| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文章综述 | 第10-15页 |
| 1.1 地膜覆盖技术的发展与作用 | 第10-13页 |
| 1.1.1 地膜覆盖技术的发展 | 第10-11页 |
| 1.1.2 地膜覆盖对土壤水分状况的影响 | 第11-12页 |
| 1.1.3 地膜覆盖栽培模式的增温效应 | 第12-13页 |
| 1.2 基因差异表达技术的研究进展 | 第13-14页 |
| 1.2.1 mRNA差异显示技术 | 第13页 |
| 1.2.2 代表性差异分析 | 第13页 |
| 1.2.3 抑制性消减杂交技术 | 第13-14页 |
| 1.2.4 cDNA-AFLP技术原理及其应用 | 第14页 |
| 1.3 研究的目的与意义 | 第14-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-24页 |
| 2.1 实验材料、主要仪器及主要试剂 | 第15-16页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第15页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第15-16页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第16页 |
| 2.2 试验方法 | 第16-17页 |
| 2.2.1 RNA提取步骤 | 第16-17页 |
| 2.2.2 提取RNA质量检测 | 第17页 |
| 2.3 玉米全膜覆盖cDNA-AFLP体系的建立 | 第17-22页 |
| 2.3.1 1st strand cDNA合成反应 | 第17-18页 |
| 2.3.2 2nd strand cDNA合成反应 | 第18页 |
| 2.3.3 2nd strand cDNA纯化 | 第18-19页 |
| 2.3.4 接头连接与引物设计 | 第19页 |
| 2.3.5 cDNA双酶切体系的建立 | 第19-20页 |
| 2.3.6 双酶切后的预扩增体系 | 第20-21页 |
| 2.3.7 选择性扩增 | 第21-22页 |
| 2.4 电泳及差异片段回收 | 第22-24页 |
| 2.4.1 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第22-23页 |
| 2.4.2 银染程序 | 第23页 |
| 2.4.3 差异片段的回收 | 第23-24页 |
| 第三章 结果与分析 | 第24-37页 |
| 3.1 玉米叶片总RNA的提取 | 第24-27页 |
| 3.1.1 总RNA提取质量 | 第24页 |
| 3.1.2 cDNA双链合成及检测 | 第24-25页 |
| 3.1.3 cDNA双酶切连接结果 | 第25页 |
| 3.1.4 双酶切后预扩增体系的优化 | 第25-26页 |
| 3.1.5 选择性扩增 | 第26-27页 |
| 3.2 引物设计及最优组合筛选 | 第27-30页 |
| 3.2.1 引物的设计 | 第27页 |
| 3.2.2 最优引物组合筛选 | 第27-30页 |
| 3.3 差异片段的回收及检测 | 第30-31页 |
| 3.3.1 差异片段的回收 | 第30页 |
| 3.3.2 回收差异片段的检测 | 第30-31页 |
| 3.4 差异条带的测序、查找同源序列以及功能预测 | 第31-34页 |
| 3.5 讨论 | 第34-37页 |
| 3.5.1 试验方法及特点 | 第34页 |
| 3.5.2 cDNA-AFLP试验体系应注意的问题 | 第34-35页 |
| 3.5.3 cDNA-AFLP测序结果的序列同源性分析 | 第35-37页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 附录1 | 第44-49页 |
