摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
缩略语表 (Abbreviations) | 第11-12页 |
1. 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 研究问题的由来 | 第12页 |
1.2 功能性低聚糖的研究概述 | 第12-15页 |
1.2.1 功能性低聚糖 | 第12-13页 |
1.2.2 甘露低聚糖在肠道保护中的作用 | 第13-14页 |
1.2.3 甘露低聚糖的生产应用研究 | 第14页 |
1.2.4 魔芋甘露低聚糖的研究进展 | 第14-15页 |
1.3 益生菌的研究概述 | 第15-19页 |
1.3.1 益生菌 | 第15页 |
1.3.2 益生菌的生理功能及作用机理 | 第15-17页 |
1.3.3 益生菌与肠道屏障 | 第17-18页 |
1.3.4 枯草芽孢杆菌的研究概述 | 第18-19页 |
1.4 肠道上皮屏障 | 第19-22页 |
1.4.1 肠道屏障概述 | 第19-20页 |
1.4.2 肠上皮细胞 | 第20页 |
1.4.3 内毒素(LPS)引起的肠黏膜屏障损伤 | 第20-22页 |
2. 研究目的与意义 | 第22-23页 |
3. 材料与方法 | 第23-35页 |
3.1 试验材料 | 第23-26页 |
3.1.1 试验菌株、细胞、魔芋甘露低聚糖 | 第23页 |
3.1.2 引物以及相关核苷酸序列 | 第23-24页 |
3.1.3 主要药品、试剂及仪器设备 | 第24-25页 |
3.1.4 主要培养基、缓冲液及其配制 | 第25-26页 |
3.2 试验方法 | 第26-35页 |
3.2.1 细菌全基因组DNA的提取及 16srRNA鉴定 | 第26-28页 |
3.2.2 细菌生长曲线的测定 | 第28-29页 |
3.2.3 细胞培养 | 第29页 |
3.2.4 MTT法检测细胞活性 | 第29-30页 |
3.2.5 细胞总RNA的提取 | 第30页 |
3.2.6 反转录(RT-PCR) | 第30-31页 |
3.2.7 荧光定量PCR(qPCR) | 第31-32页 |
3.2.8 Western blot | 第32-34页 |
3.2.9 数据统计 | 第34-35页 |
4. 结果与分析 | 第35-50页 |
4.1 益生菌的纯化与鉴定 | 第35-40页 |
4.1.1 试验菌株的纯化培养及菌落形态 | 第35-36页 |
4.1.2 菌株的生理生化鉴定结果 | 第36页 |
4.1.3 试验菌株的革兰氏及芽孢染色 | 第36-38页 |
4.1.4 试验菌株 16srRNA测序结果 | 第38-40页 |
4.2 筛选利用甘露低聚糖的益生菌 | 第40-41页 |
4.3 LPS诱导肠上皮细胞损伤模型的构建 | 第41-44页 |
4.3.1 LPS引起Caco-2 细胞炎性损伤 | 第41页 |
4.3.2 LPS引起Caco-2 细胞活性损伤 | 第41-42页 |
4.3.3 LPS引起Caco-2 细胞通透性损伤 | 第42页 |
4.3.4 LPS引起Caco-2 细胞紧密连接损伤 | 第42-44页 |
4.3.5 LPS引起Caco-2 细胞黏液层损伤 | 第44页 |
4.4 肠上皮细胞损伤的修复 | 第44-50页 |
4.4.1 枯草芽孢杆菌对Caco-2 细胞损伤的修复 | 第44-46页 |
4.4.2 魔芋甘露低聚糖对Caco-2 细胞损伤的修复 | 第46-48页 |
4.4.3 魔芋甘露低聚糖与益生菌共处理对Caco-2 细胞损伤的修复 | 第48-50页 |
5. 讨论 | 第50-53页 |
5.1 LPS诱导Caco-2 细胞的损伤 | 第50-51页 |
5.2 益生菌的鉴定与筛选 | 第51-52页 |
5.3 益生菌、魔芋甘露低聚糖对Caco-2 细胞损伤的修复 | 第52-53页 |
6. 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-65页 |
致谢 | 第65页 |