摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第一章 绪论 | 第11-22页 |
1.1 肠出血性大肠杆菌 O157 简介 | 第11-13页 |
1.1.1 肠出血性大肠杆菌 O157 的传播途径和流行现状 | 第11页 |
1.1.2 肠出血性大肠杆菌 O157 生物学性状 | 第11-12页 |
1.1.3 肠出血性大肠杆菌 O157 的抵抗力 | 第12页 |
1.1.4 肠出血性大肠杆菌 O157 的致病机理和主要毒力因子 | 第12-13页 |
1.2 肠出血性大肠杆菌 O157 的检测鉴定方法 | 第13-16页 |
1.2.1 常规培养法 | 第13-14页 |
1.2.2 免疫学检测方法 | 第14-15页 |
1.2.3 分子生物学检测方法 | 第15-16页 |
1.3 环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)方法 | 第16-20页 |
1.3.1 LAMP 方法的概述 | 第16页 |
1.3.2 LAMP 方法的特点 | 第16-17页 |
1.3.3 LAMP 引物的设计和扩增原理 | 第17-20页 |
1.3.4 LAMP 的反应体系 | 第20页 |
1.3.5 LAMP 方法的应用 | 第20页 |
1.4 立题意义 | 第20-21页 |
1.5 研究内容 | 第21-22页 |
第二章 LAMP 实时浊度法快速检测肠出血性大肠杆菌 O157 方法的建立和优化 | 第22-33页 |
2.1 材料 | 第22-23页 |
2.1.1 菌株 | 第22页 |
2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
2.2 仪器与设备 | 第23页 |
2.3 研究方法 | 第23-26页 |
2.3.1 引物的设计 | 第23-24页 |
2.3.2 LAMP 引物简介 | 第24页 |
2.3.3 LAMP 反应各引物序列 | 第24页 |
2.3.4 PCR 扩增采用的引物 | 第24-25页 |
2.3.5 浓度及纯度的测定 | 第25页 |
2.3.6 LAMP 反应体系的建立 | 第25-26页 |
2.3.7 LAMP 反应条件的优化 | 第26页 |
2.4 结果与讨论 | 第26-31页 |
2.4.1 LAMP 反应体系的建立 | 第26-29页 |
2.4.2 反应条件的优化 | 第29-31页 |
2.5 本章小结 | 第31-33页 |
第三章 LAMP 引物的特异性鉴定和灵敏度评价 | 第33-45页 |
3.1 材料 | 第33-34页 |
3.1.1 菌株 | 第33页 |
3.1.2 主要试剂 | 第33-34页 |
3.2 仪器与设备 | 第34页 |
3.3 研究方法 | 第34页 |
3.3.1 LAMP 特异性试验 | 第34页 |
3.3.2 LAMP 灵敏度评价 | 第34页 |
3.4 结果与讨论 | 第34-44页 |
3.4.1 LAMP 引物特异性鉴定 | 第34-38页 |
3.4.1.1 肠出血性大肠杆菌 O157 rfbE 引物的特异性鉴定 | 第35-36页 |
3.4.1.2 肠出血性大肠杆菌 O157 stx1 引物的特异性鉴定 | 第36-37页 |
3.4.1.3 肠出血性大肠杆菌 O157 stx2 引物的特异性鉴定 | 第37-38页 |
3.4.2 LAMP 与 PCR 检测的灵敏度比较 | 第38-44页 |
3.4.2.1 肠出血性大肠杆菌 O157 rfbE 引物的灵敏度比较 | 第39-40页 |
3.4.2.2 肠出血性大肠杆菌 O157stx1 引物的灵敏度比较 | 第40-41页 |
3.4.2.3 肠出血性大肠杆菌 O157stx2 引物的灵敏度比较 | 第41-44页 |
3.5 本章小结 | 第44-45页 |
第四章 食品样品添加试验及珠海地区食品中肠出血性大肠杆菌 O157 的 LAMP 检测 | 第45-58页 |
4.1 材料 | 第45页 |
4.1.1 菌株 | 第45页 |
4.1.2 主要试剂 | 第45页 |
4.2 仪器与设备 | 第45页 |
4.3 研究方法 | 第45-46页 |
4.3.1 食品样品添加试验 | 第45-46页 |
4.3.2 珠海地区食品中肠出血性大肠杆菌 O157 的 LAMP 法检测 | 第46页 |
4.4 结果与讨论 | 第46-57页 |
4.4.1 食品样品添加试验 | 第46-48页 |
4.4.2 珠海地区食品中肠出血性大肠杆菌 O157 的 LAMP 法检测 | 第48-57页 |
4.5 本章小结 | 第57-58页 |
结论与展望 | 第58-60页 |
一、结论 | 第58页 |
二、本论文创新点 | 第58-59页 |
三、展望 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
攻读博士/硕士学位期间取得的研究成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
附表 | 第68页 |