摘要 | 第4-7页 |
Abstract | 第7-10页 |
英文缩略语 | 第11-14页 |
第一部分 :COL1A2在结直肠癌患者中的表达和意义 | 第14-26页 |
1 前言 | 第14-15页 |
2 材料和方法 | 第15-20页 |
2.1 主要试剂和仪器 | 第15-16页 |
2.1.1 主要试剂 | 第15-16页 |
2.1.2 主要仪器 | 第16页 |
2.2 研究对象和分组 | 第16-17页 |
2.3 研究方法 | 第17-20页 |
2.3.1 实时定量PCR(q-PCR) | 第17-19页 |
2.3.2 免疫组织化学染色 | 第19-20页 |
2.3.3 表达差异的计算方法 | 第20页 |
2.3.4 统计学分析 | 第20页 |
3 结果 | 第20-23页 |
3.1 COL1A2在结直肠癌患者中的表达降低 | 第20-21页 |
3.2 COL1A2表达水平和结直肠癌患者病理学特征具有相关性 | 第21-22页 |
3.3 COL1A2对结直肠癌患者生存期的影响 | 第22-23页 |
4 讨论 | 第23-25页 |
5 结论 | 第25-26页 |
第二部分 :慢病毒转染过表达COL1A2基因对结直肠癌细胞生物学行为的影响 | 第26-42页 |
6 前言 | 第26-27页 |
7 材料和方法 | 第27-36页 |
7.1 主要试剂和仪器 | 第27-29页 |
7.1.1 主要试剂 | 第27-28页 |
7.1.2 主要仪器 | 第28-29页 |
7.2 研究对象及分组 | 第29页 |
7.2.1 研究对象 | 第29页 |
7.2.2 实验分组 | 第29页 |
7.3 实验方法 | 第29-36页 |
7.3.1 细胞培养 | 第29-30页 |
7.3.2 慢病毒载体转染及稳定株筛选 | 第30-31页 |
7.3.2 Westernblot检测构建病毒稳转株前后COL1A2蛋白表达 | 第31-34页 |
7.3.3 PCR检测构建病毒稳转株前后COL1A2mRNA表达 | 第34-35页 |
7.3.5 CCK8实验 | 第35页 |
7.3.7 统计学处理 | 第35-36页 |
8 结果 | 第36-39页 |
8.1 COL1A2在各株细胞的表达水平 | 第36页 |
8.2 COL1A-over细胞模型构建与验证 | 第36-37页 |
8.3 过表达COL1A2基因抑制CRC细胞增殖 | 第37-38页 |
8.4 过表达COL1A2抑制CRC细胞迁移侵袭能力 | 第38-39页 |
9 讨论 | 第39-41页 |
10 结论 | 第41-42页 |
第三部分 :COL1A2参与调控结直肠癌增殖、侵袭、迁移的分子机制研究 | 第42-63页 |
11 前言 | 第42-43页 |
12 材料与方法 | 第43-49页 |
12.1 主要试剂和仪器 | 第43-44页 |
12.1.1 主要试剂 | 第43-44页 |
12.1.2 主要仪器 | 第44页 |
12.2 研究对象和分组 | 第44-45页 |
12.3 研究方法 | 第45-49页 |
12.3.1 SW480、SW620稳转COL1A2细胞培养及传代 | 第45页 |
12.3.2 提取RNA行PCR | 第45页 |
12.3.3 基因表达谱芯片 | 第45页 |
12.3.4 IPA生物学分析 | 第45-46页 |
12.3.5 western检测下游调控相关分子蛋白 | 第46-49页 |
12.3.6 统计学处理 | 第49页 |
13 结果 | 第49-58页 |
13.1 下游差异基因 | 第49-51页 |
13.2 Western验证COL1A2调控的下游相关基因 | 第51-53页 |
13.3 IPA分析与COL1A2相关的功能及疾病 | 第53-54页 |
13.4 受COL1A2影响的相关通路 | 第54页 |
13.5 COL1A2对结直肠癌细胞NF-κB通路蛋白的影响 | 第54-57页 |
13.6 初步探讨COL1A2在对结直肠癌细胞网络调控的影响 | 第57-58页 |
14 讨论 | 第58-62页 |
15 结论 | 第62-63页 |
本研究创新性的自我评价 | 第63-64页 |
参考文献 | 第64-70页 |
综述 | 第70-83页 |
参考文献 | 第77-83页 |
致谢 | 第83-84页 |
个人简历 | 第84页 |