摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
引言 | 第12-13页 |
第一章 综述 | 第13-19页 |
1 下丘脑-脑垂体-性腺轴(HPG axis)的研究概述 | 第13-15页 |
1.1 HPG轴是鱼类生殖调控的核心 | 第13页 |
1.2 GnRH概述 | 第13-14页 |
1.3 GnRH、LH和FSH的信号通路 | 第14-15页 |
2 芳香化酶基因(cyp19a)的研究进展 | 第15-16页 |
3 DNA甲基化的研究概况 | 第16-18页 |
3.1 基因组中DNA甲基化的分布 | 第16-17页 |
3.2 DNA甲基化对基因转录的关系 | 第17页 |
3.3 启动子区域DNA甲基化与转录之间的关系 | 第17页 |
3.4 基因内部DNA甲基化与基因转录的关系 | 第17-18页 |
4 HPG轴相关基因表观遗传学调控机制是鱼类生殖生物学研究的热点 | 第18页 |
5 本研究目的及意义 | 第18-19页 |
第二章 花鲈脑、性腺转录组分析 | 第19-28页 |
1 实验材料与方法 | 第19-21页 |
2 花鲈转录组结果分析 | 第21-22页 |
2.1 测序数据筛选、从头拼接结果 | 第21页 |
2.2 Unigenes注释与分析 | 第21-22页 |
3 HPG轴相关基因筛选与其表达 | 第22-24页 |
4 花鲈脑以及性腺组织中基因表达的探究 | 第24-27页 |
5 讨论 | 第27-28页 |
第三章 花鲈脑、精巢以及卵巢的DNA甲基化研究 | 第28-52页 |
第一节 实验材料与方法 | 第28-41页 |
1 实验材料 | 第28页 |
2 主要实验试剂及仪器 | 第28-29页 |
2.1 试剂 | 第28页 |
2.2 主要仪器 | 第28-29页 |
3 实验方法 | 第29-41页 |
3.1 甲基化敏感扩增多态性(MSAP)实验 | 第29-33页 |
3.2 重亚硫酸氢盐修饰基因组DNA | 第33-34页 |
3.3 基于重亚硫酸氢盐修饰的BSP实验 | 第34页 |
3.4 切胶回收 | 第34页 |
3.5 TA克隆 | 第34-35页 |
3.6 质粒提取(Axygen小提试剂盒) | 第35页 |
3.7 染色体步移技术(genome walking) | 第35-37页 |
3.8 免疫组化 | 第37-39页 |
3.9 PGL3-cyp19a质粒构建 | 第39-41页 |
第二节 花鲈脑、精巢以及卵巢DNA甲基化研究结果与分析 | 第41-52页 |
1 MSAP实验结果(全基因组DNA甲基化) | 第41-44页 |
1.1 花鲈脑、精巢和卵巢组织基因组DNA提取 | 第41页 |
1.2 预扩增反应结果 | 第41-42页 |
1.3 选择性扩增结果 | 第42页 |
1.4 PAGE电泳 | 第42页 |
1.5 DNA甲基化模式分析 | 第42-43页 |
1.6 花鲈脑、精巢以及卵巢基因组DNA甲基化水平 | 第43-44页 |
2 花鲈芳香化酶(Cyp19a)基因的表达研究 | 第44-47页 |
2.1 花鲈芳香化酶(Cyp19a)基因的特征 | 第44-45页 |
2.2 花鲈cyp19a mRN A分布与免疫组化分析 | 第45-47页 |
3 花鲈cyp19a(SP-cyp19a)启动子甲基化水平研究 | 第47-51页 |
3.1 SP-cyp19a启动子特征 | 第47页 |
3.2 SP-cyp19a启动子在脑、精巢以及卵巢中的甲基化差异 | 第47页 |
3.3 SP-cyp19a启动子功能分析 | 第47-51页 |
4 讨论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
攻读硕士期间完成的论文 | 第58-59页 |
致谢 | 第59页 |