摘要 | 第7-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
1. 前言 | 第11-27页 |
1.1 水稻锯齿叶矮缩病的相关研究进展 | 第11-17页 |
1.1.1 水稻锯齿叶矮缩病的发现与发生 | 第11-12页 |
1.1.2 病毒的寄主范围及危害症状 | 第12-13页 |
1.1.3 病毒的特征及分类地位 | 第13-15页 |
1.1.4 病毒的分子生物学研究 | 第15-16页 |
1.1.5 RRSV传播介体及其传毒方式 | 第16-17页 |
1.2 昆虫细胞培养及其应用 | 第17-21页 |
1.2.1 细胞培养概述 | 第17-18页 |
1.2.2 昆虫细胞培养的应用 | 第18-20页 |
1.2.3 昆虫细胞培养基 | 第20-21页 |
1.3 昆虫体内的抗病毒免疫 | 第21-25页 |
1.3.1 RNAi的机制及其应用 | 第22-24页 |
1.3.2 RNAi在抗病毒方面的应用 | 第24-25页 |
1.4 本实验的研究目的和意义 | 第25-27页 |
2 材料和方法 | 第27-43页 |
2.1 材料 | 第27页 |
2.2 实验试剂与实验仪器 | 第27-28页 |
2.3 实验方法 | 第28-43页 |
2.3.1 褐飞虱细胞的培养 | 第28页 |
2.3.2 源于褐飞虱抗病毒免疫基因片段dsRNA的体外合成 | 第28-35页 |
2.3.3 RRSV病毒侵染液的筛选 | 第35-37页 |
2.3.4 目的基因dsRNA转染对RRSV侵染褐飞虱单层培养细胞的影响 | 第37页 |
2.3.5 免疫荧光检测 | 第37-38页 |
2.3.6 RT-qPCR检测 | 第38-43页 |
3. 结果与分析 | 第43-61页 |
3.1 褐飞虱细胞的体外培养 | 第43-44页 |
3.2 RRSV高效侵染液的制备 | 第44-47页 |
3.3 RRSV的侵染激活了褐飞虱培养细胞内RNAi途径相关基因的表达 | 第47-48页 |
3.4 褐飞虱RNAi途径相关基因dsRNA的合成 | 第48-50页 |
3.4.1 褐飞虱RNAi途径相关基因的扩增 | 第48-49页 |
3.4.2 褐飞虱RNAi途径相关基因dsRNA的体外合成 | 第49-50页 |
3.5 褐飞虱调控RRSV侵染细胞的RNAi途径 | 第50-59页 |
3.5.1 siRNA途径调控RRSV在培养细胞中的侵染 | 第51-53页 |
3.5.2 miRNA可能不参与调控RRSV对褐飞虱培养细胞的侵染 | 第53-55页 |
3.5.3 piRNA途径对RRSV侵染褐飞虱培养细胞的影响较小 | 第55-57页 |
3.5.4 褐飞虱Eri-like基因对RRSV侵染其培养细胞的调控作用不显著 | 第57-59页 |
3.6 RNAi相关基因dsRNA对褐飞風培养细胞内相应基因表达量的影响 | 第59-61页 |
4. 讨论 | 第61-66页 |
4.1 褐飞虱RNAi抗病毒途径分析 | 第61-63页 |
4.2 关于RRSV侵染不稳定现象的分析 | 第63-66页 |
参考文献 | 第66-77页 |
附录 | 第77-79页 |
致谢 | 第79页 |