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立体选择性腈水解酶催化合成光学纯扁桃酸衍生物

摘要第7-9页
ABSTRACT第9-11页
第一章 绪论第12-31页
    1.1 腈水解酶第12页
    1.2 腈水解酶机理第12-13页
    1.3 腈水解在有机合成中的作用第13-15页
        1.3.1 脂肪腈或芳基脂肪腈的生物转化第13页
        1.3.2 芳腈的生物转化第13-14页
        1.3.3 脂环腈和杂环腈的生物转化第14-15页
        1.3.4 水-有机溶剂体系中腈的酶促水解第15页
    1.4 邻氯扁桃酸第15-24页
        1.4.1 不对称合成法第16-20页
            1.4.1.1 手性醇氰酶-化学法第16-18页
            1.4.1.2 腈水解酶法第18-19页
            1.4.1.3 不对称还原法第19页
            1.4.1.4 化学合成法第19-20页
        1.4.2 光学异构体拆分法第20-24页
            1.4.2.1 外消旋邻氯扁桃酸合成第20-21页
            1.4.2.2 外消旋邻氯扁桃酸拆分第21-24页
                1.4.2.2.1 非对映体盐法拆分第21页
                1.4.2.2.2 酶法拆分第21-23页
                1.4.2.2.3 色谱法拆分第23页
                1.4.2.2.4 分子印迹法拆分第23-24页
                1.4.2.2.5 毛细管电泳法拆分第24页
    1.5 本文研究内容第24-26页
    参考文献第26-31页
第二章 分析方法的建立与菌种筛选第31-42页
    2.1 引言第31页
    2.2 分析方法建立与菌种的筛选第31-41页
        2.2.1 材料与方法第31-33页
            2.2.1.1 化学试剂与主要仪器第32页
            2.2.1.2 培养基第32页
            2.2.1.3 酶活定义及浓度检测方法第32-33页
            2.2.1.4 手性检测方法第33页
            2.2.1.5 分离度第33页
            2.2.1.6 菌种筛选第33页
        2.2.2 结果与讨论第33-41页
            2.2.2.1 扁桃酸衍生物浓度检测第34-36页
            2.2.2.2 手性分析方法的建立第36-40页
            2.2.2.3 菌种的筛选第40-41页
    2.3 小结第41页
    参考文献第41-42页
第三章 产碱杆菌ALCALIGENES FAECALIS催化邻氯扁桃腈为底物的产酶条件优化第42-54页
    3.1 引言第42页
    3.2 培养基组分及培养条件优化第42-52页
        3.2.1 材料与方法第42-44页
            3.2.1.1 菌种第43页
            3.2.1.2 培养基第43页
            3.2.1.3 细胞培养条件第43页
            3.2.1.4 生物量测定方法第43页
            3.2.1.5 全细胞转化条件第43-44页
            3.2.1.6 分析方法及酶活定义第44页
        3.2.2 结果与讨论第44-52页
            3.2.2.1 诱导剂种类对菌体生长以及产酶的影响第44-45页
            3.2.2.2 碳源种类和浓度对菌体生长及产酶的影响第45-47页
            3.2.2.3 氮源种类及浓度对菌体生长和产酶的影响第47-49页
            3.2.2.4 装液量对菌体生长以及产酶的影响第49-50页
            3.2.2.5 接种量对菌体生长以及产酶的影响第50-51页
            3.2.2.6 菌体生长及产酶曲线第51-52页
    3.3 小结第52页
    参考文献第52-54页
第四章 转化条件优化第54-89页
    4.1 引言第54-55页
    4.2 转化条件的影响第55-86页
        4.2.1 材料与方法第55-59页
            4.2.1.1 菌种第55页
            4.2.1.2 培养基第55-56页
            4.2.1.3 细胞培养条件第56页
            4.2.1.4 不同pH转化条件第56页
            4.2.1.5 不同缓冲液的选择第56页
            4.2.1.6 温度对反应的影响第56-57页
            4.2.1.7 金属离子对催化反应的影响第57页
            4.2.1.8 细胞浓度、底物浓度对催化反应的影响第57页
            4.2.1.9 反应动力学第57页
            4.2.1.10 两相催化中不同有机溶剂种类对转化的影响第57-58页
            4.2.1.11 两相催化体系配比、pH、温度和进程曲线第58页
            4.2.1.12 不同有机溶剂对间氯扁桃腈和对氯扁桃腈底物的影响第58页
            4.2.1.13 底物特异性研究第58页
            4.2.1.14 1L反应器中转化条件第58-59页
            4.2.1.15 分析方法及酶活定义第59页
        4.2.2 结果与讨论第59-86页
            4.2.2.1 静息细胞催化第59-72页
                4.2.2.1.1 pH对转化的影响第59-61页
                4.2.2.1.2 不同缓冲液的选择第61-62页
                4.2.2.1.3 温度对反应的影响第62-64页
                4.2.2.1.4 金属离子对催化反应的影响第64页
                4.2.2.1.5 细胞浓度对反应的影响第64-67页
                4.2.2.1.6 底物浓度对反应的影响第67-70页
                4.2.2.1.7 反应动力学第70-72页
            4.2.2.2 两相体系的影响第72-80页
                4.2.2.2.1 两相催化中不同有机溶剂种类对转化的影响第72-74页
                4.2.2.2.2 不同配比的两相体系对转化的影响第74-76页
                4.2.2.2.3 不同pH值对两相体系转化的影响第76-77页
                4.2.2.2.4 不同温度对两相体系转化的影响第77-78页
                4.2.2.2.5 两相体系进程曲线第78-79页
                4.2.2.2.6 不同有机溶剂对间氯扁桃腈和对氯扁桃腈底物的影响第79-80页
            4.2.2.3 底物特异性的研究第80-84页
                4.2.2.3.1 不同取代基对于酶活性及选择性的影响第80-83页
                4.2.2.3.2 不同底物的动力学参数第83-84页
            4.2.2.4 R-邻氯扁桃酸、R-间氯扁桃酸、R-对氯扁桃酸反应器中产物的合成与提取第84-86页
                4.2.2.4.1 1L反应器中双菌耦联的催化第84-86页
                4.2.2.4.2 产物的分离提取第86页
    4.3 小结第86-87页
    参考文献第87-89页
第五章 结论与展望第89-92页
    5.1 结论第89-90页
    5.2 展望第90-92页
致谢第92-93页
攻读硕士学位期间发表论文及专利情况第93-94页
附录第94-95页

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