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RNA结合蛋白FMRP与细胞间粘附分子ICAM5相互作用调控脆性X综合征树突棘发育的机制研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
英文缩写对照表(Abbreviations)第8-11页
第1章 前言第11-13页
第2章第13-30页
    2.1 实验材料第13-17页
        2.1.1 实验器材第13-14页
        2.1.2 实验试剂第14-16页
        2.1.3 实验动物第16页
        2.1.4 动物分组及处理第16-17页
    2.2 原代神经元培养及转染第17-19页
        2.2.1 原代神经元培养第17-18页
        2.2.2 DNA载体构建第18页
        2.2.3 慢病毒感染原代培养神经元第18-19页
    2.3 WesternBlot第19-21页
        2.3.1 蛋白提取第19页
        2.3.2 蛋白浓度测定及配制上样体系第19页
        2.3.3 电泳第19-21页
        2.3.4 数据处理第21页
    2.4 高尔基染色实验第21-22页
        2.4.1 实验方法第21页
        2.4.2 数据处理第21-22页
    2.5 RNA提取、逆转录及实时荧光定量第22-23页
        2.5.1 RNA提取第22页
        2.5.2 RNA逆转录第22-23页
        2.5.3 实时荧光定量第23页
        2.5.4 数据处理第23页
    2.6 Dil染色形态学分析第23-24页
        2.6.1 Dil细胞膜染色液制备第23-24页
        2.6.2 数据分析第24页
    2.7 RNA复合物免疫共沉淀第24-26页
        2.7.1 裂解产物的配制第24页
        2.7.2 用于免疫沉淀的磁珠配制第24-25页
        2.7.3 RNA结合蛋白-RNA复合物免疫共沉淀(RIP)第25页
        2.7.4 RNA的纯化第25-26页
    2.8 脑立体定位注射第26-27页
    2.9 行为学实验第27-30页
        2.9.1 Morris水迷宫试验第27页
        2.9.2 高架十字迷宫试验第27-28页
        2.9.3 旷场试验第28页
        2.9.4 三箱交互试验第28页
        2.9.5 条件恐惧实验第28-29页
        2.9.6 数据处理第29-30页
第3章 结果第30-49页
    3.1 Fmr1KO小鼠缺乏FMRP导致ICAM5蛋白和mRNA水平的年龄依赖性变化第30-32页
        3.1.1 Fmr1KO小鼠缺乏FMRP导致ICAM5蛋白水平的年龄依赖性变化第30-31页
        3.1.2 Fmr1KO小鼠缺乏FMRP导致ICAM5mRNA水平的年龄依赖性变化第31-32页
    3.2 ICAM5年龄依赖性改变与Fmr1KO小鼠中大量的丝状伪足样树突棘的时间相平行第32-35页
    3.3 在培养的野生型神经元中FMRP影响ICAM5蛋白表达并进一步影响树突棘形态第35-38页
    3.4 在Fmr1KO神经元中过表达FMR1会降低ICAM5蛋白水平及改善树突棘发育第38-39页
    3.5 在Fmr1KO神经元中干扰ICAM5蛋白表达会改善树突棘发育第39-41页
    3.6 在体外FMRP直接与ICAM5mRNA结合第41-42页
    3.7 ICAM5mRNA的编码序列(CDS)区域与FMRP蛋白结合第42-43页
    3.8 减少ICAM5表达可以改善Fmr1KO小鼠的行为缺陷第43-49页
第4章 结论与展望第49-52页
致谢第52-53页
参考文献第53-56页
综述第56-66页
    参考文献第63-66页
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文第66-67页
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目第67页

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