| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第18-43页 |
| 1 卤虫生物学及应用 | 第18-22页 |
| ·卤虫生活史及其形态特征 | 第18-19页 |
| ·卤虫的分类研究 | 第19-20页 |
| ·卤虫的饵料研究 | 第20-21页 |
| ·卤虫在水产养殖中的应用 | 第21-22页 |
| ·作为养殖水产动物的饵料 | 第21-22页 |
| ·作为活体胶囊 | 第22页 |
| ·卤虫在理论研究中的应用 | 第22页 |
| 2.甲壳动物先天性免疫系统及其研究现状 | 第22-34页 |
| ·异己的识别机理-模式识别作用 | 第24-25页 |
| ·屏障作用与滤过作用 | 第25-26页 |
| ·细胞免疫 | 第26-27页 |
| ·体液免疫 | 第27-34页 |
| ·酚氧化酶原激活系统及酚氧化酶 | 第28-31页 |
| ·酚氧化酶原激活系统的性质及生理活性 | 第28-29页 |
| ·酚氧化酶的基因克隆及其分子特征 | 第29-30页 |
| ·酚氧化酶在无脊椎动物胚胎发育中的研究 | 第30-31页 |
| ·超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD) | 第31-33页 |
| ·溶菌酶(Lysozyme,LSZ) | 第33-34页 |
| 3.水产养殖中的病害及其防控方法的研究概况 | 第34-41页 |
| ·水产养殖病害问题 | 第34-36页 |
| ·病害防控方法的研究概况 | 第36-41页 |
| ·微生态制剂 | 第36-37页 |
| ·免疫增强剂 | 第37页 |
| ·热休克蛋白(Heat shock protein,HSP) | 第37-41页 |
| ·热休克蛋白的研究历史 | 第38页 |
| ·热休克蛋白的分类 | 第38-39页 |
| ·热休克蛋白的生物学功能 | 第39-40页 |
| ·水生生物中热休克蛋白的诱导研究及应用前景 | 第40-41页 |
| 4.本论文的研究目的与意义 | 第41-43页 |
| 第二章 面包酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)对卤虫抗弧菌(Vibriocambellii)感染影响作用的研究 | 第43-66页 |
| 1 实验用品 | 第45-47页 |
| ·实验材料 | 第45页 |
| ·试剂 | 第45页 |
| ·仪器设备 | 第45-46页 |
| ·几种常用溶液的配方 | 第46-47页 |
| 2 实验方法 | 第47-53页 |
| ·SC酵母菌准备 | 第47-48页 |
| ·培养及生长曲线测定 | 第48页 |
| ·收获和浓度测定 | 第48页 |
| ·弧菌VC准备 | 第48-49页 |
| ·弧菌VC培养 | 第48-49页 |
| ·弧菌VC收获及浓度测定 | 第49页 |
| ·卤虫培养 | 第49-50页 |
| ·脱壳及培养方法 | 第49页 |
| ·孵化和孵育 | 第49页 |
| ·卤虫密度的测定方法 | 第49-50页 |
| ·卤虫存活率测定实验设计 | 第50页 |
| ·SC酵母菌对卤虫生长的影响 | 第50-51页 |
| ·卤虫免疫酶活性测定 | 第51-52页 |
| ·实验设计 | 第51页 |
| ·卤虫粗酶样品的分离制备 | 第51页 |
| ·粗酶样品蛋白浓度测定 | 第51页 |
| ·卤虫酶活性的测定 | 第51-52页 |
| ·数据分析 | 第52-53页 |
| 3 实验结果 | 第53-60页 |
| ·SC酵母菌生长曲线 | 第53-54页 |
| ·两种SC酵母菌对弧菌VC侵染后卤虫存活率的影响 | 第54-56页 |
| ·两种SC酵母菌对卤虫生长的影响作用 | 第56页 |
| ·两种SC酵母菌对弧菌VC侵染后卤虫PO活性的影响 | 第56-58页 |
| ·两种SC酵母菌对弧菌VC侵染后卤虫SOD活性的影响 | 第58-59页 |
| ·两种SC酵母菌对弧菌VC侵染后卤虫LSZ活性的影响 | 第59-60页 |
| 4 讨论 | 第60-64页 |
| 5 本章小结 | 第64-66页 |
| 第三章 面包酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)热激后对卤虫抗弧菌(Vibrio campbellii)感染影响作用的研究 | 第66-87页 |
| 1 实验用品 | 第67-70页 |
| ·实验材料 | 第67页 |
| ·试剂 | 第67页 |
| ·仪器设备 | 第67-68页 |
| ·几种常用溶液的配方 | 第68-70页 |
| 2 实验方法 | 第70-74页 |
| ·SC酵母菌培养 | 第70页 |
| ·SC酵母菌热激诱导及其热激蛋白Hsp70的检测 | 第70-72页 |
| ·酵母菌热激 | 第70页 |
| ·SC酵母菌蛋白提取 | 第70-71页 |
| ·SC酵母菌蛋白浓度测定 | 第71页 |
| ·酵母菌蛋白提取物的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第71页 |
| ·蛋白免疫印迹(Western Blot)-湿转法 | 第71-72页 |
