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耐高温酵母的乙醇发酵及分子选育的初步研究

摘要第6-8页
ABSTRACT第8-9页
目录第10-14页
图标目录第14-17页
縮略词第17-19页
第一章 引言第19-33页
    1.1 燃料乙醇概述第19-20页
    1.2 木质纤维素乙醇研究现状第20-22页
        1.2.1 木质纤维素第20-21页
        1.2.2 木质纤维素乙醇发酵瓶颈第21页
        1.2.3 木糖乙醇发酵研究第21-22页
    1.3 酵母乙醇耐受性分子机制研究现状第22-28页
        1.3.1 乙醇对酵母细胞的毒害作用第22-23页
        1.3.2 酵母乙醇耐受性分子机制第23-28页
    1.4 乙醇耐受性酵母菌株的选育方法研究现状第28-29页
        1.4.1 选育乙醇耐受性酵母菌株的传统方法第28页
        1.4.2 选育乙醇耐受性酵母菌株的基因工程研究第28-29页
        1.4.3 选育乙醇耐受性酵母菌株的代谢工程研究第29页
    1.5 海藻糖研究现状第29-31页
    1.6 论文选题意义及研究内容第31-33页
        1.6.1 选题意义第31-32页
        1.6.2 研究内容第32-33页
第二章 耐高温酵母的筛选及鉴定第33-50页
    2.1 引言第33页
    2.2 实验材料第33-35页
        2.2.1 菌种分离源第33页
        2.2.2 实验菌株第33-34页
        2.2.3 培养基第34页
        2.2.4 实验试剂第34-35页
        2.2.5 实验仪器第35页
    2.3 实验方法第35-39页
        2.3.1 酵母菌的富集与分离第35-36页
        2.3.2 酵母菌的筛选第36页
        2.3.3 酵母菌的鉴定第36-39页
    2.4 结果与讨论第39-49页
        2.4.1 酵母菌的富集与分离第39页
        2.4.2 酵母菌的筛选第39-40页
        2.4.3 酵母菌的鉴定第40-49页
    2.5 本章小结第49-50页
第三章 L27菌株的葡萄糖和木糖发酵特性第50-66页
    3.1 引言第50页
    3.2 实验材料第50-51页
        3.2.1 实验菌株第50页
        3.2.2 发酵培养基第50-51页
        3.2.3 实验仪器第51页
    3.3 实验方法第51-52页
        3.3.1 葡萄糖发酵第51页
        3.3.2 木糖发酵第51-52页
        3.3.3 混合糖发酵第52页
        3.3.4 发酵产物分析方法第52页
    3.4 结果与讨论第52-64页
        3.4.1 葡萄糖发酵特性第52-59页
        3.4.2 木糖发酵特性第59-63页
        3.4.3 混合糖发酵特性第63-64页
    3.5 本章小结第64-66页
第四章 菌株L27发酵玉米芯半纤维素水解液产乙醇研究第66-91页
    4.1 引言第66页
    4.2 实验材料第66-68页
        4.2.1 实验菌株及材料第66-67页
        4.2.2 培养基第67页
        4.2.3 实验试剂第67-68页
        4.2.4 实验仪器第68页
    4.3 实验方法第68-74页
        4.3.1 玉米芯的预处理方法第68页
        4.3.2 玉米芯预处理条件的优化第68-69页
        4.3.3 玉米芯半纤维素水解液成分分析第69-70页
        4.3.4 玉米芯半纤维素水解液的发酵第70页
        4.3.5 纤维素含量测定方法第70-73页
        4.3.6 发酵产物分析方法第73-74页
    4.4 结果与讨论第74-89页
        4.4.1 玉米芯原材料各成分含量第74页
        4.4.2 单因素对玉米芯半纤维素水解影响第74-77页
        4.4.3 响应面法优化半纤维素水解条件第77-87页
        4.4.4 半纤维素水解液乙醇发酵第87-88页
        4.4.5 预处理条件对纤维素含量影响第88-89页
    4.5 本章小结第89-91页
第五章 过表达6-磷酸海藻糖合成酶基因提高酵母乙醇耐受性第91-114页
    5.1 引言第91页
    5.2 实验材料第91-94页
        5.2.1 菌株和质粒第91-92页
        5.2.2 培养基第92-93页
        5.2.3 实验试剂第93-94页
        5.2.4 实验仪器第94页
    5.3 实验方法第94-102页
        5.3.1 引物设计第94-95页
        5.3.2 引物稀释第95页
        5.3.3 酿酒酵母DNA的提取第95-96页
        5.3.4 PCR方法第96-97页
        5.3.5 琼脂糖凝胶电泳及其胶回收第97-98页
        5.3.6 PCR产物的TA克隆第98-99页
        5.3.7 目的基因与酵母表达载体的连接第99页
        5.3.8 质粒DNA的提取第99-100页
        5.3.9 酿酒酵母感受态细胞的制备第100页
        5.3.10 感受态细胞的转化第100-101页
        5.3.11 海藻糖标准曲线的制备第101页
        5.3.12 酵母中海藻糖的提取及含量测定第101页
        5.3.13 酵母乙醇耐受性测定第101页
        5.3.14 野生型菌株与突变菌株的葡萄糖发酵第101-102页
    5.4 结果与讨论第102-113页
        5.4.1 pYES3-tps1酵母表达载体的构建策略示意图第102-103页
        5.4.2 pYES3-tps1酵母表达载体的构建第103-109页
        5.4.3 pYES3-tps1在酿酒酵母的功能鉴定第109-111页
        5.3.4 葡萄糖发酵乙醇产量变化第111-113页
    5.5 本章小结第113-114页
第六章 结论第114-118页
    6.1 耐高温酵母的筛选第114页
    6.2 耐高温酵母的生理特性及分子生物学鉴定第114-115页
    6.3 菌株L27的葡萄糖、木糖发酵特性第115-116页
    6.4 玉米芯半纤维素水解液发酵研究第116-117页
    6.5 过表达6-磷酸海藻糖合成酶基因提高酵母乙醇耐受性第117-118页
致谢第118-119页
参考文献第119-128页
附录 攻读硕士期间发表论文和专利第128页

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