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环介导等温扩增技术快速检测转cry1A基因抗虫水稻、棉花的研究

摘要第4-6页
Abstract第6-7页
1 引言第10-27页
    1.1 全球转基因农作物现状第10-13页
        1.1.1 转基因植物的发展概况第10-11页
        1.1.2 我国转基因植物的发展概况第11-12页
        1.1.3 转基因食品的安全性第12-13页
        1.1.4 转基因食品的生物安全性管理第13页
    1.2 转 Bt 基因植物研究进展第13-15页
    1.3 国内外转基因食品检测技术研究现状第15-20页
        1.3.1 酶联免疫吸附分析第16页
        1.3.2 检测外源 DNA——定性检测第16-17页
        1.3.3 检测外源 DNA——定量检测第17-18页
        1.3.4 基因芯片检测第18-19页
        1.3.5 新检测技术第19页
        1.3.6 常用检测方法比较第19-20页
    1.4 环介导等温扩增技术第20-25页
        1.4.1 环介导等温扩增技术概述第20页
        1.4.2 环介导等温扩增方法的引物设计第20-21页
        1.4.3 环介导等温扩增法的基本原理第21-23页
        1.4.4 环介导等温扩增方法产物的检测方法第23-24页
        1.4.5 环介导等温扩增方法特点第24页
        1.4.6 环介导等温扩增方法的应用第24-25页
    1.5 本文的研究意义和研究内容第25-27页
        1.5.1 研究意义第25-26页
        1.5.2 主要研究内容第26-27页
2 材料与方法第27-34页
    2.1 实验材料与设备第27-29页
        2.1.1 实验材料第27页
        2.1.2 实验仪器第27页
        2.1.3 实验试剂第27-29页
    2.2 水稻、棉花基因组的提取方法第29页
    2.3 模板 DNA 的浓度测定及质量检测第29-30页
    2.4 引物设计、反应体系及主要操作第30-32页
        2.4.1 引物的设计第30-31页
        2.4.2 LAMP 和 PCR 反应体系第31-32页
        2.4.3 LAMP 和 PCR 主要操作程序第32页
    2.5 LAMP 反应条件优化第32-33页
        2.5.1 适宜镁离子浓度选择第32页
        2.5.2 dNTPs 浓度的优化第32页
        2.5.3 反应温度的优化第32-33页
        2.5.4 引物对 LAMP 反应的影响第33页
        2.5.5 Bst 酶的优化第33页
    2.6 转基因水稻(棉花)检出限试验第33页
    2.7 LAMP 引物特异性检测第33-34页
3 结果与分析第34-44页
    3.1 水稻和棉花基因组 DNA 提取结果第34页
    3.2 模板 DNA 质量控制结果分析第34-35页
    3.3 LAMP 反应条件的优化第35-39页
        3.3.1 镁离子浓度的优化第35-36页
        3.3.2 dNTPs 浓度的优化第36-37页
        3.3.3 反应温度对 LAMP 扩增效果的影响第37页
        3.3.4 引物间比例的影响第37-38页
        3.3.5 Bst 酶的优化第38-39页
    3.4 LAMP 引物缺省试验第39-40页
    3.5 LAMP 产物的可视结果第40页
    3.6 LAMP 引物特异性的研究第40-42页
    3.7 PCR 法与 LAMP 法检测转基因水稻(棉花)检出限比较第42-44页
4 讨论第44-47页
    4.1 靶基因的选择第44页
    4.2 植物基因组 DNA 的提取及质量检测第44-45页
    4.3 LAMP 体系建立的影响因素第45页
        4.3.1 模板 DNA第45页
        4.3.2 LAMP 检测的引物设计第45页
    4.4 影响 GMO 最低检测限的因素第45-46页
    4.5 污染因素及防治措施第46页
    4.6 LAMP 技术的优点与不足第46-47页
5 结论第47-48页
6 参考文献第48-54页
在读期间发表的学术论文第54-55页
作者简历第55-56页
致谢第56-57页

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