌核产量的影响 | 第70-71页 |
| 4.5.2 shol 和 sln1 基因的克隆和序列分析 | 第71页 |
| 4.5.3 Sholp 和 Sln1p 蛋白生物信息学及进化关系分析 | 第71-75页 |
| 4.5.4 shol 和 sln1 基因表达谱分析 | 第75-76页 |
| 4.5.5 干扰株影响产孢和微菌核产量 | 第76-78页 |
| 4.5.6 shol 和 sln1 基因影响莱氏野村菌的毒力 | 第78-79页 |
| 4.6 讨论 | 第79-83页 |
| 5 优化莱氏野村菌微菌核液体发酵过程中的参数及中试发酵工艺的建立 | 第83-95页 |
| 5.1 研究背景 | 第83-84页 |
| 5.2 研究内容和技术路线 | 第84-85页 |
| 5.2.1 研究内容 | 第84页 |
| 5.2.2 研究技术路线 | 第84-85页 |
| 5.3 试验材料 | 第85页 |
| 5.3.1 主要仪器设备 | 第85页 |
| 5.3.2 主要试剂、培养基 | 第85页 |
| 5.4 试验方法 | 第85-87页 |
| 5.4.1 菌株和接种体的制备 | 第85页 |
| 5.4.2 部分析因设计 (Fractional factorial design, FFD) | 第85页 |
| 5.4.3 中心组合设计 (Cental composite design, CCD) | 第85-86页 |
| 5.4.4 微菌核的一步发酵技术研究 | 第86-87页 |
| 5.4.5 数据的统计分析 | 第87页 |
| 5.5 结果 | 第87-93页 |
| 5.5.1 部分因子设计确定主要因素 | 第87页 |
| 5.5.2 响应面设计结果 | 第87-89页 |
| 5.5.3 微菌核的一步发酵工艺优化 | 第89-93页 |
| 5.6 讨论 | 第93-95页 |
| 6 主要结论与后续工作建议 | 第95-97页 |
| 6.1 主要结论 | 第95页 |
| 6.2 创新点 | 第95-96页 |
| 6.3 后续工作建议 | 第96-97页 |
| 致谢 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-117页 |
| 附录 | 第117页 |
| A. 作者攻读学位期间已发表及拟发表的论文 | 第117页 |
| B. 作者在攻读学位期间已申报的国家发明专利 | 第117页 |
