| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-30页 |
| 1.1 甾类化合物概述 | 第15-16页 |
| 1.2 甾类化合物微生物转化概述 | 第16-19页 |
| 1.2.1 甾类化合物微生物转化的特点 | 第16页 |
| 1.2.2 甾类化合物微生物转化反应类型 | 第16-17页 |
| 1.2.3 甾类药物中间体微生物转化研究进展 | 第17-19页 |
| 1.3 有机介质中甾体化合物的微生物转化 | 第19-22页 |
| 1.3.1 有机溶剂/水两相体系中的生物转化 | 第19-20页 |
| 1.3.1.1 有机溶剂的选择 | 第19-20页 |
| 1.3.1.2 水相组成 | 第20页 |
| 1.3.1.3 两相体积比对生物转化的影响 | 第20页 |
| 1.3.2 微乳体系中的生物转化技术 | 第20-22页 |
| 1.3.2.1 微乳简介 | 第20-21页 |
| 1.3.2.2 微乳的制备 | 第21-22页 |
| 1.3.2.3 微乳体系中生物反应的特点及应用 | 第22页 |
| 1.4 离子液体体系中的生物催化反应 | 第22-28页 |
| 1.4.1 离子液体的生物相容性 | 第23-25页 |
| 1.4.1.1 离子液体对微生物细胞的毒性 | 第23页 |
| 1.4.1.2 离子液体中酶的特性 | 第23-25页 |
| 1.4.2 含离子液体介质中的生物催化反应 | 第25-28页 |
| 1.4.2.1 离子液体/超临界CO_2双相体系中的生物催化 | 第25-26页 |
| 1.4.2.2 疏水性离子液体/水两相体系中的生物催化 | 第26-27页 |
| 1.4.2.3 含亲水性离子液体体系中的生物催化 | 第27-28页 |
| 1.5 本论文的研究意义和主要研究内容 | 第28-30页 |
| 1.5.1 本论文的研究意义 | 第28-29页 |
| 1.5.2 本论文的研究内容 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第30-32页 |
| 2.1.1 试剂 | 第30页 |
| 2.1.2 菌种 | 第30页 |
| 2.1.3 培养基 | 第30-31页 |
| 2.1.3.1 斜面培养基 | 第30-31页 |
| 2.1.3.2 种子培养基 | 第31页 |
| 2.1.3.3 发酵培养基 | 第31页 |
| 2.1.4 菌种培养及转化条件 | 第31页 |
| 2.1.4.1 斜面培养 | 第31页 |
| 2.1.4.2 种子培养 | 第31页 |
| 2.1.4.3 发酵培养 | 第31页 |
| 2.1.4.4 底物的微生物脱氢反应过程 | 第31页 |
| 2.1.5 主要实验仪器及设备 | 第31-32页 |
| 2.2 有关参数分析方法 | 第32-37页 |
| 2.2.1 生物量的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.1.1 比浊法 | 第32页 |
| 2.2.1.2 细胞干重的测定 | 第32-33页 |
| 2.2.1.3 发酵液浊度与细胞干重的关系 | 第33页 |
| 2.2.2 甾体脱氢酶活力测定 | 第33-34页 |
| 2.2.2.1 2,3,5-氯化三苯基四氮唑(简称TTC)显色法 | 第33页 |
| 2.2.2.2 底物转化测定法 | 第33-34页 |
| 2.2.3 底物脱氢转化率测定 | 第34-35页 |
| 2.2.3.1 硅胶薄层层析法(TLC) | 第34页 |
| 2.2.3.2 高效液相色谱法(HPLC) | 第34-35页 |
| 2.2.4 底物在95%乙醇中溶解度的测定 | 第35-37页 |
| 2.2.4.1 底物的特征吸收波长 | 第35-36页 |
| 2.2.4.2 溶解度标准曲线的测定 | 第36-37页 |
| 第三章 微乳体系中简单节杆菌转化11β-羟基甲羟孕酮脱氢工艺研究 | 第37-49页 |
| 3.1 引言 | 第37-38页 |
| 3.2 材料与方法 | 第38-39页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.2.1.1 菌种 | 第38页 |
| 3.2.1.2 培养基 | 第38页 |
| 3.2.1.3 主要实验试剂 | 第38页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第38-39页 |
| 3.2.2.1 培养方法 | 第38页 |
| 3.2.2.2 底物的投料方式 | 第38页 |
| 3.2.2.3 微乳体系的构建 | 第38-39页 |
| 3.2.2.4 底物和产物的分析测定 | 第39页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第39-48页 |
| 3.3.1 摇瓶转化条件的研究 | 第39-41页 |
| 3.3.1.1 培养基初始pH对转化的影响 | 第39页 |
| 3.3.1.2 投料时间对转化的影响 | 第39-40页 |
| 3.3.1.3 接种量对转化的影响 | 第40页 |
| 3.3.1.4 诱导物加量对转化的影响 | 第40-41页 |
| 3.3.2 微乳体系组成研究 | 第41-46页 |
| 3.3.2.1 固体粉末直接投料对脱氢转化率的影响 | 第41页 |
| 3.3.2.2 底物在增溶的有机溶剂中的溶解度 | 第41-42页 |
| 3.3.2.3 用于底物增溶的有机溶剂的选择 | 第42-43页 |
| 3.3.2.4 乙醇加量对转化的影响 | 第43页 |
| 3.3.2.5 表面活性剂的选择 | 第43-44页 |
