摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
1 引言 | 第10-27页 |
1.1 全球转基因农作物现状 | 第10-13页 |
1.1.1 转基因植物的发展概况 | 第10-11页 |
1.1.2 我国转基因植物的发展概况 | 第11-12页 |
1.1.3 转基因食品的安全性 | 第12-13页 |
1.1.4 转基因食品的生物安全性管理 | 第13页 |
1.2 转 Bt 基因植物研究进展 | 第13-15页 |
1.3 国内外转基因食品检测技术研究现状 | 第15-20页 |
1.3.1 酶联免疫吸附分析 | 第16页 |
1.3.2 检测外源 DNA——定性检测 | 第16-17页 |
1.3.3 检测外源 DNA——定量检测 | 第17-18页 |
1.3.4 基因芯片检测 | 第18-19页 |
1.3.5 新检测技术 | 第19页 |
1.3.6 常用检测方法比较 | 第19-20页 |
1.4 环介导等温扩增技术 | 第20-25页 |
1.4.1 环介导等温扩增技术概述 | 第20页 |
1.4.2 环介导等温扩增方法的引物设计 | 第20-21页 |
1.4.3 环介导等温扩增法的基本原理 | 第21-23页 |
1.4.4 环介导等温扩增方法产物的检测方法 | 第23-24页 |
1.4.5 环介导等温扩增方法特点 | 第24页 |
1.4.6 环介导等温扩增方法的应用 | 第24-25页 |
1.5 本文的研究意义和研究内容 | 第25-27页 |
1.5.1 研究意义 | 第25-26页 |
1.5.2 主要研究内容 | 第26-27页 |
2 材料与方法 | 第27-34页 |
2.1 实验材料与设备 | 第27-29页 |
2.1.1 实验材料 | 第27页 |
2.1.2 实验仪器 | 第27页 |
2.1.3 实验试剂 | 第27-29页 |
2.2 水稻、棉花基因组的提取方法 | 第29页 |
2.3 模板 DNA 的浓度测定及质量检测 | 第29-30页 |
2.4 引物设计、反应体系及主要操作 | 第30-32页 |
2.4.1 引物的设计 | 第30-31页 |
2.4.2 LAMP 和 PCR 反应体系 | 第31-32页 |
2.4.3 LAMP 和 PCR 主要操作程序 | 第32页 |
2.5 LAMP 反应条件优化 | 第32-33页 |
2.5.1 适宜镁离子浓度选择 | 第32页 |
2.5.2 dNTPs 浓度的优化 | 第32页 |
2.5.3 反应温度的优化 | 第32-33页 |
2.5.4 引物对 LAMP 反应的影响 | 第33页 |
2.5.5 Bst 酶的优化 | 第33页 |
2.6 转基因水稻(棉花)检出限试验 | 第33页 |
2.7 LAMP 引物特异性检测 | 第33-34页 |
3 结果与分析 | 第34-44页 |
3.1 水稻和棉花基因组 DNA 提取结果 | 第34页 |
3.2 模板 DNA 质量控制结果分析 | 第34-35页 |
3.3 LAMP 反应条件的优化 | 第35-39页 |
3.3.1 镁离子浓度的优化 | 第35-36页 |
3.3.2 dNTPs 浓度的优化 | 第36-37页 |
3.3.3 反应温度对 LAMP 扩增效果的影响 | 第37页 |
3.3.4 引物间比例的影响 | 第37-38页 |
3.3.5 Bst 酶的优化 | 第38-39页 |
3.4 LAMP 引物缺省试验 | 第39-40页 |
3.5 LAMP 产物的可视结果 | 第40页 |
3.6 LAMP 引物特异性的研究 | 第40-42页 |
3.7 PCR 法与 LAMP 法检测转基因水稻(棉花)检出限比较 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-47页 |
4.1 靶基因的选择 | 第44页 |
4.2 植物基因组 DNA 的提取及质量检测 | 第44-45页 |
4.3 LAMP 体系建立的影响因素 | 第45页 |
4.3.1 模板 DNA | 第45页 |
4.3.2 LAMP 检测的引物设计 | 第45页 |
4.4 影响 GMO 最低检测限的因素 | 第45-46页 |
4.5 污染因素及防治措施 | 第46页 |
4.6 LAMP 技术的优点与不足 | 第46-47页 |
5 结论 | 第47-48页 |
6 参考文献 | 第48-54页 |
在读期间发表的学术论文 | 第54-55页 |
作者简历 | 第55-56页 |
致谢 | 第56-57页 |