摘要 | 第6-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
缩略词表 | 第9-10页 |
第一章 SlEXPA3的克隆及其功能鉴定 | 第10-34页 |
1. 前言 | 第10-15页 |
1.1 课题的提出 | 第10-11页 |
1.2 扩张蛋白的基本结构 | 第11-12页 |
1.3 扩张蛋白基因家族的进化 | 第12-13页 |
1.4 扩张蛋白作用的生化机制 | 第13-14页 |
1.5 扩张蛋白的生物学功能 | 第14-15页 |
1.6 本课题研究 | 第15页 |
2. 材料与方法 | 第15-20页 |
2.1 试验材料 | 第15-16页 |
2.1.1 植物材料与种植 | 第15-16页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第16页 |
2.1.3 工具酶、试剂盒及试剂 | 第16页 |
2.1.4 引物设计及序列测定 | 第16页 |
2.2 试验方法 | 第16-19页 |
2.2.1 扩张蛋白基因的转录表达模式检测 | 第16页 |
2.2.2 基因超量载体构建 | 第16-18页 |
2.2.3 番茄的遗传转化 | 第18-19页 |
2.2.4 转基因植株的PCR检测 | 第19页 |
2.2.5 T_0植株目的基因表达量检测 | 第19页 |
2.3 SlEXPA3超量转基因株系苗期表型分析 | 第19-20页 |
2.4 SlEXPA3超量转基因株系的光合特性特性分析 | 第20页 |
2.4.1 叶片叶绿素和类胡萝卜素含量测定 | 第20页 |
2.4.2 SlEXPA3光合速率的测定 | 第20页 |
2.5 GA及ABA路径相关基因表达差异分析 | 第20页 |
3. 结果与分析 | 第20-30页 |
3.1 番茄扩张蛋白基因的挑选 | 第20-22页 |
3.2 扩张蛋白基因超量表达载体的构建 | 第22-23页 |
3.3 番茄扩张蛋白基因的遗传转化 | 第23-24页 |
3.4 转基因株系中SlEXPA3的相对表达量检测 | 第24页 |
3.5 SlEKPA3超量转基因株系的表型观察 | 第24-26页 |
3.6 SlEXPA3转基因植株的光合特性分析 | 第26-27页 |
3.7 ABA信号途径相关基因的差异表达分析 | 第27-29页 |
3.8 GA合成途径相关基因的表达差异分析 | 第29-30页 |
4. 讨论 | 第30-34页 |
4.1 扩张蛋白基因的筛选及遗传转化 | 第30页 |
4.2 扩张蛋白、植物激素与植株生长发育的关系 | 第30-32页 |
4.3 扩张蛋白与果实发育 | 第32页 |
4.5 扩张蛋白与逆境胁迫 | 第32-34页 |
第二章 番茄SlFRK2的克隆及功能初步分析 | 第34-52页 |
1. 前言 | 第34-37页 |
1.1 课题的提出 | 第34页 |
1.2 己糖激酶 | 第34-35页 |
1.3 糖酵解途径 | 第35页 |
1.4 果糖激酶 | 第35-36页 |
1.5 茄科植物中FRK的研究 | 第36-37页 |
2. 材料与方法 | 第37-38页 |
2.1 试验材料 | 第37页 |
2.1.1 菌株、载体和试剂 | 第37页 |
2.1.2 DNA抽提方法 | 第37页 |
2.1.3 RNA抽提及反转录 | 第37页 |
2.2 试验方法 | 第37-38页 |
2.2.1 qPCR分析 | 第37页 |
2.2.2 SlFRK2超量载体及干涉载体的构建 | 第37-38页 |
3. 结果与分析 | 第38-49页 |
3.1 番茄FRK、PFK和HXK家族进化树分析 | 第38-40页 |
3.2 番茄FRK、PFK和HXK基因家族的器官表达谱分析 | 第40-43页 |
3.3 番茄FRK、PFK和HXK基因家族对逆境的响应 | 第43-44页 |
3.4 番茄FRK、PFK和HXK基因家族对植物激素处理的响应 | 第44-46页 |
3.5 SlFRK2超量和干涉载体的构建 | 第46-47页 |
3.6 SlFRK2干涉转基因植株的阳性鉴定 | 第47-48页 |
3.7 SlFRK2干涉植株相对表达量的检测 | 第48页 |
3.8 SlFRK2干涉植株果实总可溶性固形物含量分析 | 第48-49页 |
4. 讨论 | 第49-52页 |
4.1 FRK、HXK和PFK基因家族器官表达的特异性 | 第49-50页 |
4.2 FRK的生物学功能 | 第50-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录 | 第57-60页 |
附录1: 小量法提取DNA | 第57页 |
附录2: Trizol一步法提取RNA | 第57页 |
附录3: 反转录 | 第57-58页 |
附录4: 研究中使用的qPCR引物 | 第58-60页 |
致谢 | 第60页 |