| 摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 1 引言 | 第12-19页 |
| 1.1 研究的目的和意义 | 第12页 |
| 1.2 文献综述 | 第12-17页 |
| 1.2.1 水稻耐冷机理研究进展 | 第12-14页 |
| 1.2.2 水稻耐冷基因工程现状 | 第14-15页 |
| 1.2.3 植物抗逆mi RNA的研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.4 miR156的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.3 本研究的课题来源及研究内容 | 第17-19页 |
| 1.3.1 本研究的课题来源 | 第17页 |
| 1.3.2 本课题的研究内容 | 第17-19页 |
| 2 材料与方法 | 第19-31页 |
| 2.1 试验材料 | 第19-22页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 数据库及生物软件 | 第19页 |
| 2.1.3 菌株及质粒 | 第19页 |
| 2.1.4 试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.5 培养基及营养液 | 第20-22页 |
| 2.1.6 仪器及耗材 | 第22页 |
| 2.2 试验方法 | 第22-31页 |
| 2.2.1 冷胁迫应答mi RNA在水稻中的超量表达 | 第22-29页 |
| 2.2.2 mi156k超量表达植株的冷胁迫表型分析 | 第29页 |
| 2.2.3 水稻miR156k耐冷分子机制研究 | 第29-31页 |
| 3 结果与分析 | 第31-44页 |
| 3.1 水稻miR156k的过量表达 | 第31-35页 |
| 3.1.1 冷胁迫应答基因pre-miR156k植物表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 3.1.2 水稻pre-miR156k转化水稻及抗性植株的获得 | 第32-33页 |
| 3.1.3 抗性植株的分子生物学检测 | 第33-35页 |
| 3.2 水稻miR156k耐冷功能分析 | 第35-37页 |
| 3.2.1 水稻miR156k转基因植株萌发期耐冷功能分析 | 第35页 |
| 3.2.2 水稻miR156k转基因植株幼苗期耐冷功能分析 | 第35-37页 |
| 3.3 水稻miR156k耐冷分子机制研究 | 第37-44页 |
| 3.3.1 转miR156k基因水稻生理指标测定 | 第37-39页 |
| 3.3.2 靶基因在冷胁迫处理下的表达分析 | 第39-41页 |
| 3.3.3 水稻miR156k调控低温胁迫Marker基因表达分析 | 第41-44页 |
| 4 讨论 | 第44-46页 |
| 4.1 目标miRNA的选择 | 第44页 |
| 4.2 miR156k基因功能分析方法 | 第44-45页 |
| 4.3 miR156k基因在冷胁迫应答反应过程中作用机制的探讨 | 第45页 |
| 4.4 研究展望 | 第45-46页 |
| 5 结论 | 第46-47页 |
| 5.1 超量表达miR156基因水稻的获得 | 第46页 |
| 5.2 冷敏感转miR156基因水稻的获得 | 第46页 |
| 5.3 转miR156基因水稻冷胁迫应答的分子机制 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第54页 |
