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RNA干扰调控水稻齿矮病毒在介体褐飞虱培养细胞内的持久侵染

摘要第7-9页
Abstract第9-10页
1. 前言第11-27页
    1.1 水稻锯齿叶矮缩病的相关研究进展第11-17页
        1.1.1 水稻锯齿叶矮缩病的发现与发生第11-12页
        1.1.2 病毒的寄主范围及危害症状第12-13页
        1.1.3 病毒的特征及分类地位第13-15页
        1.1.4 病毒的分子生物学研究第15-16页
        1.1.5 RRSV传播介体及其传毒方式第16-17页
    1.2 昆虫细胞培养及其应用第17-21页
        1.2.1 细胞培养概述第17-18页
        1.2.2 昆虫细胞培养的应用第18-20页
        1.2.3 昆虫细胞培养基第20-21页
    1.3 昆虫体内的抗病毒免疫第21-25页
        1.3.1 RNAi的机制及其应用第22-24页
        1.3.2 RNAi在抗病毒方面的应用第24-25页
    1.4 本实验的研究目的和意义第25-27页
2 材料和方法第27-43页
    2.1 材料第27页
    2.2 实验试剂与实验仪器第27-28页
    2.3 实验方法第28-43页
        2.3.1 褐飞虱细胞的培养第28页
        2.3.2 源于褐飞虱抗病毒免疫基因片段dsRNA的体外合成第28-35页
        2.3.3 RRSV病毒侵染液的筛选第35-37页
        2.3.4 目的基因dsRNA转染对RRSV侵染褐飞虱单层培养细胞的影响第37页
        2.3.5 免疫荧光检测第37-38页
        2.3.6 RT-qPCR检测第38-43页
3. 结果与分析第43-61页
    3.1 褐飞虱细胞的体外培养第43-44页
    3.2 RRSV高效侵染液的制备第44-47页
    3.3 RRSV的侵染激活了褐飞虱培养细胞内RNAi途径相关基因的表达第47-48页
    3.4 褐飞虱RNAi途径相关基因dsRNA的合成第48-50页
        3.4.1 褐飞虱RNAi途径相关基因的扩增第48-49页
        3.4.2 褐飞虱RNAi途径相关基因dsRNA的体外合成第49-50页
    3.5 褐飞虱调控RRSV侵染细胞的RNAi途径第50-59页
        3.5.1 siRNA途径调控RRSV在培养细胞中的侵染第51-53页
        3.5.2 miRNA可能不参与调控RRSV对褐飞虱培养细胞的侵染第53-55页
        3.5.3 piRNA途径对RRSV侵染褐飞虱培养细胞的影响较小第55-57页
        3.5.4 褐飞虱Eri-like基因对RRSV侵染其培养细胞的调控作用不显著第57-59页
    3.6 RNAi相关基因dsRNA对褐飞風培养细胞内相应基因表达量的影响第59-61页
4. 讨论第61-66页
    4.1 褐飞虱RNAi抗病毒途径分析第61-63页
    4.2 关于RRSV侵染不稳定现象的分析第63-66页
参考文献第66-77页
附录第77-79页
致谢第79页

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