| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 一 前言 | 第12-20页 |
| 1 节肢动物血蓝蛋白结构 | 第12-13页 |
| 2 血蓝蛋白家族 | 第13-15页 |
| 3 血蓝蛋白的功能 | 第15-17页 |
| 3.1 血蓝蛋白运输氧气功能 | 第15页 |
| 3.2 血蓝蛋白的酚氧化物酶活性 | 第15-16页 |
| 3.3 血蓝蛋白的抗菌活性 | 第16页 |
| 3.4 血蓝蛋白的抗病毒活性 | 第16页 |
| 3.5 血蓝蛋白的其它功能 | 第16-17页 |
| 4 六足纲动物血蓝蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| 5 直翅目昆虫血蓝蛋白的研究进展和意义 | 第18-20页 |
| 二 东亚飞蝗血蓝蛋白亚基 1 基因的克隆与序列分析 | 第20-42页 |
| 1 研究材料 | 第20-21页 |
| 1.1 实验材料 | 第20页 |
| 1.2 实验仪器及耗材 | 第20页 |
| 1.3 所需试剂 | 第20-21页 |
| 1.4 所需试剂盒 | 第21页 |
| 1.5 所需培养基 | 第21页 |
| 2 研究方法 | 第21-31页 |
| 2.1 总RNA提取 | 第21-22页 |
| 2.2 反转录 | 第22页 |
| 2.3 东亚飞蝗血蓝蛋白亚基 1 基因的克隆 | 第22-31页 |
| 2.3.1 引物设计 | 第22页 |
| 2.3.2 东亚飞蝗血蓝蛋白亚基 1 基因cDNA序列保守区域的扩增 | 第22-23页 |
| 2.3.3 东亚飞蝗血蓝蛋白亚基 1 基因cDNA序列 5’和 3’末端的扩增 | 第23-29页 |
| 2.3.4 PCR产物的胶回收 | 第29页 |
| 2.3.5 PCR纯化产物的克隆测序 | 第29-31页 |
| 2.3.6 东亚飞蝗血蓝蛋白亚基 1 基因序列拼接和生物信息学分析 | 第31页 |
| 3 实验结果 | 第31-39页 |
| 3.1 东亚飞蝗血蓝蛋白亚基 1 基因的克隆 | 第31-32页 |
| 3.2 东亚飞蝗血蓝蛋白亚基 1 基因cDNA序列特征的分析 | 第32-39页 |
| 3.2.1 基因核苷酸序列分析 | 第32-35页 |
| 3.2.2 蛋白序列同源性分析 | 第35页 |
| 3.2.3 蛋白质一级结构分析 | 第35-36页 |
| 3.2.4 蛋白质二级结构分析 | 第36-38页 |
| 3.2.5 蛋白质三级结构分析 | 第38-39页 |
| 3.3 分子进化分析 | 第39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| 4.1 RACE | 第39-40页 |
| 4.2 LmiHc1 基因的克隆 | 第40页 |
| 4.3 系统进化分析 | 第40-42页 |
| 三 东亚飞蝗LmiHc1 基因不同发育阶段的半定量分析 | 第42-45页 |
| 1 实验材料 | 第42页 |
| 1.1 昆虫来源 | 第42页 |
| 1.2 主要试剂 | 第42页 |
| 2 实验方法 | 第42-43页 |
| 2.1 引物设计及合成 | 第42页 |
| 2.2 总RNA提取和反转录 | 第42页 |
| 2.3 LmiHc1 基因表达的半定量RT-PCR分析 | 第42-43页 |
| 3 实验结果 | 第43-44页 |
| 4 讨论 | 第44-45页 |
| 四 东亚飞蝗LmiHc1 基因部分肽段的原核表达 | 第45-53页 |
| 1 研究材料 | 第45-47页 |
| 1.1 菌株及载体 | 第45页 |
| 1.2 主要试剂 | 第45页 |
| 1.3 实验试剂配制 | 第45-47页 |
| 1.4 主要仪器设备 | 第47页 |
| 2 试验方法 | 第47-50页 |
| 2.1 LmiHc1 目的基因的克隆 | 第47-50页 |
| 2.1.1 引物设计与合成 | 第47-48页 |
| 2.1.2 pET-DsbA质粒的提取 | 第48-49页 |
| 2.1.3 BamHI和HindⅢ双酶切pET-DsbA质粒及纯化 | 第49页 |
| 2.1.4 重组子的建立 | 第49-50页 |
| 2.2 pET-DsbA/ LmiHc1 融合蛋白的诱导表达 | 第50页 |
| 3 结果 | 第50-52页 |
| 3.1 LmiHc1 目的基因PCR的扩增 | 第50-51页 |
| 3.2 LmiHc1 基因及质粒双酶切纯化回收 | 第51页 |
| 3.3 重组质粒鉴定 | 第51页 |
| 3.4 重组融合蛋白LmiHc1 的诱导表达 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-53页 |
| 五 结论与展望 | 第53-54页 |
| 5.1 全文结论 | 第53页 |
| 5.2 展望 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-59页 |
| 致谢 | 第59-61页 |
| 攻读学位期间取得的科研成果 | 第61页 |
