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花鲈HPG轴转录组与cyp19a基因的表达与功能分析

摘要第4-6页
ABSTRACT第6-8页
引言第12-13页
第一章 综述第13-19页
    1 下丘脑-脑垂体-性腺轴(HPG axis)的研究概述第13-15页
        1.1 HPG轴是鱼类生殖调控的核心第13页
        1.2 GnRH概述第13-14页
        1.3 GnRH、LH和FSH的信号通路第14-15页
    2 芳香化酶基因(cyp19a)的研究进展第15-16页
    3 DNA甲基化的研究概况第16-18页
        3.1 基因组中DNA甲基化的分布第16-17页
        3.2 DNA甲基化对基因转录的关系第17页
        3.3 启动子区域DNA甲基化与转录之间的关系第17页
        3.4 基因内部DNA甲基化与基因转录的关系第17-18页
    4 HPG轴相关基因表观遗传学调控机制是鱼类生殖生物学研究的热点第18页
    5 本研究目的及意义第18-19页
第二章 花鲈脑、性腺转录组分析第19-28页
    1 实验材料与方法第19-21页
    2 花鲈转录组结果分析第21-22页
        2.1 测序数据筛选、从头拼接结果第21页
        2.2 Unigenes注释与分析第21-22页
    3 HPG轴相关基因筛选与其表达第22-24页
    4 花鲈脑以及性腺组织中基因表达的探究第24-27页
    5 讨论第27-28页
第三章 花鲈脑、精巢以及卵巢的DNA甲基化研究第28-52页
    第一节 实验材料与方法第28-41页
        1 实验材料第28页
        2 主要实验试剂及仪器第28-29页
            2.1 试剂第28页
            2.2 主要仪器第28-29页
        3 实验方法第29-41页
            3.1 甲基化敏感扩增多态性(MSAP)实验第29-33页
            3.2 重亚硫酸氢盐修饰基因组DNA第33-34页
            3.3 基于重亚硫酸氢盐修饰的BSP实验第34页
            3.4 切胶回收第34页
            3.5 TA克隆第34-35页
            3.6 质粒提取(Axygen小提试剂盒)第35页
            3.7 染色体步移技术(genome walking)第35-37页
            3.8 免疫组化第37-39页
            3.9 PGL3-cyp19a质粒构建第39-41页
    第二节 花鲈脑、精巢以及卵巢DNA甲基化研究结果与分析第41-52页
        1 MSAP实验结果(全基因组DNA甲基化)第41-44页
            1.1 花鲈脑、精巢和卵巢组织基因组DNA提取第41页
            1.2 预扩增反应结果第41-42页
            1.3 选择性扩增结果第42页
            1.4 PAGE电泳第42页
            1.5 DNA甲基化模式分析第42-43页
            1.6 花鲈脑、精巢以及卵巢基因组DNA甲基化水平第43-44页
        2 花鲈芳香化酶(Cyp19a)基因的表达研究第44-47页
            2.1 花鲈芳香化酶(Cyp19a)基因的特征第44-45页
            2.2 花鲈cyp19a mRN A分布与免疫组化分析第45-47页
        3 花鲈cyp19a(SP-cyp19a)启动子甲基化水平研究第47-51页
            3.1 SP-cyp19a启动子特征第47页
            3.2 SP-cyp19a启动子在脑、精巢以及卵巢中的甲基化差异第47页
            3.3 SP-cyp19a启动子功能分析第47-51页
        4 讨论第51-52页
参考文献第52-58页
攻读硕士期间完成的论文第58-59页
致谢第59页

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