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小麦与条锈菌互作过程中活性氧和防御基因的防御反应及抗病相关基因的鉴定与功能验证

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-17页
第一章 文献综述第17-51页
   ·植物的抗性机制第17-22页
     ·植物抗病机制模型第17-18页
     ·植物抗病遗传的基础模式第18-20页
     ·植物的抗病基因第20-22页
   ·植物与病原菌互作的分子机制第22-34页
     ·胞外信号分子的识别第23页
     ·胞内信号转导第23-32页
     ·植物防卫反应的启动第32-34页
   ·基因功能研究技术第34-45页
     ·生物信息学数据分析第34-35页
     ·基因时空表达谱的分析第35-36页
     ·植物基因功能的验证第36-45页
     ·蛋白的亚细胞定位第45页
   ·小麦条锈病的发生、危害及研究现状第45-50页
     ·小麦条锈病的发生和危害第45-46页
     ·小麦条锈病的研究进展第46-50页
   ·本研究目的意义第50-51页
第二章 小麦与条锈菌互作过程中活性氧和防御基因的防御反应第51-74页
   ·前言第51-53页
   ·材料、试剂及仪器第53页
     ·材料第53页
     ·试剂第53页
     ·仪器第53页
   ·实验方法第53-58页
     ·培养和接种第53-54页
     ·病情调查第54页
     ·组织学研究第54页
     ·透射电子显微镜法对条锈菌侵染过程的观察第54-55页
     ·DAB 染色法对H_2O_2 的组织化学定位第55页
     ·防御基因表达研究第55-58页
   ·结果与分析第58-70页
     ·条锈菌在叶片上病症和病情发展情况第58-59页
     ·小麦与条锈菌不同组合中的组织学观察第59-62页
     ·小麦寄主与条锈菌细胞的超微结构观察第62页
     ·HR 细胞坏死第62-65页
     ·H_2O_2 在亲和与非亲和组合中的积累第65-67页
     ·防御基因的表达谱第67-70页
   ·讨论与结论第70-74页
第三章 含CBS 结构域的小麦TACDCP1 基因的克隆及表达特征分析第74-96页
   ·前言第74-75页
   ·材料、试剂及仪器第75页
     ·材料第75页
     ·试剂第75页
     ·仪器第75页
   ·实验方法第75-86页
     ·接种和采样第75-76页
     ·RNA 提取及质量检测第76-78页
     ·cDNA 第一链的合成及检测第78-79页
     ·基因全长的电子克隆和RT-PCR 扩增第79-80页
     ·PCR 产物的回收纯化第80页
     ·PCR 产物与载体的连接第80-81页
     ·感受态细胞的制备及转化第81-82页
     ·质粒DNA 的小量制备第82-83页
     ·质粒的酶切鉴定第83页
     ·基因片段的序列测定第83-84页
     ·基因全长的序列拼接及分析第84页
     ·目的基因的表达特征分析第84-86页
   ·结果与分析第86-93页
     ·小麦叶片总RNA 的提取第86页
     ·TaCDCP1 的全长cDNA 克隆第86-88页
     ·TaCDCP1 的序列分析第88-91页
     ·TaCDCP1 基因组织特异性表达分析第91-92页
     ·TaCDCP1 基因受条锈菌诱导的表达分析第92页
     ·TaCDCP1 基因受生物及非生物胁迫的表达分析第92-93页
   ·讨论与结论第93-96页
第四章 小麦EF-手型钙结合蛋白基因TACAB1 的克隆、表达特征分析及其初步功能验证第96-115页
   ·前言第96-97页
   ·材料、试剂及仪器第97页
     ·材料第97页
     ·试剂第97页
     ·仪器第97页
   ·实验方法第97-102页
     ·样品处理与采集第97页
     ·TaCab1 基因的电子克隆第97-98页
     ·基因全长的序列拼接及分析第98页
     ·基因组全长克隆第98-99页
     ·实时定量PCR 分析第99页
     ·瞬时表达与亚细胞定位分析第99-102页
   ·结果与分析第102-112页
     ·TaCab1 的全长cDNA 克隆第102-103页
     ·TaCab1 的序列分析第103-107页
     ·TaCab1 基因组全长第107页
     ·TaCab1 基因受钙离子诱导的表达分析第107-108页
     ·TaCab1 基因组织特异性表达分析第108-109页
     ·TaCab1 基因受条锈菌诱导的表达分析第109-110页
     ·TaCab1 基因受生物及非生物胁迫下的表达分析第110-111页
     ·TaCab1 亚细胞定位第111-112页
   ·讨论与结论第112-115页
第五章 小麦受翻译调节的肿瘤蛋白基因TATCTP1 的克隆、表达特征分析及其功能验证第115-137页
   ·前言第115-116页
   ·材料、试剂及仪器第116页
     ·材料第116页
     ·试剂第116页
   ·实验方法第116-120页
     ·TaTCTP1 基因的电子克隆和RT-PCR 扩增第116页
     ·基因全长的序列拼接及分析第116-117页
     ·基因组全长的克隆第117页
     ·实时定量PCR 分析第117页
     ·瞬时表达与亚细胞定位分析第117页
     ·BSMV 诱导小麦的基因沉默第117-120页
   ·结果与分析第120-133页
     ·TaTCTP1 的全长cDNA 克隆第120-121页
     ·TaTCTP1 的序列分析第121-124页
     ·TaTCTP1 基因组全长第124-126页
     ·TaTCTP1 基因受钙离子诱导的表达分析第126-127页
     ·TaTCTP1 基因组织特异性表达分析第127页
     ·TaTCTP1 基因在条锈菌诱导下的表达分析第127-129页
     ·TaTCTP1 基因受生物及非生物胁迫下的表达分析第129页
     ·TaTCTP1 亚细胞定位第129-130页
     ·TaTCTP1 基因沉默结果分析第130-133页
   ·讨论与结论第133-137页
全文结论第137-139页
参考文献第139-162页
附录第162-163页
致谢第163-165页
作者简介第165页

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