| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 1 绪论 | 第9-19页 |
| 1.1 WRKY转录因子的起源与进化 | 第9-10页 |
| 1.2 WRKY转录因子的结构特点及分类 | 第10-11页 |
| 1.3 WRKY转录因子的生物学功能 | 第11-14页 |
| 1.4 WRKY转录因子的作用机制 | 第14-17页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第17-18页 |
| 1.6 技术路线 | 第18-19页 |
| 2 实验器材 | 第19-24页 |
| 2.1 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2 实验材料及来源 | 第20页 |
| 2.3 实验试剂 | 第20-21页 |
| 2.4 培养基 | 第21页 |
| 2.5 溶液及缓冲液 | 第21-24页 |
| 3 实验方法 | 第24-47页 |
| 3.1 小麦RNA提取以及cDNA制备 | 第24-27页 |
| 3.2 TaWRKY9基因的克隆及鉴定 | 第27-30页 |
| 3.3 构建原核表达载体 | 第30-37页 |
| 3.4 重组TaWRKY9蛋白的诱导表达 | 第37-40页 |
| 3.5 重组TaWRKY9蛋白的提取 | 第40-41页 |
| 3.6 重组TaWRKY9蛋白的纯化 | 第41-42页 |
| 3.7 重组TaWRKY9蛋白的浓度测定 | 第42-43页 |
| 3.8 TaWRKY9蛋白的多克隆抗体制备 | 第43-44页 |
| 3.9 转基因烟草叶片总蛋白的提取 | 第44-45页 |
| 3.10 Western-blot检测 | 第45-47页 |
| 4 实验结果 | 第47-63页 |
| 4.1 小麦RNA提取及cDNA制备 | 第47-48页 |
| 4.2 基因的克隆 | 第48页 |
| 4.3 原核表达载体构建 | 第48-51页 |
| 4.4 重组TaWRKY9蛋白的原核表达 | 第51-56页 |
| 4.5 重组TaWRKY9蛋白的提取 | 第56-58页 |
| 4.6 重组TaWRKY9蛋白的纯化 | 第58-59页 |
| 4.7 重组TaWRKY9蛋白浓度的测定 | 第59-60页 |
| 4.8 转基因烟草叶片总蛋白的提取 | 第60-61页 |
| 4.9 Western-blot检测 | 第61-63页 |
| 5 讨论 | 第63-67页 |
| 5.1 原核表达与真核表达 | 第63页 |
| 5.2 目的蛋白的纯化：胶回收与镍柱亲和层析 | 第63-65页 |
| 5.3 Western-blot检测的结果：目的蛋白分子量与软件预测的不一致 | 第65-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-72页 |
| 附录1 pET-32a(+)质粒图谱 | 第72-74页 |
| 附录2 攻读学位期间发表的论文情况 | 第74页 |