| 摘要 | 第7-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 英文缩写说明 | 第10-15页 |
| 1 绪论 | 第15-30页 |
| 1.1 糖尿病简介 | 第15页 |
| 1.1.1 糖尿病发病形势的严峻性 | 第15页 |
| 1.1.2 糖尿病的分型与病因 | 第15页 |
| 1.2 胰岛素的简介 | 第15-18页 |
| 1.2.1 胰岛素的生物合成 | 第16页 |
| 1.2.2 胰岛素的结构 | 第16-17页 |
| 1.2.3 胰岛素的生理作用与机制 | 第17-18页 |
| 1.3 第三代胰岛素-胰岛素类似物 | 第18-20页 |
| 1.3.1 胰岛素类似物简介 | 第18-19页 |
| 1.3.2 胰岛素类似物药物研究进展 | 第19-20页 |
| 1.4 赖脯胰岛素的简介 | 第20-21页 |
| 1.4.1 赖脯胰岛素的结构 | 第20页 |
| 1.4.2 赖脯胰岛素的临床应用 | 第20-21页 |
| 1.4.3 赖脯胰岛素的市场分析 | 第21页 |
| 1.5 胰岛素类药物生产工艺 | 第21-23页 |
| 1.5.1 胰岛素重组表达系统 | 第21-22页 |
| 1.5.2 胰岛素重组表达策略 | 第22-23页 |
| 1.6 蛋白体外复性 | 第23-26页 |
| 1.6.1 包涵体洗涤 | 第23页 |
| 1.6.2 包涵体变性溶解 | 第23页 |
| 1.6.3 蛋白质体外重折叠原理 | 第23-24页 |
| 1.6.4 复性的方法 | 第24-25页 |
| 1.6.5 复性的影响因素 | 第25页 |
| 1.6.6 复性结果的检测与鉴定 | 第25-26页 |
| 1.7 胰岛素原酶切 | 第26页 |
| 1.8 重组蛋白（多肽）的分离纯化 | 第26-28页 |
| 1.8.1 离子交换色谱法 | 第27页 |
| 1.8.2 反相高效液相层析 | 第27-28页 |
| 1.9 胰岛素结晶 | 第28页 |
| 1.9.1 结晶的影响因素 | 第28页 |
| 1.9.2 胰岛素结晶的方法 | 第28页 |
| 1.10 立题依据 | 第28-30页 |
| 2 赖脯胰岛素原包涵体的发酵优化 | 第30-40页 |
| 2.1 试剂与仪器 | 第30-32页 |
| 2.1.1 菌株与质粒 | 第30页 |
| 2.1.2 培养基 | 第30-31页 |
| 2.1.3 试剂 | 第31页 |
| 2.1.4 仪器设备 | 第31-32页 |
| 2.2 试验方法 | 第32-34页 |
| 2.2.1 种子生长曲线 | 第32页 |
| 2.2.2 摇瓶发酵条件优化 | 第32-33页 |
| 2.2.3 5L发酵罐发酵条件优化 | 第33-34页 |
| 2.3 结果与分析 | 第34-38页 |
| 2.3.1 种子生长曲线 | 第34页 |
| 2.3.2 摇瓶发酵条件优化 | 第34-36页 |
| 2.3.3 5L发酵罐发酵条件优化 | 第36-38页 |
| 2.4 本章小结 | 第38-40页 |
| 3 赖脯胰岛素原包涵体的复性 | 第40-63页 |
| 3.1 试剂与仪器 | 第40页 |
| 3.1.1 试剂 | 第40页 |
| 3.1.2 仪器设备 | 第40页 |
| 3.2 试验方法 | 第40-47页 |
| 3.2.1 变性液与复性液RP-HPLC分析方法 | 第40-42页 |
| 3.2.2 包涵体的洗涤条件优化 | 第42-43页 |
| 3.2.3 包涵体的变性溶解 | 第43页 |
| 3.2.4 赖脯胰岛素原包涵体的复性 | 第43-47页 |
| 3.3 结果分析 | 第47-62页 |
| 3.3.1 赖脯胰岛素原包涵体的洗涤 | 第47-49页 |
| 3.3.2 赖脯胰岛素原包涵体的变性溶解 | 第49-51页 |
| 3.3.3 赖脯胰岛素原包涵体的复性优化结果 | 第51-62页 |
| 3.4 本章小结 | 第62-63页 |
| 4 赖脯胰岛素分离纯化与鉴定 | 第63-79页 |
| 4.1 试剂与仪器 | 第63页 |
| 4.1.1 试剂 | 第63页 |
| 4.1.2 仪器设备 | 第63页 |
| 4.2 试验方法 | 第63-69页 |
| 4.2.1 赖脯胰岛素RP –HPLC分析检测方法 | 第63-64页 |
| 4.2.2 赖脯胰岛素原酶切 | 第64-65页 |
| 4.2.3 赖脯胰岛素的分离纯化 | 第65-69页 |
| 4.3 结果与分析 | 第69-77页 |
| 4.3.1 赖脯胰岛素原的酶切 | 第69-73页 |
| 4.3.2 赖脯胰岛素的分离纯化 | 第73-76页 |
| 4.3.3 赖脯胰岛素的分析鉴定 | 第76-77页 |
| 4.4 本章小结 | 第77-79页 |
| 全文总结 | 第79-80页 |
| 对进一步研究工作的设想和建立 | 第80-81页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文、专利申请 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 附图 | 第88页 |