| 摘要 | 第7-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第12-31页 |
| 1.1 腈水解酶 | 第12页 |
| 1.2 腈水解酶机理 | 第12-13页 |
| 1.3 腈水解在有机合成中的作用 | 第13-15页 |
| 1.3.1 脂肪腈或芳基脂肪腈的生物转化 | 第13页 |
| 1.3.2 芳腈的生物转化 | 第13-14页 |
| 1.3.3 脂环腈和杂环腈的生物转化 | 第14-15页 |
| 1.3.4 水-有机溶剂体系中腈的酶促水解 | 第15页 |
| 1.4 邻氯扁桃酸 | 第15-24页 |
| 1.4.1 不对称合成法 | 第16-20页 |
| 1.4.1.1 手性醇氰酶-化学法 | 第16-18页 |
| 1.4.1.2 腈水解酶法 | 第18-19页 |
| 1.4.1.3 不对称还原法 | 第19页 |
| 1.4.1.4 化学合成法 | 第19-20页 |
| 1.4.2 光学异构体拆分法 | 第20-24页 |
| 1.4.2.1 外消旋邻氯扁桃酸合成 | 第20-21页 |
| 1.4.2.2 外消旋邻氯扁桃酸拆分 | 第21-24页 |
| 1.4.2.2.1 非对映体盐法拆分 | 第21页 |
| 1.4.2.2.2 酶法拆分 | 第21-23页 |
| 1.4.2.2.3 色谱法拆分 | 第23页 |
| 1.4.2.2.4 分子印迹法拆分 | 第23-24页 |
| 1.4.2.2.5 毛细管电泳法拆分 | 第24页 |
| 1.5 本文研究内容 | 第24-26页 |
| 参考文献 | 第26-31页 |
| 第二章 分析方法的建立与菌种筛选 | 第31-42页 |
| 2.1 引言 | 第31页 |
| 2.2 分析方法建立与菌种的筛选 | 第31-41页 |
| 2.2.1 材料与方法 | 第31-33页 |
| 2.2.1.1 化学试剂与主要仪器 | 第32页 |
| 2.2.1.2 培养基 | 第32页 |
| 2.2.1.3 酶活定义及浓度检测方法 | 第32-33页 |
| 2.2.1.4 手性检测方法 | 第33页 |
| 2.2.1.5 分离度 | 第33页 |
| 2.2.1.6 菌种筛选 | 第33页 |
| 2.2.2 结果与讨论 | 第33-41页 |
| 2.2.2.1 扁桃酸衍生物浓度检测 | 第34-36页 |
| 2.2.2.2 手性分析方法的建立 | 第36-40页 |
| 2.2.2.3 菌种的筛选 | 第40-41页 |
| 2.3 小结 | 第41页 |
| 参考文献 | 第41-42页 |
| 第三章 产碱杆菌ALCALIGENES FAECALIS催化邻氯扁桃腈为底物的产酶条件优化 | 第42-54页 |
| 3.1 引言 | 第42页 |
| 3.2 培养基组分及培养条件优化 | 第42-52页 |
| 3.2.1 材料与方法 | 第42-44页 |
| 3.2.1.1 菌种 | 第43页 |
| 3.2.1.2 培养基 | 第43页 |
| 3.2.1.3 细胞培养条件 | 第43页 |
| 3.2.1.4 生物量测定方法 | 第43页 |
| 3.2.1.5 全细胞转化条件 | 第43-44页 |
| 3.2.1.6 分析方法及酶活定义 | 第44页 |
| 3.2.2 结果与讨论 | 第44-52页 |
| 3.2.2.1 诱导剂种类对菌体生长以及产酶的影响 | 第44-45页 |
| 3.2.2.2 碳源种类和浓度对菌体生长及产酶的影响 | 第45-47页 |
| 3.2.2.3 氮源种类及浓度对菌体生长和产酶的影响 | 第47-49页 |
| 3.2.2.4 装液量对菌体生长以及产酶的影响 | 第49-50页 |
| 3.2.2.5 接种量对菌体生长以及产酶的影响 | 第50-51页 |
