摘要 | 第3-6页 |
Abstract | 第6-9页 |
缩略及中英文对照 | 第10-17页 |
第1章 前言 | 第17-26页 |
1.1 研究背景 | 第17-24页 |
1.1.1 恶性肿瘤是目前危害人类健康的主要疾病之一 | 第17页 |
1.1.2 癌症的化学预防被认为是一种非常有效的方法 | 第17页 |
1.1.3 天然、高效、低毒的抗肿瘤活性物成为研究的热点 | 第17-18页 |
1.1.4 天然的抗肿瘤活性物筛选成为当前的研究热点 | 第18页 |
1.1.5 天然产物抗肿瘤活性机理研究 | 第18-22页 |
1.1.6 山莓的研究进展 | 第22-24页 |
1.2 研究的目的和意义 | 第24页 |
1.3 研究的主要内容 | 第24-25页 |
1.3.1 山莓叶中活性物质的分离纯化 | 第24页 |
1.3.2 活性单体的结构鉴定 | 第24页 |
1.3.3 活性单体的抗癌活性研究 | 第24-25页 |
1.3.4 抗肿瘤活性评价及作用机制研究 | 第25页 |
1.4 研究技术路线 | 第25-26页 |
第2章 山莓叶中萜类和酚类物质的分离纯化及结构鉴定 | 第26-55页 |
2.1 引言 | 第26页 |
2.2 实验材料及仪器 | 第26-28页 |
2.2.1 实验材料 | 第26页 |
2.2.2 实验试剂 | 第26-27页 |
2.2.3 主要仪器与设备 | 第27-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-30页 |
2.3.1 提取的方法 | 第28页 |
2.3.2 液液萃取分离纯化 | 第28页 |
2.3.3 柱层析分离纯化乙酸乙酯萃取物 | 第28-29页 |
2.3.4 结构鉴定方法 | 第29-30页 |
2.4 结果分析 | 第30-54页 |
2.4.1 化合物1的结构鉴定 | 第30-31页 |
2.4.2 化合物2的结构鉴定 | 第31-36页 |
2.4.3 化合物3的结构鉴定 | 第36-38页 |
2.4.4 化合物4的结构鉴定 | 第38-39页 |
2.4.5 化合物5的结构鉴定 | 第39-44页 |
2.4.6 化合物6的结构鉴定 | 第44-46页 |
2.4.7 化合物7的结构鉴定 | 第46-51页 |
2.4.8 化合物8的结构鉴定 | 第51-52页 |
2.4.9 化合物9的结构鉴定 | 第52-53页 |
2.4.10 化合物10的结构鉴定 | 第53-54页 |
2.5 本章小结 | 第54-55页 |
第3章 山莓叶中10种单体化合物抗肿瘤活性筛选及化合物4和 8 作用机制研究 | 第55-72页 |
3.1 引言 | 第55页 |
3.2 实验材料及仪器 | 第55-57页 |
3.2.1 实验材料 | 第55页 |
3.2.2 实验试剂 | 第55-57页 |
3.2.3 实验仪器 | 第57页 |
3.3 实验方法 | 第57-62页 |
3.3.1 抗肿瘤活性检测方法 | 第57-59页 |
3.3.2 流式细胞术定量检测化合物4和 8 对HCT-116 细胞周期的影响 | 第59-60页 |
3.3.3 流式细胞术定量检测化合物4和 8 对结肠癌细胞对HCT-116 细胞凋亡的影响 | 第60页 |
3.3.4 Western blot法检测化合物4和 8 对HCT-116 细胞相关周期和凋亡蛋白的影响 | 第60-62页 |
3.3.5 数据分析 | 第62页 |
3.4 结果分析 | 第62-70页 |
3.4.1 10个化合物对癌细胞增殖抑制作用 | 第62-63页 |
3.4.2 化合物对人正常肝细胞(LO2)的增殖的抑制作用 | 第63-65页 |
3.4.3 化合物 3、4 和8对正常人结肠成纤维细胞株CCD-18co增殖的抑制作用 | 第65-66页 |
3.4.4 化合物4和 8 的抗结肠癌机理研究 | 第66-70页 |
3.5 本章小结 | 第70-72页 |
第4章 山莓叶中阿魏酸乙酯诱导HepG2细胞凋亡及作用机制研究 | 第72-87页 |
4.1 引言 | 第72页 |
4.2 实验材料及仪器 | 第72-75页 |
4.2.1 实验原材料 | 第72页 |
