摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 引言 | 第12-22页 |
1.1 文献综述 | 第12-19页 |
1.1.1 草酸对植物的毒害作用机理 | 第12-13页 |
1.1.2 草酸氧化酶的研究进展 | 第13-14页 |
1.1.3 草酸氧化酶的抗病机理 | 第14-16页 |
1.1.4 草酸氧化酶在植物其它抗逆作用的研究进展 | 第16页 |
1.1.5 抗氧化酶在植物抗逆中的作用 | 第16-18页 |
1.1.6 脯氨酸和糖类在植物防御过程中的作用机制 | 第18-19页 |
1.2 本研究的目的意义以及技术路线 | 第19-22页 |
2 农杆菌介导的花器官原位转化法的条件优化 | 第22-34页 |
2.1 材料和方法 | 第22-25页 |
2.1.1 植物以及种植方法 | 第22页 |
2.1.2 农杆菌的培养及渗透培养基的制备 | 第22-23页 |
2.1.3 花器官原位转化浸染时间对拟南芥花序存活状态的影响 | 第23-24页 |
2.1.4 花器官原位转化法转化拟南芥的花蕾状态的研究 | 第24-25页 |
2.1.5 Floral-dip 法与 Drop-by-drop 法转化处理拟南芥 | 第25页 |
2.2 结果与分析 | 第25-31页 |
2.2.1 农杆菌生长阶段对转化率的影响 | 第25-28页 |
2.2.2 渗透培养基的农杆菌浓度对拟南芥转化率的影响 | 第28-31页 |
2.2.3 Floral-dip 转化法的浸染时间对拟南芥花序存活状态的影响 | 第31页 |
2.2.4 Floral-dip 转化法转化拟南芥的花蕾的最佳状态 | 第31页 |
2.3 小结与讨论 | 第31-34页 |
2.3.1 农杆菌菌悬液与渗透培养基中农杆菌浓度对转化率的影响 | 第31-32页 |
2.3.2 浸染时间对拟南芥花序存活状态的影响 | 第32-33页 |
2.3.3 拟南芥的花蕾的最佳状态 | 第33-34页 |
3 转 OxO 基因拟南芥的获得 | 第34-43页 |
3.1 材料与方法 | 第34-38页 |
3.1.1 草丁磷选择培养基初步筛选拟南芥抗性植株 | 第34-35页 |
3.1.1.1 选择 PPT 筛选浓度 | 第34页 |
3.1.1.2 PPT 选择培养基筛选转基因拟南芥 | 第34-35页 |
3.1.2 GUS 组织化学染色法鉴定转基因拟南芥植株 | 第35页 |
3.1.3 PCR 验证转基因拟南芥植株 | 第35-37页 |
3.1.3.1 CTAB 法提取拟南芥基因组 DNA | 第35-36页 |
3.1.3.2 转基因拟南芥植株的 PCR 检测 | 第36-37页 |
3.1.4 RT-PCR 检测转 OxO 拟南芥的目的基因的表达 | 第37-38页 |
3.2 结果与分析 | 第38-42页 |
3.2.1 PPT 选择培养基初筛阳性苗 | 第38-40页 |
3.2.2 GUS 组织化学染色法检测 PPT 抗性植株 | 第40-41页 |
3.2.3 PCR 验证 GUS 表达植株 | 第41页 |
3.2.4 RT-PCR 验证 OxO 基因的表达 | 第41-42页 |
3.3 小结与讨论 | 第42-43页 |
4 转 OxO 拟南芥的抗病分析及抗病机理的初步研究 | 第43-62页 |
4.1 转 OxO 拟南芥的抗病分析 | 第43-48页 |
4.1.1 材料与方法 | 第43-45页 |
4.1.1.1 草酸鉴定法检测转 OxO 基因拟南芥的抗菌核病性 | 第43-44页 |
4.1.1.2 菌丝体接种法检测转 OxO 基因拟南芥的抗菌核病性 | 第44-45页 |
4.1.2 结果与分析 | 第45-46页 |
4.1.2.1 草酸鉴定法检测转 OxO 基因拟南芥的抗病性 | 第45-46页 |
4.1.2.2 菌丝体接种法鉴定转 OxO 拟南芥的抗病性 | 第46页 |
4.1.3 小结与讨论 | 第46-48页 |
4.2 转 OxO 拟南芥的抗氧化分析 | 第48-56页 |
4.2.1 材料与方法 | 第48-51页 |
4.2.1.1 二氨基联苯胺(DAB)法检测转 OxO 拟南芥的 H2O2的含量 | 第48页 |
4.2.1.2 抗氧化酶活性的测定 | 第48-51页 |
4.2.2 结果与分析 | 第51-53页 |
4.2.2.1 转 OxO 拟南芥叶片在菌核病感染后积累更多 H2O2含量 | 第51-52页 |
4.2.2.2 抗氧化酶的活性变化显著 | 第52-53页 |
4.2.3 小结与讨论 | 第53-56页 |
4.3 转 OxO 拟南芥的渗透调节物质的分析 | 第56-60页 |
4.3.1 材料与方法 | 第56-58页 |
4.3.1.1 可溶性糖含量的检测 | 第56-57页 |
4.3.1.2 脯氨酸含量的检测 | 第57-58页 |
4.3.2 结果与分析 | 第58-60页 |
4.3.2.1 转 OxO 拟南芥的可溶糖含量相对于野生型拟南芥增加更多 | 第58-59页 |
4.3.2.2 菌核病菌丝体接种后转 OxO 拟南芥脯氨酸含量更高 | 第59-60页 |
4.4 小结与讨论 | 第60-62页 |
5 结论与展望 | 第62-65页 |
附录1 | 第65-66页 |
附录2 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
个人简历及攻读硕士期间发表论文 | 第78页 |