摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1 基因表达系列分析(SAGE)文库 | 第12-16页 |
1.1 SAGE原理和路线 | 第12-13页 |
1.2 SAGE技术的特点 | 第13-14页 |
1.3 SAGE技术的应用 | 第14-16页 |
2 羧肽酶 | 第16-19页 |
2.1 丝氨酸羧肽酶 | 第16-18页 |
2.2 金属羧肽酶 | 第18-19页 |
2.3 半胱氨酸羧肽酶 | 第19页 |
3 高温与昆虫的关系 | 第19-22页 |
第二章 研究目的与内容 | 第22-24页 |
1 研究目的与意义 | 第22页 |
2 研究内容 | 第22-23页 |
3 研究技术路线 | 第23-24页 |
第三章 常用实验材料与方法 | 第24-31页 |
1 常用材料和试剂 | 第24-27页 |
1.1 实验材料 | 第24页 |
1.2 取材 | 第24页 |
1.3 常用试剂 | 第24-25页 |
1.4 核酸电泳相关试剂 | 第25页 |
1.5 培养基 | 第25-26页 |
1.6 缓冲液和常用溶液 | 第26页 |
1.7 主要数据库和软件 | 第26-27页 |
2 基本实验方法 | 第27-31页 |
2.1 总RNA提取 | 第27页 |
2.2 总RNA消化步骤与体系 | 第27页 |
2.3 RNA反转录 | 第27-28页 |
2.4 PCR扩增反应程序及体系 | 第28页 |
2.5 5′-RACE反应 | 第28页 |
2.6 3′-RACE反应 | 第28页 |
2.7 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第28-29页 |
2.8 PCR产物回收与连接 | 第29页 |
2.9 感受态细胞制备 | 第29页 |
2.10 连接产物的转化 | 第29-30页 |
2.11 重组质粒的筛选 | 第30-31页 |
第四章 家蚕BmSCP基因克隆及生物信息学分析 | 第31-43页 |
1 材料与方法 | 第31-33页 |
1.1 实验材料及处理 | 第31-32页 |
1.2 总RNA提取与第一链cDNA的合成 | 第32页 |
1.3 引物设计 | 第32-33页 |
1.4 cDNA的克隆 | 第33页 |
1.5 基因与蛋白序列分析 | 第33页 |
2 结果与分析 | 第33-41页 |
2.1 家蚕BmSCP基因的克隆和结构 | 第33-35页 |
2.2 家蚕BmSCP蛋白的生物信息学分析 | 第35-41页 |
3 讨论 | 第41-43页 |
第五章 高温处理对家蚕在5龄期BmSCP基因的表达及分析 | 第43-52页 |
1 材料与方法 | 第43-44页 |
2 结果与分析 | 第44-49页 |
2.1 不同处理条件下家蚕BmSCP基因的表达差异 | 第44-45页 |
2.2 BmSCP基因在不同性别家蚕中的表达差异 | 第45-48页 |
2.3 家蚕BmSCP基因的组织表达差异 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-52页 |
第六章 家蚕中BmSCP基因与卵黄蛋白的关系 | 第52-58页 |
1 材料与方法 | 第52-53页 |
1.1 实验材料 | 第52页 |
1.2 试验方法 | 第52-53页 |
1.3 引物设计 | 第53页 |
2 结果与分析 | 第53-55页 |
2.1 家蚕不同发育时期卵巢中卵黄蛋白含量与BmSCP基因转录 | 第53页 |
2.2 家蚕不同发育时期卵中卵黄蛋白与BmSCP基因转录情况 | 第53-54页 |
2.3 家蚕不同发育时期脂肪体中BmSCP与卵黄蛋白原受体基因(VgR)转录比较 | 第54-55页 |
3 讨论 | 第55-58页 |
结论与展望 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
研究生期间发表的文章及成果 | 第66-67页 |
附录 | 第67-70页 |
致谢 | 第70-71页 |