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转新型Bt基因水稻的获得和初步研究

摘要第4-6页
Abstract第6-8页
缩写词(Abbreviation)第9-12页
1 文献综述第12-22页
    1.1 水稻常见虫害第12-14页
        1.1.1 稻飞虱第12-13页
        1.1.2 水稻螟虫第13页
        1.1.3 稻纵卷叶螟第13-14页
    1.2 水稻抗虫基因的研究现状第14-17页
        1.2.1 植物外源凝集素基因第14-15页
        1.2.2 蛋白酶抑制剂基因第15页
        1.2.3 Bt基因(苏云金芽胞杆菌)第15-17页
    1.3 水稻基因工程育种技术第17-18页
    1.4 转Bt基因水稻的研究进展第18-19页
    1.5 转Bt抗虫基因水稻安全性研究第19-20页
        1.5.1 转Bt抗虫基因水稻的食品安全第19-20页
        1.5.2 转Bt抗虫基因水稻的生态安全第20页
    1.6 转Bt抗虫基因水稻对重金属镉(Cd)的富集积累第20-21页
    1.7 本试验立题依据及目的意义第21-22页
        1.7.1 三种新型Bt抗虫基因水稻的获得第21页
        1.7.2 转基因水稻对重金属镉胁迫的响应第21-22页
2 三种新型Bt抗虫基因水稻的获得第22-30页
    2.1 实验材料第22-25页
        2.1.1 供试水稻品种第22页
        2.1.2 菌株和质粒第22页
        2.1.3 主要化学试剂第22-23页
        2.1.4 培养基第23-24页
        2.1.5 重要仪器设备第24-25页
    2.2 实验方法第25-30页
        2.2.1 载体的构建第25页
        2.2.2 重组质粒的提取方法第25-26页
        2.2.3 胚性愈伤组织的诱导及继代第26页
        2.2.4 农杆菌的遗传转化第26-28页
        2.2.5 转基因植株的再生第28页
        2.2.6 转基因植株的炼苗和移栽第28页
        2.2.7 转基因水稻叶片基因组DNA提取(CTAB法)第28-29页
        2.2.8 转基因再生植株潮霉素基因的检测第29-30页
        2.2.9 转基因再生植株目的基因的检测第30页
3 转Bt基因Cry30Fa/高代水稻对镉胁迫的响应第30-37页
    3.1 实验材料第30-33页
        3.1.1 供试水稻品种第30-31页
        3.1.2 供试土壤第31页
        3.1.3 供试肥料第31-32页
        3.1.4 试验设计第32页
        3.1.5 重要仪器设备第32-33页
        3.1.6 主要化学试剂第33页
    3.2 测定指标及方法第33-36页
        3.2.1 供试土壤基本理化性质的测定第33-35页
        3.2.2 水稻生长发育及各生物量的测定第35页
        3.2.3 水稻各组织器官镉含量的测定第35页
        3.2.4 水稻种子萌发统计第35-36页
        3.2.5 水稻几种生理指标的测定第36页
    3.3 数据处理与分析第36-37页
4 实验结果与分析第37-58页
    4.1 3个新型Bt基因密码子优化第37-39页
    4.2 含选择标记的新型Bt基因农杆菌转化载体的构建与鉴定第39-41页
    4.3 利用农杆菌介导法,将外源基因Cry2Ag1、Cry30Ga1、Cry54Ab1导入R818第41-42页
        4.3.1 籼性水稻R818成熟胚愈伤组织的获得第41页
        4.3.2 农杆菌介导的转新型Bt基因籼性水稻的获得第41-42页
    4.4 T_0代转基因抗性植株的检测第42-46页
        4.4.1 T_0代转基因植株的PCR检测第42-45页
        4.4.2 T_0代转基因植株潮霉素抗性检测第45-46页
    4.5 T_1代转基因植株的检测第46页
    4.6 重金属镉胁迫对转Cry30Fa/基因水稻幼苗的影响第46-53页
        4.6.1 供试土壤的基本理化性质分析第46-47页
        4.6.2 镉胁迫对转Bt基因水稻幼苗株高的影响第47-48页
        4.6.3 镉胁迫对转Bt基因水稻幼苗最长根长的影响第48页
        4.6.4 镉胁迫对转Bt基因水稻幼苗不同组织器官生物量的影响第48-50页
        4.6.5 镉胁迫下转Bt基因水稻幼苗不同组织器官对镉的富集吸收第50-53页
    4.7 重金属镉胁迫对转Bt基因水稻种子萌发的影响第53-55页
    4.8 重金属镉胁迫下转Bt基因水稻幼苗各生化指标的测定第55-58页
        4.8.1 重金属镉胁迫下转Bt基因水稻幼苗的叶绿素含量第55-56页
        4.8.2 重金属镉胁迫下转Bt基因水稻幼苗的丙二醛(MDA)含量第56-58页
5 讨论第58-60页
    5.1 新型杀虫基因Cry2Ag1、Cry30Ga/和Cry54Ab1的实际应用性第58页
    5.2 双T载体共转化获得去选择标记基因的转基因植株的效率分析第58-59页
    5.3 转Bt基因水稻对重金属镉胁迫的响应第59-60页
6 后续研究的设想第60-61页
    6.1 转3个新型Bt基因水稻的研究展望第60页
    6.2 重金属镉对转Bt基因水稻胁迫的研究展望第60-61页
参考文献第61-68页
致谢第68-69页
附录第69-73页
    附录一第69-73页
攻读硕士学位期间发表的学术论文目录第73页

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