摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
英文缩略词汇 | 第8-12页 |
第1章 绪论 | 第12-19页 |
1.1 HSCs的概述 | 第12-13页 |
1.2 HSCs的应用 | 第13页 |
1.3 FGFs家族在造血中的作用 | 第13-14页 |
1.4 FGFs家族在血液肿瘤中的作用 | 第14-15页 |
1.5 FGFR3概述 | 第15-17页 |
1.5.1 FGFR3与骨骼疾病 | 第16-17页 |
1.5.2 FGFR3与癌症 | 第17页 |
1.6 本课题的研究思路 | 第17-19页 |
第2章 材料和方法 | 第19-33页 |
2.1 仪器与试剂 | 第19-23页 |
2.1.1 主要的试剂 | 第19-20页 |
2.1.2 抗体 | 第20-21页 |
2.1.3 主要仪器 | 第21页 |
2.1.4 实验试剂的配方 | 第21-23页 |
2.1.5 实验动物 | 第23页 |
2.2 实验方法 | 第23-33页 |
2.2.1 小鼠基因型鉴定 | 第23-25页 |
2.2.2 蛋白水平验证基因敲除小鼠FGFR3表达情况 | 第25-27页 |
2.2.3 分离小鼠骨髓细胞 | 第27-28页 |
2.2.4 免疫磁珠法分选小鼠CD117+造血干/祖细胞 | 第28页 |
2.2.5 免疫磁珠法分选小鼠LK造血祖细胞 | 第28-30页 |
2.2.6 流式细胞术分析HSCs胞内蛋白的表达 | 第30页 |
2.2.7 细胞体外培养并检测HSCs的比例 | 第30页 |
2.2.8 病毒侵染CD117+造血干/祖细胞 | 第30-31页 |
2.2.9 AnnexinV检测细胞凋亡 | 第31页 |
2.2.10 BrdU检测细胞增殖 | 第31-33页 |
第3章 实验结果 | 第33-44页 |
3.1 小鼠基因型鉴定结果 | 第33-34页 |
3.1.1 通过PCR方法扩增Fgfr3基因片段的结果 | 第33页 |
3.1.2 PCR产物测序结果 | 第33-34页 |
3.1.3 蛋白水平验证FGFR3在小鼠体内的敲除情况 | 第34页 |
3.2 单细胞测序检测FGFR3对HSCs中基因表达的影响 | 第34-35页 |
3.3 PDGFR的表达检测结果 | 第35-36页 |
3.4 FGF2/PDGF促进FGFR3敲除的HSCs增殖 | 第36-37页 |
3.5 PDGF-BB通过激活STAT5和上调CyclinD1的表达促进HSCs扩增 | 第37-38页 |
3.6 FGFR3通过激活STAT1负调控HSCs扩增 | 第38-39页 |
3.7 si-Stat5a病毒侵染CD117+细胞 | 第39-42页 |
3.7.1 RT-PCR法验证Stat5基因表达情况 | 第39页 |
3.7.2 si-Stat5a病毒侵染CD117+细胞的荧光变化情况 | 第39-40页 |
3.7.3 AnnexinV检测细胞凋亡情况 | 第40-41页 |
3.7.4 BrdU检测细胞的增殖能力 | 第41-42页 |
3.8 FGFR3-K650E病毒侵染CD117+细胞 | 第42-44页 |
3.8.1 蛋白水平验证FGFR3-K650E的表达情况 | 第42页 |
3.8.2 AnnexinV检测细胞凋亡情况 | 第42页 |
3.8.3 BrdU检测细胞增殖能力 | 第42-43页 |
3.8.4 CD117+细胞内信号通路蛋白的表达及活化情况 | 第43-44页 |
第4章 实验结论 | 第44-45页 |
第5章 实验讨论 | 第45-48页 |
参考文献 | 第48-58页 |
致谢 | 第58页 |