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番茄SlEXPA3和SlFRK2生物学功能的初步鉴定

摘要第6-7页
Abstract第7-8页
缩略词表第9-10页
第一章 SlEXPA3的克隆及其功能鉴定第10-34页
    1. 前言第10-15页
        1.1 课题的提出第10-11页
        1.2 扩张蛋白的基本结构第11-12页
        1.3 扩张蛋白基因家族的进化第12-13页
        1.4 扩张蛋白作用的生化机制第13-14页
        1.5 扩张蛋白的生物学功能第14-15页
        1.6 本课题研究第15页
    2. 材料与方法第15-20页
        2.1 试验材料第15-16页
            2.1.1 植物材料与种植第15-16页
            2.1.2 菌株和载体第16页
            2.1.3 工具酶、试剂盒及试剂第16页
            2.1.4 引物设计及序列测定第16页
        2.2 试验方法第16-19页
            2.2.1 扩张蛋白基因的转录表达模式检测第16页
            2.2.2 基因超量载体构建第16-18页
            2.2.3 番茄的遗传转化第18-19页
            2.2.4 转基因植株的PCR检测第19页
            2.2.5 T_0植株目的基因表达量检测第19页
        2.3 SlEXPA3超量转基因株系苗期表型分析第19-20页
        2.4 SlEXPA3超量转基因株系的光合特性特性分析第20页
            2.4.1 叶片叶绿素和类胡萝卜素含量测定第20页
            2.4.2 SlEXPA3光合速率的测定第20页
        2.5 GA及ABA路径相关基因表达差异分析第20页
    3. 结果与分析第20-30页
        3.1 番茄扩张蛋白基因的挑选第20-22页
        3.2 扩张蛋白基因超量表达载体的构建第22-23页
        3.3 番茄扩张蛋白基因的遗传转化第23-24页
        3.4 转基因株系中SlEXPA3的相对表达量检测第24页
        3.5 SlEKPA3超量转基因株系的表型观察第24-26页
        3.6 SlEXPA3转基因植株的光合特性分析第26-27页
        3.7 ABA信号途径相关基因的差异表达分析第27-29页
        3.8 GA合成途径相关基因的表达差异分析第29-30页
    4. 讨论第30-34页
        4.1 扩张蛋白基因的筛选及遗传转化第30页
        4.2 扩张蛋白、植物激素与植株生长发育的关系第30-32页
        4.3 扩张蛋白与果实发育第32页
        4.5 扩张蛋白与逆境胁迫第32-34页
第二章 番茄SlFRK2的克隆及功能初步分析第34-52页
    1. 前言第34-37页
        1.1 课题的提出第34页
        1.2 己糖激酶第34-35页
        1.3 糖酵解途径第35页
        1.4 果糖激酶第35-36页
        1.5 茄科植物中FRK的研究第36-37页
    2. 材料与方法第37-38页
        2.1 试验材料第37页
            2.1.1 菌株、载体和试剂第37页
            2.1.2 DNA抽提方法第37页
            2.1.3 RNA抽提及反转录第37页
        2.2 试验方法第37-38页
            2.2.1 qPCR分析第37页
            2.2.2 SlFRK2超量载体及干涉载体的构建第37-38页
    3. 结果与分析第38-49页
        3.1 番茄FRK、PFK和HXK家族进化树分析第38-40页
        3.2 番茄FRK、PFK和HXK基因家族的器官表达谱分析第40-43页
        3.3 番茄FRK、PFK和HXK基因家族对逆境的响应第43-44页
        3.4 番茄FRK、PFK和HXK基因家族对植物激素处理的响应第44-46页
        3.5 SlFRK2超量和干涉载体的构建第46-47页
        3.6 SlFRK2干涉转基因植株的阳性鉴定第47-48页
        3.7 SlFRK2干涉植株相对表达量的检测第48页
        3.8 SlFRK2干涉植株果实总可溶性固形物含量分析第48-49页
    4. 讨论第49-52页
        4.1 FRK、HXK和PFK基因家族器官表达的特异性第49-50页
        4.2 FRK的生物学功能第50-52页
参考文献第52-57页
附录第57-60页
    附录1: 小量法提取DNA第57页
    附录2: Trizol一步法提取RNA第57页
    附录3: 反转录第57-58页
    附录4: 研究中使用的qPCR引物第58-60页
致谢第60页

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