| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 丝状真菌研究的意义 | 第10页 |
| 1.2 构巢曲霉(Aspergillus nidulans)生长发育过程 | 第10-13页 |
| 1.2.1 丝状真菌细胞极化和定向生长机制 | 第10-12页 |
| 1.2.2 构巢曲霉无性生殖过程 | 第12-13页 |
| 1.3 真菌的丝状生长和酵母状生长简介 | 第13-14页 |
| 1.4 菌丝形态基因 | 第14-18页 |
| 1.4.1 丝状真菌菌丝形态基因 | 第14-15页 |
| 1.4.2 白色念珠菌菌丝生长信号转导途径和细胞周期蛋白的作用 | 第15-18页 |
| 1.5 影响菌体形态的其它因素 | 第18-19页 |
| 1.5.1 接种量的影响 | 第18-19页 |
| 1.5.2 群体感应的影响 | 第19页 |
| 1.6 构巢曲霉模式菌株 | 第19-20页 |
| 1.7 选题背景和研究意义 | 第20-21页 |
| 第2章 构巢曲霉菌丝形态相关基因缺失菌株构建 | 第21-42页 |
| 2.1 前言 | 第21页 |
| 2.2 实验材料 | 第21-22页 |
| 2.2.1 实验菌株、质粒和保存方法 | 第21页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第21页 |
| 2.2.3 培养基配方 | 第21-22页 |
| 2.3 实验方法 | 第22-27页 |
| 2.3.1 构巢曲霉细胞周期蛋白和CaUme6同源蛋白筛选 | 第22页 |
| 2.3.2 基因敲除策略和实验引物 | 第22-25页 |
| 2.3.3 构巢曲霉原生质体制备和转化 | 第25-26页 |
| 2.3.4 PCR验证转化子 | 第26-27页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第27-40页 |
| 2.4.1 同源蛋白筛选结果 | 第27-29页 |
| 2.4.2 ΔCln1菌株构建 | 第29-31页 |
| 2.4.3 ΔCln4菌株构建 | 第31-33页 |
| 2.4.4 ΔCln5菌株构建 | 第33-34页 |
| 2.4.5 ΔCln6菌株构建 | 第34-36页 |
| 2.4.6 ΔUme1菌株构建 | 第36-38页 |
| 2.4.7 ΔUme2菌株构建 | 第38-39页 |
| 2.4.8 ΔUme3菌株构建 | 第39-40页 |
| 2.5 本章小结 | 第40-42页 |
| 第3章 缺失株表观形态和无性生殖分析 | 第42-51页 |
| 3.1 前言 | 第42页 |
| 3.2 实验材料 | 第42页 |
| 3.2.1 实验菌株和培养基 | 第42页 |
| 3.2.2 实验仪器 | 第42页 |
| 3.3 实验方法 | 第42-43页 |
| 3.3.1 缺失株菌丝形态观察 | 第42页 |
| 3.3.2 缺失株菌落直径和生长曲线测定 | 第42页 |
| 3.3.3 不同培养温度下菌落形态观察 | 第42-43页 |
| 3.3.4 不同培养温度下分生孢子观察和计数 | 第43页 |
| 3.3.5 扫描电镜样品处理 | 第43页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第43-50页 |
| 3.4.1 缺失株菌丝形态 | 第43-44页 |
| 3.4.2 缺失株菌落直径和生长曲线 | 第44-45页 |
| 3.4.3 不同培养温度下缺失株菌落形态 | 第45-47页 |
| 3.4.4 细胞周期蛋白缺失株菌分生孢子头观察 | 第47-48页 |
| 3.4.5 扫描电镜分析分生孢子头形态 | 第48-49页 |
| 3.4.6 不同温度下缺失株分生孢子数量统计 | 第49-50页 |
| 3.5 本章小结 | 第50-51页 |
| 第4章 孢子生成基因和热休克蛋白基因转录水平分析 | 第51-59页 |
| 4.1 前言 | 第51页 |
| 4.2 实验材料 | 第51页 |
| 4.2.1 实验菌株和培养基 | 第51页 |
| 4.2.2 实验仪器和试剂 | 第51页 |
| 4.3 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.3.1 RNA抽提实验 | 第51-52页 |
| 4.3.2 RNA转录水平分析 | 第52-53页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第53-56页 |
| 4.4.1 ΔCln1孢子生成相关基因转录水平分析 | 第53-54页 |
| 4.4.2 ΔCln4孢子生成相关基因转录水平分析 | 第54-55页 |
| 4.4.3 ΔCln5孢子生成相关基因转录水平分析 | 第55-56页 |
| 4.4.4 ΔCln6孢子生成相关基因转录水平分析 | 第56页 |
| 4.5 缺失株热击蛋白基因Hsp30和Hsp70转录水平分析 | 第56-57页 |
| 4.6 本章小结 | 第57-59页 |
| 第5章 结论与展望 | 第59-60页 |
| 5.1 结论 | 第59页 |
| 5.2 展望 | 第59-60页 |
| 参考文献 | 第60-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