4.2.2 实验试剂 | 第72-74页 |
4.2.3 实验仪器 | 第74-75页 |
4.3 实验方法 | 第75-78页 |
4.3.1 细胞培养 | 第75页 |
4.3.2 阿魏酸乙酯对HepG2细胞及正常肝细胞(LO2)形态的影响 | 第75页 |
4.3.3 流式细胞术定量检测对HepG2细胞凋亡的影响 | 第75页 |
4.3.4 细胞周期的检测方法 | 第75-76页 |
4.3.5 DAPI染色检测化合物作用HepG2细胞DNA的影响 | 第76页 |
4.3.6 罗丹明 123(Rh123)染色检测细胞凋亡线粒体膜电位的变化 | 第76页 |
4.3.7 流式细胞术检测HepG2细胞中Ca~(2+)浓度的变化 | 第76-77页 |
4.3.8 Western blot法检测阿魏酸乙酯作用HepG2细胞后蛋白表达的影响 | 第77-78页 |
4.4 结果与分析 | 第78-86页 |
4.4.1 阿魏酸乙酯对肝癌细胞HepG2及人正常肝细胞LO2形态的影响 | 第78页 |
4.4.2 阿魏酸乙酯能诱导人肝癌HepG2细胞发生凋亡 | 第78-81页 |
4.4.3 阿魏酸乙酯诱导HepG2细胞发生凋亡通路的研究 | 第81-83页 |
4.4.4 阿魏酸乙酯对HepG2细胞周期的影响 | 第83-84页 |
4.4.5 阿魏酸乙酯作用HepG2细胞后的蛋白表达的影响 | 第84-86页 |
4.5 本章小结 | 第86-87页 |
第5章 山莓叶中新型二萜化合物抗结肠癌HCT-116 细胞的 | 第87-129页 |
5.1 前言 | 第87-88页 |
5.2 实验材料及仪器 | 第88-90页 |
5.2.1 实验材料 | 第88页 |
5.2.2 实验试剂 | 第88-89页 |
5.2.3 实验仪器 | 第89-90页 |
5.3 实验方法 | 第90-98页 |
5.3.1 细胞培养 | 第90页 |
5.3.2 DEK对HCT-116 细胞形态的影响 | 第90页 |
5.3.3 DEK对HCT-116 细胞克隆形成的影响 | 第90页 |
5.3.4 流式细胞术定量检测DEK对HCT-116 细胞凋亡的影响 | 第90页 |
5.3.5 流式细胞术检测DEK作用HCT-116 细胞周期方法 | 第90-91页 |
5.3.6 流式细胞术检测线粒体膜电位 | 第91页 |
5.3.7 细胞内Ca~(2+)浓度检测方法 | 第91页 |
5.3.8 iTRAQ标记检测蛋白质的方法 | 第91-97页 |
5.3.9 Western blot法验证差异蛋白的方法 | 第97-98页 |
5.3.10 数据分析 | 第98页 |
5.4 结果分析 | 第98-127页 |
5.4.1 化合物DEK对结肠癌细胞HCT-116 细胞形态的影响 | 第98-99页 |
5.4.2 化合物DEK对结肠癌克隆形成的影响 | 第99-100页 |
5.4.3 化合物DEK对结肠癌细胞(HCT-116)细胞凋亡的影响 | 第100-101页 |
5.4.4 化合物DEK对结肠癌细胞(HCT-116)周期的影响 | 第101-102页 |
5.4.5 化合物DEK对结肠癌细胞(HCT-116)细胞线粒体电位(△Ψm)的影响 | 第102-103页 |
5.4.6 DEK对结肠癌细胞(HCT-116)细胞Ca~(2+)浓度的影响 | 第103-104页 |
5.4.7 基于iTRAQ技术的蛋白组学分析 | 第104-127页 |
5.5 本章小结 | 第127-129页 |
第6章 全文讨论与结论 | 第129-135页 |
6.1 讨论 | 第129-131页 |
6.1.1 抗肿瘤活性成分的筛选 | 第129页 |
6.1.2 蛋白质组学研究在抗肿瘤活性研究中的应用 | 第129-130页 |
6.1.3 靶向作用及抗肿瘤机理研究 | 第130-131页 |
6.2 研究结果总结 | 第131-133页 |
6.3 全文创新点 | 第133页 |
6.4 展望 | 第133-135页 |
致谢 | 第135-137页 |
参考文献 | 第137-147页 |
附录一 攻读学位期间主要研究成果 | 第147-150页 |
附录二 单体化合物光谱图 | 第150-168页 |