| 3.2.2.6 菌体生长及产酶曲线 | 第51-52页 |
| 3.3 小结 | 第52页 |
| 参考文献 | 第52-54页 |
| 第四章 转化条件优化 | 第54-89页 |
| 4.1 引言 | 第54-55页 |
| 4.2 转化条件的影响 | 第55-86页 |
| 4.2.1 材料与方法 | 第55-59页 |
| 4.2.1.1 菌种 | 第55页 |
| 4.2.1.2 培养基 | 第55-56页 |
| 4.2.1.3 细胞培养条件 | 第56页 |
| 4.2.1.4 不同pH转化条件 | 第56页 |
| 4.2.1.5 不同缓冲液的选择 | 第56页 |
| 4.2.1.6 温度对反应的影响 | 第56-57页 |
| 4.2.1.7 金属离子对催化反应的影响 | 第57页 |
| 4.2.1.8 细胞浓度、底物浓度对催化反应的影响 | 第57页 |
| 4.2.1.9 反应动力学 | 第57页 |
| 4.2.1.10 两相催化中不同有机溶剂种类对转化的影响 | 第57-58页 |
| 4.2.1.11 两相催化体系配比、pH、温度和进程曲线 | 第58页 |
| 4.2.1.12 不同有机溶剂对间氯扁桃腈和对氯扁桃腈底物的影响 | 第58页 |
| 4.2.1.13 底物特异性研究 | 第58页 |
| 4.2.1.14 1L反应器中转化条件 | 第58-59页 |
| 4.2.1.15 分析方法及酶活定义 | 第59页 |
| 4.2.2 结果与讨论 | 第59-86页 |
| 4.2.2.1 静息细胞催化 | 第59-72页 |
| 4.2.2.1.1 pH对转化的影响 | 第59-61页 |
| 4.2.2.1.2 不同缓冲液的选择 | 第61-62页 |
| 4.2.2.1.3 温度对反应的影响 | 第62-64页 |
| 4.2.2.1.4 金属离子对催化反应的影响 | 第64页 |
| 4.2.2.1.5 细胞浓度对反应的影响 | 第64-67页 |
| 4.2.2.1.6 底物浓度对反应的影响 | 第67-70页 |
| 4.2.2.1.7 反应动力学 | 第70-72页 |
| 4.2.2.2 两相体系的影响 | 第72-80页 |
| 4.2.2.2.1 两相催化中不同有机溶剂种类对转化的影响 | 第72-74页 |
| 4.2.2.2.2 不同配比的两相体系对转化的影响 | 第74-76页 |
| 4.2.2.2.3 不同pH值对两相体系转化的影响 | 第76-77页 |
| 4.2.2.2.4 不同温度对两相体系转化的影响 | 第77-78页 |
| 4.2.2.2.5 两相体系进程曲线 | 第78-79页 |
| 4.2.2.2.6 不同有机溶剂对间氯扁桃腈和对氯扁桃腈底物的影响 | 第79-80页 |
| 4.2.2.3 底物特异性的研究 | 第80-84页 |
| 4.2.2.3.1 不同取代基对于酶活性及选择性的影响 | 第80-83页 |
| 4.2.2.3.2 不同底物的动力学参数 | 第83-84页 |
| 4.2.2.4 R-邻氯扁桃酸、R-间氯扁桃酸、R-对氯扁桃酸反应器中产物的合成与提取 | 第84-86页 |
| 4.2.2.4.1 1L反应器中双菌耦联的催化 | 第84-86页 |
| 4.2.2.4.2 产物的分离提取 | 第86页 |
| 4.3 小结 | 第86-87页 |
| 参考文献 | 第87-89页 |
| 第五章 结论与展望 | 第89-92页 |
| 5.1 结论 | 第89-90页 |
| 5.2 展望 | 第90-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
| 攻读硕士学位期间发表论文及专利情况 | 第93-94页 |
| 附录 | 第94-95页 |