| 附件 | 第3-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 英文缩略表 | 第13-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-23页 |
| 1.1 蓝舌病概述 | 第14页 |
| 1.2 蓝舌病的历史和分布 | 第14-15页 |
| 1.3 BTV基因组结构和功能 | 第15-17页 |
| 1.4 BTV的复制过程 | 第17-18页 |
| 1.5 BTV的致病机制 | 第18-19页 |
| 1.6 BT的预防 | 第19页 |
| 1.7 BT疫苗的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.7.1 减毒活疫苗 | 第19页 |
| 1.7.2 灭活疫苗 | 第19-20页 |
| 1.7.3 病毒样颗粒（VLP） | 第20页 |
| 1.7.4 重组活载体疫苗 | 第20-21页 |
| 1.8 禽痘病毒的研究进展 | 第21页 |
| 1.9 研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 第二章 重组禽痘病毒载体的构建 | 第23-36页 |
| 2.1 材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 病毒株和细胞 | 第23页 |
| 2.1.2 质粒载体 | 第23页 |
| 2.1.3 抗体 | 第23页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.5 试剂盒 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-28页 |
| 2.2.1 表达BTV1-VP5基因禽痘病毒转移载体的构建 | 第24页 |
| 2.2.2 表达BTV1-VP2基因禽痘病毒转移载体的构建 | 第24页 |
| 2.2.3 共表达BTV1-(VP2+VP5)基因禽痘病毒转移载体的构建 | 第24-25页 |
| 2.2.4 转染用质粒的准备 | 第25-26页 |
| 2.2.5 成纤维细胞的制备 | 第26页 |
| 2.2.6 转染 | 第26-27页 |
| 2.2.7 重组禽痘病毒的筛选和纯化 | 第27页 |
| 2.2.8 重组禽痘病毒的鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3 结果 | 第28-34页 |
| 2.3.1 表达BTV1-VP5基因禽痘病毒转移载体pSY681-gfp-gpt-VP5的鉴定结果 | 第28-29页 |
| 2.3.2 表达BTV1-VP2基因禽痘病毒转移载体pSY681-gfp-gpt-VP2的鉴定结果 | 第29-30页 |
| 2.3.3 共表达BTV1-(VP2+VP5) 基因禽痘病毒转移载体pSY681-gfp-gpt- (VP2+VP5)的鉴定结果 | 第30-31页 |
| 2.3.4 重组禽痘病毒的筛选和纯化 | 第31页 |
| 2.3.5 重组禽痘病毒的PCR鉴定 | 第31-32页 |
| 2.3.6 rFPV的免疫荧光鉴定 | 第32页 |
| 2.3.7 rFPV的western blot鉴定 | 第32-33页 |
| 2.3.8 rFPV的生长曲线 | 第33-34页 |
| 2.4 讨论 | 第34-36页 |
| 第三章 重组DNA疫苗的构建 | 第36-42页 |
| 3.1 材料 | 第36页 |
| 3.1.1 细胞和抗体 | 第36页 |
| 3.1.2 质粒和载体 | 第36页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第36页 |
| 3.2 方法 | 第36-38页 |
| 3.2.1 重组DNA疫苗pCAG- VP5的构建 | 第36-37页 |
| 3.2.2 重组DNA疫苗pCAG- VP2的构建 | 第37页 |
| 3.2.3 重组DNA疫苗pCAG- (VP2+VP5)的构建 | 第37页 |
| 3.2.4 重组DNA疫苗质粒在 293T中的表达 | 第37-38页 |
| 3.2.5 间接免疫荧光试验 | 第38页 |
| 3.3 结果 | 第38-40页 |
| 3.3.1 重组DNA疫苗pCAG- VP5的酶切和PCR鉴定 | 第38页 |
| 3.3.2 重组DNA疫苗pCAG- VP2的酶切和PCR鉴定 | 第38-39页 |
| 3.3.3 重组DNA疫苗pCAG- (VP2+VP5)的酶切和PCR鉴定 | 第39-40页 |
| 3.3.4 间接免疫荧光结果 | 第40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 DNA疫苗及禽痘病毒重组疫苗在小鼠上的免疫评估 | 第42-56页 |
| 4.1 材料和方法 | 第42-46页 |
| 4.1.1 病毒株和细胞 | 第42页 |
| 4.1.2 质粒 | 第42页 |
| 4.1.3 试剂 | 第42页 |
| 4.1.4 实验动物 | 第42页 |
| 4.1.5 重组禽痘病毒的扩大培养及PFU的测定 | 第42-43页 |
| 4.1.6 DNA疫苗重组质粒的大量提取 | 第43页 |
| 4.1.7 BTV1型SZ97/1 株病毒TCID50的测定 | 第43页 |
| 4.1.8 真核表达重组VP2、VP5蛋白的扩大培养及纯化 | 第43-44页 |
| 4.1.9 动物实验 | 第44页 |
| 4.1.10 免疫后特异性抗体的检测 | 第44-45页 |
| 4.1.11 中和试验 | 第45页 |
| 4.1.12 淋巴细胞增值试验 | 第45-46页 |
| 4.1.13 细胞因子的检测 | 第46页 |
| 4.1.14 统计学分析 | 第46页 |
| 4.2 结果 | 第46-54页 |
| 4.2.1 重组禽痘病毒的扩大培养后PFU值 | 第46页 |
| 4.2.2 BTV1型SZ97/1 株病毒TCID50的测定结果 | 第46-47页 |
| 4.2.3 重组VP2、VP5蛋白的反应原性鉴定 | 第47页 |
| 4.2.4 疫苗免疫后特异性抗体反应 | 第47-49页 |
| 4.2.5 中和抗体滴度 | 第49页 |
| 4.2.6 疫苗免疫后的淋巴细胞增殖反应 | 第49-51页 |
| 4.2.7 疫苗免疫后的细胞因子水平 | 第51-54页 |
| 4.3 讨论 | 第54-56页 |
| 第五章 DNA疫苗及禽痘病毒重组疫苗在绵羊上的免疫评估 | 第56-62页 |
| 5.1 材料和方法 | 第56-57页 |
| 5.1.1 病毒株和细胞 | 第56页 |
| 5.1.2 质粒 | 第56页 |
| 5.1.3 试剂 | 第56页 |
| 5.1.4 实验动物 | 第56页 |
| 5.1.5 动物实验 | 第56-57页 |
| 5.1.6 免疫后特异性抗体的检测 | 第57页 |
| 5.1.7 中和试验 | 第57页 |
| 5.1.8 血清中细胞因子的检测 | 第57页 |
| 5.2 结果 | 第57-60页 |
| 5.2.1 疫苗免疫后的特异性抗体的检测 | 第57-59页 |
| 5.2.2 中和试验 | 第59页 |
| 5.2.3 血清中细胞因子的检测 | 第59-60页 |
| 5.3 讨论 | 第60-62页 |
| 第六章 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 作者简历 | 第74页 |