| 3.3.2.6 吐温-80加量对转化的影响 | 第44-45页 |
| 3.3.2.7 不同种类的油对体系中底物脱氢转化的影响 | 第45-46页 |
| 3.3.2.8 豆油加量对转化的影响 | 第46页 |
| 3.3.4 温度对微乳体系中11β-羟基甲羟孕酮脱氢转化的影响 | 第46-47页 |
| 3.3.5 投料浓度对微乳体系中底物脱氢转化的影响 | 第47-48页 |
| 3.4 本章小结 | 第48-49页 |
| 第四章 两相体系中简单节杆菌催化11β-羟基甲羟孕酮脱氢工艺研究 | 第49-62页 |
| 4.1 引言 | 第49-50页 |
| 4.2 材料与方法 | 第50-52页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第50页 |
| 4.2.1.1 菌种 | 第50页 |
| 4.2.1.2 培养基 | 第50页 |
| 4.2.1.3 主要实验试剂 | 第50页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第50-52页 |
| 4.2.2.1 培养方法 | 第50页 |
| 4.2.2.2 底物在不同有机溶剂中溶解度的测定 | 第50-51页 |
| 4.2.2.3 菌悬液的制备 | 第51页 |
| 4.2.2.4 离子液体对简单节杆菌生长活性的影响 | 第51页 |
| 4.2.2.5 离子液体对菌体脱氢酶活力的影响 | 第51页 |
| 4.2.2.6 离子液体为共溶剂的两相体系中底物脱氢反应过程 | 第51-52页 |
| 4.2.2.7 底物和产物的分析测定 | 第52页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第52-61页 |
| 4.3.1 两相体系的构建 | 第52-54页 |
| 4.3.1.1 有机相的选择 | 第52页 |
| 4.3.1.2 水相的选择 | 第52-53页 |
| 4.3.1.3 两相体积比对转化的影响 | 第53-54页 |
| 4.3.1.4 缓冲液的pH值对转化的影响 | 第54页 |
| 4.3.2 亲水性离子液体的加入对脱氢反应的影响 | 第54-59页 |
| 4.3.2.1 亲水性离子液体对简单节杆菌生长活性的影响 | 第54-55页 |
| 4.3.2.2 亲水性离子液体对菌体脱氢酶活力的影响 | 第55-56页 |
| 4.3.2.3 亲水性离子液体对底物产物在两相体系中分配系数的影响 | 第56-57页 |
| 4.3.2.4 [Bmim](L)Lac的添加量对转化的影响 | 第57页 |
| 4.3.2.5 菌体量对转化的影响 | 第57-58页 |
| 4.3.2.6 底物浓度对含离子液体的两相体系中生物脱氢的影响 | 第58页 |
| 4.3.2.7 含与不含2%[Bmim](L)Lac的水/甲苯两相体系中生物脱氢 | 第58-59页 |
| 4.3.3 疏水性离子液体对脱氢反应的影响 | 第59-61页 |
| 4.3.3.1 疏水性离子液体对简单节杆菌生长活性的影响 | 第59-60页 |
| 4.3.3.2 疏水性离子液体对水/有机溶剂两相体系脱氢反应的影响 | 第60-61页 |
| 4.3.3.3 疏水性离子液体/水两相体系中简单节杆菌的脱氢反应 | 第61页 |
| 4.4 本章小结 | 第61-62页 |
| 第五章 含离子液体体系中简单节杆菌催化11β-羟基甲羟孕酮脱氢反应优化 | 第62-73页 |
| 5.1 引言 | 第62-63页 |
| 5.2 材料与方法 | 第63-65页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第63页 |
| 5.2.1.1 菌种 | 第63页 |
| 5.2.1.2 培养基 | 第63页 |
| 5.2.1.3 主要实验试剂 | 第63页 |
| 5.2.2 实验方法 | 第63-65页 |
| 5.2.2.1 培养方法 | 第63页 |
| 5.2.2.2 细胞固定化 | 第63-65页 |
| 5.2.2.3 固定化细胞的增殖活化 | 第65页 |
| 5.2.2.4 底物和产物的分析测定 | 第65页 |
| 5.3 结果与讨论 | 第65-72页 |
| 5.3.1 水相中乳酸钙的加入对菌体脱氢转化的影响 | 第65-68页 |
| 5.3.1.1 不含离子液体的水相中乳酸钙的加入对反应的影响 | 第65-66页 |
| 5.3.1.2 含离子液体的水相中乳酸钙的加入对反应的影响 | 第66-67页 |
| 5.3.1.3 含[Bmim]BF_4的水相中的乳酸钙的加量对反应的影响 | 第67页 |
| 5.3.1.4 含[Emim]BF_4的水相中的乳酸钙的加量对反应的影响 | 第67-68页 |
| 5.3.1.5 乳酸钙的加入对体系中底物和产物分配系数的影响 | 第68页 |
| 5.3.2 含乳酸钙和[Bmim]BF_4的两相体系中固定化细胞对转化的影响 | 第68-72页 |
| 5.3.2.1 不同细胞固定化制备方法及重复利用情况的比较 | 第68-70页 |
| 5.3.2.2 固定化细胞添加量对转化的影响 | 第70页 |
| 5.3.2.3 底物浓度对固定化细胞转化的影响 | 第70-71页 |
| 5.3.2.4 固定化细胞催化底物脱氢转化的时间曲线 | 第71-72页 |
| 5.4 本章小结 | 第72-73页 |
| 第六章 结论和建议 | 第73-75页 |
| 6.1 结论 | 第73-74页 |
| 6.2 建议 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-84页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第84-85页 |
| 致谢 | 第85页 |
