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DGDG合成酶基因MtDGD1和聚半乳糖醛酸酶基因MtPG在蒺藜苜蓿共生固氮中的功能研究

概述第8-11页
    1 生物固氮概述第8-9页
    2 根瘤菌—豆科植物共生固氮体系的建立第9-10页
    3 本论文研究概要第10-11页
第一章 DGDG合成酶基因MtDGD1在蒺藜苜蓿共生固氮中的功能研究第11-63页
    摘要第11-12页
    Abstract第12-13页
    缩略语表第13-14页
    1 前言第14-24页
        1.1 根瘤共生体膜的重要功能第14页
        1.2 半乳糖脂的生物学功能、结构与合成第14-20页
            1.2.1 半乳糖脂(MGDG和DGDG)在光合作用中的重要功能第14-15页
            1.2.2 半乳糖脂(MGDG和DGDG)的结构与生物合成第15-18页
            1.2.3 半乳糖脂(MGDG和DGDG)的转运第18-20页
        1.3 DGDG与豆科植物根瘤的共生固氮第20-21页
        1.4 研究目的和意义第21-23页
        1.5 技术路线第23-24页
    2 材料与方法第24-37页
        2.1 实验材料第24-28页
            2.1.1 植物材料第24页
            2.1.2 质粒和菌株第24页
            2.1.3 主要分子生物学试剂第24-25页
            2.1.4 常用培养基及缓冲液第25-27页
            2.1.5 引物序列及抗生素第27-28页
            2.1.6 主要仪器第28页
        2.2 实验方法第28-37页
            2.2.1 分子生物学基本操作第28页
            2.2.2 基因表达特征分析第28-31页
            2.2.3 MtDGD1启动子分析第31-32页
            2.2.4 苜蓿毛根转化实验第32-34页
            2.2.5 固氮酶活的测定第34-35页
            2.2.6 脂质含量和组成分析第35-36页
            2.2.7 MtDGD1在低磷处理后的转录水平检测第36页
            2.2.8 MtDGD1在低磷处理后DGDG等脂质丰度变化检测第36-37页
    3 结果与分析第37-58页
        3.1 MtDGD1基因的共生表达特征分析第37-41页
            3.1.1 MtDGD1的时空和组织特异性表达第37-39页
            3.1.2 MtDGD1启动子克隆和表达定位第39-41页
        3.2 MtDGD1基因沉默及共生固氮表型第41-47页
            3.2.1 MtDGD1在蒺藜苜蓿发根中的沉默及效率第41-42页
            3.2.2 MtDGD1沉默显著减少根瘤中DGDG丰度第42-43页
            3.2.3 MtDGD1沉默抑制根瘤形成数量和固氮活性第43-45页
            3.2.4 MtDGD1基因沉默影响根瘤发育第45-47页
        3.3 MtDGD1基因超表达及共生固氮表型第47-53页
            3.3.1 MtDGD1在蒺藜苜蓿发根中的超表达及效率第47-48页
            3.3.2 MtDGD1超表达对根瘤中DGDG丰度的影响第48-49页
            3.3.3 MtDGD1超表达后对根瘤数量和固氮活性的影响第49-51页
            3.3.4 MtDGD1超表达对根瘤发育的影响第51-53页
        3.4 低磷条件下苜蓿植株根瘤中MtDGD1转录水平和各脂质变化第53-58页
            3.4.1 MtDGD1在低磷处理下的转录水平第54-55页
            3.4.2 在低磷处理下植株各组织中脂质丰度变化第55-58页
    4 小结与讨论第58-63页
        4.1 小结第58页
        4.2 讨论第58-63页
第二章 聚半乳糖醛酸酶基因MtPG在蒺藜苜蓿共生固氮中的功能研究第63-91页
    摘要第63-64页
    Abstract第64-65页
    缩略语表第65-66页
    1 前言第66-71页
        1.1 植物细胞壁组分第66-67页
        1.2 植物细胞中的聚半乳糖醛酸酶(PGs)第67-68页
        1.3 PG与生物固氮第68页
        1.4 研究目的和意义第68-70页
        1.5 技术路线第70-71页
    2 材料与方法第71-78页
        2.1 实验材料第71-73页
            2.1.1 植物材料第71页
            2.1.2 质粒和菌株第71页
            2.1.3 主要分子生物学试剂第71-72页
            2.1.4 引物序列第72-73页
            2.1.5 常用培养基及缓冲液第73页
            2.1.6 主要仪器第73页
        2.2 实验方法第73-78页
            2.2.1 分子生物学基本操作第73页
            2.2.2 基因表达特征分析第73-74页
            2.2.3 MtPG启动子分析第74页
            2.2.4 苜蓿基因组DNA的抽提第74-75页
            2.2.5 突变体筛选第75-77页
            2.2.6 固氮酶活的测定第77-78页
    3 结果与分析第78-89页
        3.1 MtPG基因序列和编码蛋白的结构域分析第78页
        3.2 MtPG的同源性比对和系统发育分析第78-80页
        3.3 MtPG在共生条件下的时空表达和特异性表达第80-81页
        3.4 MtPG启动子的克隆及GUS融合载体构建第81-82页
        3.5 MtPG基因Tnt1插入突变体的确定及筛选第82-85页
        3.6 MtPG纯合突变体NF4746的共生表型检测分析第85-89页
    4 小结与讨论第89-91页
        4.1 小结第89页
        4.2 讨论第89-91页
参考文献第91-99页
附录A第99-103页
附录B第103-116页
论文发表情况第116-117页
致谢第117页

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