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锥状斯氏藻休眠孢囊差异表达基因的筛选及能量代谢相关基因在不同休眠条件下的表达研究

摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
第一章 文献综述第13-41页
    1.1 有害藻华第13-19页
        1.1.1 成因及危害第13-16页
        1.1.2 国内外研究进展第16-19页
    1.2 甲藻第19-34页
        1.2.1 甲藻的生存策略与生活史第20-23页
        1.2.2 有关休眠孢囊的研究第23-32页
        1.2.3 锥状斯氏藻及其休眠孢囊第32-34页
    1.3 差异表达基因的筛选和抑制性消减杂交方法的选择第34-39页
    1.4 本研究的目的和意义第39-41页
第二章 建立大量获取锥状斯氏藻休眠孢囊的方法第41-55页
    2.1 实验材料第41-42页
        2.1.1 藻种第41-42页
        2.1.2 试剂、仪器第42页
    2.2 实验方法第42-45页
        2.2.1 准备细沙第42页
        2.2.2 培养基配制第42-44页
        2.2.3 藻种细胞(孢囊)计数第44页
        2.2.4 藻种与细沙混合、培养第44页
        2.2.5 休眠孢囊识别、计数第44-45页
        2.2.6 数据分析第45页
    2.3 结果第45-50页
        2.3.1 休眠孢囊观察、鉴别第45-46页
        2.3.2 休眠孢囊产量和产率统计第46-49页
        2.3.3 休眠孢囊的收集第49-50页
    2.4 讨论第50-52页
    2.5 小结第52-55页
第三章 锥状斯氏藻抑制性消减文库的构建和分析第55-95页
    3.1 实验流程第55-56页
    3.2 实验材料第56-58页
        3.2.1 藻细胞第56-57页
        3.2.2 材料及试剂第57-58页
    3.3 实验方法第58-74页
        3.3.1 RNA提取第58-59页
        3.3.2 DNase I处理第59页
        3.3.3 cDNA合成第59-60页
        3.3.4 GAPDH检测反转录效率第60-61页
        3.3.5 Rsa I酶切第61-62页
        3.3.6 接头连接第62-63页
        3.3.7 消减杂交第63-65页
        3.3.8 差异表达基因的PCR扩增第65-67页
        3.3.9 消减产物检测第67-68页
        3.3.10 斑点杂交第68-73页
        3.3.11 消减序列分析第73-74页
    3.4 结果第74-93页
        3.4.1 RNA质量检测第74-76页
        3.4.2 Rsa Ⅰ酶切结果第76页
        3.4.3 接头连接效率检测第76-77页
        3.4.4 消减效率检测第77页
        3.4.5 消减产物PCR扩增第77-78页
        3.4.6 菌液PCR检测第78-79页
        3.4.7 斑点杂交检测第79-80页
        3.4.8 消减文库生物信息学分析第80-91页
        3.4.9 剪接前导序列检测第91-93页
    3.5 讨论第93-94页
    3.6 小结第94-95页
第四章 锥状斯氏藻能量代谢相关基因的表达研究第95-131页
    4.1 引言第95-97页
    4.2 对三个被选能量代谢相关基因的介绍第97-103页
        4.2.1 ATP合成酶β亚基第97-100页
        4.2.2 细胞色素c氧化酶第100-101页
        4.2.3 翻译延伸因子第101-103页
    4.3 实时荧光定量PCR内参基因的筛选第103-111页
        4.3.1 实验材料第104页
        4.3.2 实验方法第104-106页
        4.3.3 结果第106-111页
        4.3.4 讨论第111页
    4.4 功能基因(ATP_syntβ、CO1、EF)转录水平分析第111-131页
        4.4.1 实验材料第111-112页
        4.4.2 实验方法第112-113页
        4.4.3 结果第113-126页
        4.4.4 讨论第126-130页
        4.4.5 小结第130-131页
第五章 结论、创新点与展望第131-133页
参考文献第133-149页
缩略语中英文对照表第149-151页
致谢第151-153页
作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果第153页

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