摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-15页 |
文献综述 | 第15-51页 |
第一章 鸭Ⅰ型肝炎病毒研究进展 | 第15-27页 |
·病原研究 | 第15-17页 |
·病原形态学特性 | 第15-16页 |
·病毒的培养增殖 | 第16页 |
·病毒的纯化 | 第16-17页 |
·DHV-Ⅰ基因组结构与功能 | 第17-20页 |
·DHV-Ⅰ基因组非编码区 | 第18-19页 |
·DHV-Ⅰ的编码区 | 第19-20页 |
·致病机理 | 第20-22页 |
·DHV-Ⅰ病原检测 | 第22-24页 |
·血清学 | 第22-23页 |
·免疫学 | 第23-24页 |
·分子生物学方法 | 第24页 |
·防控方法 | 第24-25页 |
·研究方向与前景 | 第25-27页 |
第二章 RNA 病毒的反向遗传操作研究研究进展 | 第27-51页 |
·感染性CDNA 克隆的构建基础 | 第27-32页 |
·病毒基因组全长cDNA 分子的扩增 | 第28-31页 |
·载体的选择 | 第31-32页 |
·RNA 聚合酶系统的选择 | 第32页 |
·全长cDNA 分子的装配过程 | 第32页 |
·感染性转录物的产生 | 第32-34页 |
·影响感染性的因素 | 第34-35页 |
·转录物异质性 | 第34页 |
·基因突变 | 第34页 |
·5′端和3′端冗余序列 | 第34页 |
·帽子结构 | 第34-35页 |
·VPg | 第35页 |
·感染性分子克隆的应用 | 第35-43页 |
·病毒基因组结构与功能的研究 | 第35-37页 |
·分子致病机理的研究 | 第37-39页 |
·病毒与宿主互作的研究 | 第39-40页 |
·新型疫苗的研究 | 第40-42页 |
·病毒载体的研究 | 第42-43页 |
·基因治疗 | 第43页 |
·RNA 病毒感染性克隆构建的国内外研究进展 | 第43-49页 |
·正链RNA 病毒感染性克隆研究进展 | 第44-46页 |
·负链RNA 病毒感染性克隆研究进展 | 第46-47页 |
·双链RNA 病毒感染性克隆研究进展 | 第47-48页 |
·逆转录病毒感染性克隆研究进展 | 第48-49页 |
·研究方向与前景 | 第49-51页 |
试验研究 | 第51-101页 |
第三章 鸭Ⅰ型肝炎病毒ZJ-V/2006 在BHK-21 细胞上的分离与鉴定 | 第51-59页 |
·材料与方法 | 第51-55页 |
·材料 | 第51-52页 |
·方法 | 第52-55页 |
·结果 | 第55-58页 |
·病毒分离 | 第55-56页 |
·电镜观察 | 第56页 |
·间接免疫荧光试验 | 第56-57页 |
·RT-PCR 鉴定 | 第57页 |
·序列分析 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
第四章 鸭Ⅰ型肝炎病毒(ZJ-V/2006)基因组全长CDNA 克隆的构建与分析 | 第59-72页 |
·材料与方法 | 第59-68页 |
·材料 | 第59-60页 |
·方法 | 第60-68页 |
·结果与分析 | 第68-70页 |
·DHV-ⅠZJ-V/2006 株全长cDNA 序列各片段的RT-PCR 扩增 | 第68页 |
·DHV-ⅠZJ-V/2006 株全长cDNA 的构建与鉴定 | 第68-69页 |
·序列分析 | 第69-70页 |
·讨论 | 第70-72页 |
第五章 DHV-Ⅰ感染性克隆病毒的体外拯救与鉴定 | 第72-83页 |
·方法与材料 | 第72-78页 |
·材料 | 第72-73页 |
·方法 | 第73-75页 |
·拯救病毒的鉴定 | 第75-78页 |
·结果 | 第78-81页 |
·体外转录物RNA 完整性检测结果 | 第78页 |
·拯救病毒的鉴定 | 第78-81页 |
·讨论 | 第81-83页 |
第六章 DHV-Ⅰ感染性克隆衍生病毒在BHK-21 细胞中的生物学特性研究 | 第83-92页 |
·材料 | 第83-84页 |
·质粒、细胞株及毒株 | 第83页 |
·主要试剂 | 第83页 |
·主要仪器与设备 | 第83-84页 |
·方法 | 第84-87页 |
·BHK-21 细胞的培养与冻存 | 第84页 |
·DHV-Ⅰ拯救病毒的传代 | 第84-85页 |
·DHV-Ⅰ拯救病毒与母本病毒TCID50 的测定 | 第85页 |
·DHV-Ⅰ拯救病毒动力学特性 | 第85-87页 |
·拯救病毒与母本病毒毒力的测定 | 第87页 |
·结果 | 第87-91页 |
·DHV-Ⅰ亲本毒和拯救病毒的动力学特性 | 第87-88页 |
·实时荧光定量RT-PCR 结果 | 第88-90页 |
·拯救病毒的攻毒试验结果 | 第90-91页 |
·讨论 | 第91-92页 |
第七章 鸭Ⅰ型肝炎病毒SYBR GREENⅠ实时荧光PCR 鉴别方法 | 第92-101页 |
·材料与方法 | 第92-95页 |
·毒株与细胞 | 第92页 |
·试剂 | 第92页 |
·引物的设计与合成 | 第92-93页 |
·标准品质粒的构建与鉴定 | 第93页 |
·病毒TCID50 的测定 | 第93-94页 |
·病毒RNA 的提取及反转录 | 第94页 |
·SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR 反应体系的建立及优化 | 第94页 |
·标准曲线的制作 | 第94-95页 |
·特异性试验 | 第95页 |
·重复性试验 | 第95页 |
·敏感性试验 | 第95页 |
·临床样品的检测 | 第95页 |
·结果 | 第95-99页 |
·荧光定量PCR 引物的特异性 | 第95-96页 |
·SYBR Green ⅠPCR 的优化 | 第96页 |
·标准曲线的绘制 | 第96-97页 |
·SYBR Green ⅠPCR 的敏感性试验 | 第97-98页 |
·SYBR Green ⅠPCR 的特异性试验 | 第98-99页 |
·SYBR GreenⅠPCR 的重复性试验 | 第99页 |
·对病料样品的检测 | 第99页 |
·讨论 | 第99-101页 |
结论 | 第101-102页 |
参考文献 | 第102-115页 |
缩略词 | 第115-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
作者简介 | 第118页 |