| ·弧菌VC培养、收获及浓度测定 | 第72页 |
| ·卤虫培养 | 第72页 |
| ·卤虫存活率测定实验设计 | 第72-73页 |
| ·卤虫免疫酶活性测定 | 第73页 |
| ·实验设计 | 第73页 |
| ·卤虫粗酶样品的分离制备 | 第73页 |
| ·粗酶样品蛋白浓度测定 | 第73页 |
| ·卤虫酶活性的测定 | 第73页 |
| ·数据分析 | 第73-74页 |
| 3.实验结果 | 第74-81页 |
| ·SC酵母菌热激处理后Hsp70的表达情况 | 第74页 |
| ·热激WT-SC酵母菌对弧菌VC侵染后卤虫存活率及PO、SOD和LSZ活性的影响 | 第74-78页 |
| ·热激WT对弧菌VC侵染后卤虫存活率的影响 | 第74-76页 |
| ·热激WT对弧菌VC侵染后卤虫PO、SOD及LSZ活性的影响 | 第76-78页 |
| ·热激mnn9-SC酵母菌对弧菌VC侵染后卤虫存活率及三种免疫相关酶活性的影响 | 第78-81页 |
| ·热激mnn9对弧菌VC侵染后卤虫存活率的影响 | 第78-79页 |
| ·热激mnn9对弧菌VC侵染后卤虫PO、SOD及LSZ活性的影响 | 第79-81页 |
| 4 讨论 | 第81-85页 |
| ·弧菌侵染对卤虫存活率及PO、SOD和LSZ三种免疫酶活性的影响 | 第82-83页 |
| ·SC酵母菌热激后对卤虫存活率及PO、SOD和LSZ三种免疫酶活性的影响 | 第83-85页 |
| 5 本章小结 | 第85-87页 |
| 第四章 中国卤虫(Artemia sinica)酚氧化酶原基因的克隆、序列分析及其在早期发育中的表达研究 | 第87-124页 |
| 1 实验用品 | 第89-91页 |
| ·实验材料 | 第89页 |
| ·实验试剂 | 第89-90页 |
| ·总RNA提取及纯化试剂 | 第89页 |
| ·反转录及PCR相关试剂 | 第89-90页 |
| ·核酸电泳试剂 | 第90页 |
| ·DNA凝胶回收及测序前转化感受态细胞试剂 | 第90页 |
| ·其他试剂 | 第90页 |
| ·仪器设备 | 第90-91页 |
| 2 实验方法 | 第91-100页 |
| ·卤虫培养 | 第91页 |
| ·卤虫总RNA的提取 | 第91-93页 |
| ·实验前准备 | 第92页 |
| ·总RNA的提取 | 第92页 |
| ·总RNA模板的纯化 | 第92-93页 |
| ·RNA分子量和浓度的测定 | 第93页 |
| ·引物设计 | 第93-94页 |
| ·RT-PCR | 第94-95页 |
| ·cDNA第一条链的合成 | 第94-95页 |
| ·目的基因序列PCR扩增 | 第95页 |
| ·凝胶电泳中DNA片段的回收 | 第95-96页 |
| ·DNA片段与克隆载体pMD18-T的连接 | 第96-97页 |
| ·质粒向大肠杆菌转化(热激法) | 第97页 |
| ·菌落PCR快速鉴定阳性克隆 | 第97-98页 |
| ·核酸序列测定及序列分析 | 第98页 |
| ·中国卤虫proPO转录本在早期胚胎发育过程中的检测 | 第98-99页 |
| ·半定量RT-PCR方法的建立 | 第98页 |
| ·PCR扩增 | 第98-99页 |
| ·PCR扩增产物的定量检测 | 第99页 |
| ·卤虫PO活性在早期胚胎发育过程中的检测 | 第99-100页 |
| ·卤虫粗酶样品的制备 | 第99-100页 |
| ·卤虫粗酶样品蛋白浓度测定 | 第100页 |
| ·卤虫PO活性测定 | 第100页 |
| ·PO活性的数据分析 | 第100页 |
| 3 实验结果 | 第100-118页 |
| ·总RNA的获得与鉴定 | 第100-101页 |
| ·中国卤虫proPO两片段cDNA扩增结果 | 第101-102页 |
| ·测序结果及序列分析 | 第102-114页 |
| ·测序结果 | 第102页 |
| ·中国卤虫proPO基因序列分析 | 第102页 |
| ·中国卤虫proPO基因核酸序列推断的氨基酸序列分析 | 第102-110页 |
| ·中国卤虫proPO氨基酸序列的系统进化分析 | 第110-111页 |
| ·中国卤虫proPO基因编码蛋白的二级结构、卷曲螺旋与疏水性分析 | 第111-113页 |
| ·中国卤虫proPO基因编码蛋白的三级结构模型构建与功能结构域分析 | 第113-114页 |
| ·中国卤虫proPO基因及PO活性在早期胚胎发育中的表达 | 第114-118页 |
| ·半定量RT-PCR方法的确立 | 第114-116页 |
| ·中国卤虫proPO和β-actin的RT-PCR | 第114-115页 |
| ·半定量RT-PCR循环数的确定 | 第115-116页 |
| ·不同发育时期卤虫proPO基因的表达 | 第116-117页 |
| ·不同发育时期卤虫PO活性的表达 | 第117-118页 |
| 4 讨论 | 第118-121页 |
| 5 本章小结 | 第121-124页 |
| 全文总结 | 第124-126页 |
| 本文主要创新点 | 第126-127页 |
| 论文文献 | 第127-149页 |
| 附录 | 第149-151页 |
| 致谢 | 第151-152页 |
| 个人简历及发表的学术论文 | 第152-153页 |
