摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩写对照表(Abbreviations) | 第8-11页 |
第1章 前言 | 第11-13页 |
第2章 | 第13-30页 |
2.1 实验材料 | 第13-17页 |
2.1.1 实验器材 | 第13-14页 |
2.1.2 实验试剂 | 第14-16页 |
2.1.3 实验动物 | 第16页 |
2.1.4 动物分组及处理 | 第16-17页 |
2.2 原代神经元培养及转染 | 第17-19页 |
2.2.1 原代神经元培养 | 第17-18页 |
2.2.2 DNA载体构建 | 第18页 |
2.2.3 慢病毒感染原代培养神经元 | 第18-19页 |
2.3 WesternBlot | 第19-21页 |
2.3.1 蛋白提取 | 第19页 |
2.3.2 蛋白浓度测定及配制上样体系 | 第19页 |
2.3.3 电泳 | 第19-21页 |
2.3.4 数据处理 | 第21页 |
2.4 高尔基染色实验 | 第21-22页 |
2.4.1 实验方法 | 第21页 |
2.4.2 数据处理 | 第21-22页 |
2.5 RNA提取、逆转录及实时荧光定量 | 第22-23页 |
2.5.1 RNA提取 | 第22页 |
2.5.2 RNA逆转录 | 第22-23页 |
2.5.3 实时荧光定量 | 第23页 |
2.5.4 数据处理 | 第23页 |
2.6 Dil染色形态学分析 | 第23-24页 |
2.6.1 Dil细胞膜染色液制备 | 第23-24页 |
2.6.2 数据分析 | 第24页 |
2.7 RNA复合物免疫共沉淀 | 第24-26页 |
2.7.1 裂解产物的配制 | 第24页 |
2.7.2 用于免疫沉淀的磁珠配制 | 第24-25页 |
2.7.3 RNA结合蛋白-RNA复合物免疫共沉淀(RIP) | 第25页 |
2.7.4 RNA的纯化 | 第25-26页 |
2.8 脑立体定位注射 | 第26-27页 |
2.9 行为学实验 | 第27-30页 |
2.9.1 Morris水迷宫试验 | 第27页 |
2.9.2 高架十字迷宫试验 | 第27-28页 |
2.9.3 旷场试验 | 第28页 |
2.9.4 三箱交互试验 | 第28页 |
2.9.5 条件恐惧实验 | 第28-29页 |
2.9.6 数据处理 | 第29-30页 |
第3章 结果 | 第30-49页 |
3.1 Fmr1KO小鼠缺乏FMRP导致ICAM5蛋白和mRNA水平的年龄依赖性变化 | 第30-32页 |
3.1.1 Fmr1KO小鼠缺乏FMRP导致ICAM5蛋白水平的年龄依赖性变化 | 第30-31页 |
3.1.2 Fmr1KO小鼠缺乏FMRP导致ICAM5mRNA水平的年龄依赖性变化 | 第31-32页 |
3.2 ICAM5年龄依赖性改变与Fmr1KO小鼠中大量的丝状伪足样树突棘的时间相平行 | 第32-35页 |
3.3 在培养的野生型神经元中FMRP影响ICAM5蛋白表达并进一步影响树突棘形态 | 第35-38页 |
3.4 在Fmr1KO神经元中过表达FMR1会降低ICAM5蛋白水平及改善树突棘发育 | 第38-39页 |
3.5 在Fmr1KO神经元中干扰ICAM5蛋白表达会改善树突棘发育 | 第39-41页 |
3.6 在体外FMRP直接与ICAM5mRNA结合 | 第41-42页 |
3.7 ICAM5mRNA的编码序列(CDS)区域与FMRP蛋白结合 | 第42-43页 |
3.8 减少ICAM5表达可以改善Fmr1KO小鼠的行为缺陷 | 第43-49页 |
第4章 结论与展望 | 第49-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
参考文献 | 第53-56页 |
综述 | 第56-66页 |
参考文献 | 第63-66页 |
附录1 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第66-67页 |
附录2 攻读硕士学位期间参加的科研项目 | 第67页 |